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【最新】布病[1].doc

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1第五节 布鲁氏菌病布鲁氏菌病(Brucellosis )是由布鲁氏菌(Brucella)引起的人兽共患传染病,广泛分布于世界各地据报道,有 170 多个国家和地区有布鲁氏菌病疫情人布病发病率超过1/10 万的国家有:希腊、意大利、美国、阿根廷、阿拉伯、老挝、黎巴嫩、匈牙利、伊朗、爱尔兰、北爱尔兰、西班牙、叙利亚、马耳他、墨西哥、新西兰、秘鲁、原苏联和葡萄牙,共 19 个有 50 个国家和地区的绵羊、山羊存在布病流行,主要集中于非洲和南美洲等;有 101 个国家和地区的牛有布病存在,主要分布于非洲、中美洲、南美洲、东南亚及欧洲南部等;有 33 个国家和地区的猪有布病存在,主要集中于美洲、非洲北部和欧洲南部等世界上畜间布病以牛型布鲁氏菌感染牛的布病为主,占有家畜布病分布的国家和地区的一半以上最近在海洋哺乳动物体内分离到布鲁氏菌,扩大了本菌的生态范围迄今为止,世界上已有 12 个国家和地区宣布清除了布病,其中有挪威、瑞典、丹麦、瑞士、捷克斯洛伐克、罗马尼亚、英国、荷兰、日本、奥地利、塞浦路斯和保加利亚另有冰岛和维尔京群岛一直没有发现人畜布病存在历史上,布鲁氏菌病在我国曾经是危害极为严重的人兽共患传染病。

解放后,布病防治得到高度重视,使布病的发生和感染率均有大幅度下降1952~1982 年间对总共 3050万头羊、牛、猪和 457 万份人的血清样品调查表明,布鲁氏菌感染阳性率家畜和人分别为41.27%和 8.43%,而 1982~1990 年间对总共 4920 万头牛、羊、猪和 788 万人的血清学调查表明,布鲁氏菌感染阳性率在家畜和人分别骤降至 0.55%和 0.75%但是,自 90 年代起,布鲁氏菌病感染率逐渐下降的趋势发生了变化1991~2001 年间,对总共 2.20 万份人的血清调查显示,布鲁氏菌感染阳性率由 90 年代初的 0.35%上升至 90 年代后期的 3.57%,而每年人的发病病例数则增加 3~6 倍就总体而言,人群的布病是不能相互传染的,人间的布病来自于畜间,人群的布病状况反映了畜间布病的现状在历史上,无论何时何地人间出现布病病例,一定在畜间有活动性疫源一、病 原(一)分类1985 年 WHO 布鲁氏菌病专家委员会将布鲁氏菌属分为 6 个种(其发现年代及发现者见表 1) ,19 个生物型(见表 2) 即马耳他布鲁氏菌(羊布鲁氏菌 Br.melltensis ,3 个生物型)、流产布鲁氏菌(牛种布鲁氏菌 Br.abortus ,8 个生物型)、猪布鲁氏菌(Br.suis,5 个生物型) ,以及绵羊附睾种布鲁氏菌(Br.ovis) 、沙林鼠布鲁氏菌 (Br.neotomae)和犬布鲁氏菌(Br. canis)各有 1 个生物型。

表 1 布鲁氏菌的发现年代 菌种名 发现者 国家 宿主1887 羊种布鲁氏菌(Br.melltensis) Bruce 马尔他 羊1897 牛种布鲁氏菌(Br.abortus) Bang 丹麦 牛1914 猪种布鲁氏菌(Br.suis) Traum 美国 猪1953 绵羊附睾种布鲁氏菌(Br.ovis) Buddle 新西兰 公绵羊1956 沙林鼠布鲁氏菌(Br.neotomae) Stoenner 美国 沙林鼠1966 犬布鲁氏菌(Br. canis) Carmichael 美国 犬20 世纪 90 年代,人们陆续从海洋动物包括海豹、海豚、小鲸鱼、鲸鱼及水獭中分离到了第 7 种生物型的布鲁氏菌,并且证明从海洋动物中分离到的布鲁氏菌的致病性和分子特征与上述 6 种布鲁氏菌不同,是一种新的生物型布鲁氏菌,虽然目前这种生物型布鲁氏菌还没有得到正式命名,但已经被普遍认可我国已分离到 15 个生物型,即羊种布鲁氏菌 3 个型,牛布鲁氏菌 8 个型,猪布鲁氏菌2的 1 型和 3 型,绵羊附睾种布鲁氏菌和犬布鲁氏菌各 1 个型据张士义等(1999 年) 报道,我国从 1990 年以来从人和动物分离的 220 株菌中,羊布鲁氏菌占 79.10%,牛布鲁氏菌占12.27%,猪布鲁氏菌占 0.45%,犬布鲁氏菌占 2.21%,未定种占 5.51%。

