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1、 子宫颈癌细胞生物行为影响因素的实验研究 【摘要】目的：探讨子宫颈癌细胞生物行为影响因素的相关实验方法。方法：选择67例子宫颈癌患者，根据手术方式分为观察1组（行腹腔镜子宫切除术）和观察2组（开腹手术子宫切除术）各35例、32例，选择同期子宫肌瘤手术患者30例为对照组（行子宫肌瘤切除术）。结果：观察组1组术后宫颈癌细胞凋亡率高于术前（P0.05）；观察1组宫颈癌细胞凋亡诱导基因Trail、转移抑制基因NM23水平术后高于术前（P0.05），凋亡抑制基因Bcl2、转移促进基因MAT1水平术后低于术前（P0.05）。1.2方法1.2.1手术方法 观察1组行腹腔镜手术，其中14例行腹腔镜子宫全切除术
2、，21例行广泛子宫切除及双附件切除，并进行盆腔淋巴结清扫术。观察2组行传统开腹手术，进行广泛子宫切除及盆腔淋巴结清扫。对照组于腹腔镜下行子宫肌瘤切除术。1.2.2检测方法 所有患者均于术前30min和术后即刻取其子宫颈组织。采用MoFlo XDP 流式细胞仪（美国贝克曼库尔公司）检测细胞凋亡率。制备单细胞悬液，取5只试管，分别加入500ml单细胞悬液，于其中4只试管中分别加入Trail、NM23、MAT1、Bcl2单抗工作液20ul,余下的一只试管中加入阴性对照组液20ul，采用MoFlo XDP 流式细胞仪（美国贝克曼库尔公司）检测Trail、NM23、MAT1、Bcl2基因表达。1.3统计
3、学方法 所有数据输入SPSS17.0软，均数比较用t检验。2 结果2.1 三组细胞凋亡率比较 宫颈癌细胞凋亡率，术前为（5.211.24）%，观察1组术后为（27.343.26）%，观察2组术后为（5.441.37）%，观察1组术后高于术前，差异有统计学意义（t=37.54，P0.05）；对照组正常宫颈细胞凋亡率术前术后分别为（16.842.43）%、（17.192.25）%，术前术后无明显差异（t=0.60，P0.05）。2.2子宫颈癌细胞凋亡基因及转移相关基因的改变 观察1组Trail、NM23水平术后高于术前，MAT1、Bcl2水平术后低于术前，差异有统计学意义（P0.05）；观察2组上
4、述各指标术前术后无明显差异。见表1。表1 子宫颈癌细胞凋亡基因及转移相关基因的改变组别TrailMAT1Bcl2NM23术前62.245.96179.5434.3556.674.4749.785.46观察1组术后（35例）82.377.11 a121.3226.05 a28.413.65 a66.576.92 a观察2组术后（32例）64.486.22177.4832.7554.914.7848.435.62注：a表示与术前比较P0.052.3正常子宫颈细胞的相关基因表达水平的改变 对照组子宫颈细胞的相关基因表达水平术前术后无明显差异。见表2。表2正常子宫颈细胞的相关基因表达水平的改变时间Tr
5、ailMAT1Bcl2NM23对照组术前(30例)34.813.2625.713.4838.834.3917.562.43对照组术后(30例)36.443.1924.623.2540.665.1918.472.52t1.9571.2541.4751.424P0.0550.2150.1460.1603讨论肿瘤的发生是由于细胞增殖异常或凋亡异常引起细胞总数的动态平衡被破坏，使细胞向恶性转化导致。表现为细胞自主性生长的生物学行为。诸多因素如病毒感染、电离辐射等均可刺激细胞生长因子的释放、直接损伤细胞、引起激素水平变化等，进而影响细胞凋亡3。本组资料中，观察1组术后宫颈癌细胞凋亡率高于术前，观察2组和
6、对照组手术前后均无明显变化。提示腹腔镜手术时机体环境的改变可导致宫颈癌细胞凋亡增加，并不影响正常子宫内膜细胞的凋亡。开腹手术对宫颈癌细胞凋亡无影响。细胞凋亡是受多基因调控的细胞的自杀现象。Trail（肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体）与其受体结合后，可诱导肿瘤细胞、病毒感染细胞、转化细胞发生凋亡。Bcl2（B淋巴细胞瘤-2基因）具有抑制细胞凋亡和延长其寿命的作用。MAT1（肿瘤相关基因1）对细胞的生长具有调节作用，可影响肿瘤细胞的转移，其过度表达表示肿瘤浸润度高、侵袭性大、转移率高4。NM23为肿瘤转移抑制基因。本组资料中，观察1组Trail、NM23水平术后高于术前、Bcl2、MAT1水平术后低
7、于术前，提示腹腔镜手术时机体环境的改变诱导癌细胞凋亡的能力增强、抑制其凋亡的能力下降，抑制癌细胞转移的能力增强、促进其转移的能力下降，而开腹手术对癌细胞凋亡和转移不产生影响。总之，腹腔镜手术有利于诱导癌细胞凋亡，并不增加细胞增殖和转移能力，安全有效，值得推广。参考文献1陈扬平,王刚.CO2气腹环境对卵巢癌细胞生物学行为的影响J. 肿瘤学杂志,2014,20(3):186-188.2袁喜红,李坚,黄琪.腹腔镜手术CO2气腹对人结肠癌细胞血路肝 转移的影响J.江西医药, 2016,51(4):311-313.3田永刚,许军,刘昶.人工气腹对结肠癌细胞生物学行为的影响J.腹腔镜外科杂志,2009,14(10):727-729.4 Neuhaus SJ，Texler M，Hewett PJ，et alPort-site metastases followinglaparoscopic surgeryJ. British Journal of Surgery,2010,85(6):735-741-全文完-