二)形态学布鲁氏菌是一组球状、球杆状或卵圆形细菌羊种菌大小为 0.3~0.6μm,其它各种菌为 0.6~1.5×0.5 ~0.7μm 球杆菌或短杆菌,初次分离时多呈球状和卵圆形,传代培养后渐呈短小杆状革兰氏染色阴性,不呈两极浓染在一般涂片中常呈单个排列,极少数呈两个相连或呈短链条状无鞭毛,不能产生芽孢,有毒力的菌株可带菲薄的荚膜不同种与生物型菌株之间,形态及染色特性等方面无明显差别三)生物学特性1.基因组国内外对布鲁氏菌 6 个种 DNA 的 G+C mol%比例的测定表明,其含量为55%~59%布鲁氏菌种间 DNA 的 G+C mol%波动较少,成为布鲁氏菌属与其它菌属相区别的特点之一目前已完成羊种布鲁氏菌和牛种流产布鲁氏菌的基因组序列测定工作2002 年,Del Vecchio 等人完成羊种布鲁氏菌 M16 株的全基因序列测定和注释工作,该项研究结果提供了羊种布鲁氏菌基因组大小、结构和生态复杂性间相互作用的信息目前,美国 Scranton大学的 Del Vecchio 等人正对布鲁氏菌基因组注释进行修正,并对在研究中出现的新问题做进一步探讨2.生化特性布鲁氏菌不需要氧化高铁血红素和箊酰胺腺嘌呤二核苷酸。

过氧化氢酶阳性,氧化酶通常为阳性,还原硝酸盐,有的种产生不同程度的 H2S,水解尿素,不产生吲哚,不液化明胶,不溶血,不产生乙酰甲基甲醇(V-P 实验阴性) ,不能利用柠檬酸盐,甲基红反应阴性,不能从 O-硝基酚-β-D-半乳糖苷中释放 O-硝基酚,不使葡萄糖产酸,石蕊牛乳无变化新陈代谢主要是氧化,在常规培养基中对碳水化合物的发酵作用很低,需要复合氨基酸,维生素 B1,生物素和箊酰胺,有泛酸钙和中性赤藓醇存在时,可促进某些菌株的生长3.抵抗力布鲁氏菌对外界的理化因素有一定的抵抗力在合适条件下,本菌在环境中能存活很长时间,在自然条件下与其它不产生芽孢的细菌相比有较高的抗灭活能力物理因素的影响:稀释的布鲁氏菌菌液通过加热容易被杀死,巴氏消毒法也能够杀死本菌,而浓的布鲁氏菌液,中等程度的加热不能灭活,必须反复加热或者煮沸才能将其杀死布鲁氏菌对于正常消毒剂量的射线是敏感的,干燥的本菌可以存活很久,特别是在含有蛋白质的培养基中在灰尘或土壤中 10 周以上仍有活力,在水中能存活 10~70d,存活时间的长短与水的温度有关,在低温中能延长存活时间,在冰冻组织中可存活许多年本菌在牛粪中至少可存活 120d,在流产胎儿中至少可存活 75d,在子宫渗出液中可存活 200d以上,如果温度保持接近 0℃,可在液体肥料中存活 2 年以上。

化学因素的影响:有许多消毒剂都易将其杀死10g/L 的酚溶液在 37℃时,15s 可完全将其杀死,周围环境温度为 15℃时甲醛溶液是常用消毒剂中最有效的,1mL/L 浓度的二甲苯能有效地消灭液体肥料中的布鲁氏菌,在液体肥料中加 20kg/m3 的氰氨化钙是有效的,用此法消毒至少要作用二周对人体或动物体的消毒可用酚的代用品,也可用酒精、异丙醇、碘伏(jodophjots)或稀释的次氯酸盐溶液抗生素的影响:布鲁氏菌对四环素最敏感,其次是链霉素和土霉素,而对杆菌肽、多粘菌素 B、多粘菌素 M 和林可霉素有很强的抵抗力3表 2 布鲁氏菌分类一览表染料抑菌 氧化代谢试验硫堇 复红凝集Tb 噬菌体裂解种别生物型代表性菌株名称CO2需要H2S产生1:2.5万1:5万1:10 万1:5万1:10万A M R RTD104RTD常见宿主1 16M - - - + + + + - + - - - + - + + - - - - - - - + + +2 63/9 - - - + + + + + - - - - + - + + - - - - - - - + + +羊种3 ether - - - + + + + + + - - - + - + + - - - - - - - + + +绵羊山羊1 544 ± + - - - + + + - - + + + - + + - - - - + + + + + +2 86/8/59 ± + - - - - - - - - + + + - + + - - - - + + + + + +3 Tulya ± + + + + + + + - - + + + - + + - - - - + + + + + +4 292 ± + - - - + + - + - + + + - + + - - - - + + + + + +5 B3196 - - - + + + + - + - + + + - + + - - - - + + + + + +6 870 - ± - + + + + + - - + + + - + + - - - - + + + + + +7 63/75 - ± - + + + + + + - + + + - + + - - - - + + + + + +牛种9 L68 - + - + + + + - + - + + + - + + - - - - + + + + + +牛1 1330 - + + - + - - - - - - + ± + - - + + + + + + + ± + +2 Tnolnson - - + - + - - - - - - + - - - + + + + + + + + - + +3 686 - - + + + - - - - - - + + - ± + + + + - - - + ± + +4 40 - - + - - + - - + - - + + - - + + + + - - - + - + +猪种5 - - - + - - + - - + - - + + + + + + + + + - - + - + +猪猪野兔猪沙林鼠种 5k/33 - + - - + - - + - - - + - - - + + + + + + + ± - + + 沙林鼠绵羊附睾种 63/290 + - + + + + + - - + - - + - + + - - - - - - - ± - - 绵羊犬种 RM6/66 - - + + + - + - - + - - - - - + + + + + - - + - + ± 犬谷氨酸__L阿拉伯糖__L葡萄糖D__瓜氨酸DL__丙氨酸L__天门冬素__L精氨酸__L赖氨酸__L__DL鸟氨酸 核糖__D赤藓醇D__半乳糖D__丙氨酸D__ __D木糖驯鹿鼠类4(四)培养特性布鲁氏菌为需氧菌,在严格厌氧条件下不生长。

能在弱酸弱碱性的培养基上生长繁殖,适宜 pH 值为 6.6~7.4生长温度范围为 20~40℃,适宜温度为 37℃牛布鲁氏菌在初次分离时,需在 5%~10% CO2 环境中才能生长,营养要求高, 在用牛羊新鲜胎盘加 l0%兔血清配制的培养基中仍生长缓慢,生长时需硫胺素,烟草酸和生物素,泛酸钙等,实验室常用肝浸液培养基或改良厚氏培养基布鲁氏菌在液体培养基中呈均匀浑浊生长,不形成菌膜,但有些陈旧的培养物,尤其是粗糙型菌的培养物可在管壁上出现环状生长或有絮状沉淀在固体培养基上,菌落无色透明,表面光滑,稍隆起,均质样,菌落中央常带有细小颗粒,最初为透明状,以后逐渐浑浊菌落大小不等,小者直径 0.05~0.1㎜,大者可在3~4㎜由于外界各种因素的影响,其菌落大小,性状特点,致密度和结构等均可发生变化有时出现粘液样菌落,有时出现干燥和硬皮样菌落其培养最大特点是生长繁殖缓慢,尤其是刚从动物机体或体外环境中新分离的初代菌,有的需要 5~10d,甚至需 20~30d 才出现透明的小菌落,鸡胚培养也能生长五)抗原布鲁氏菌细胞膜是一个三层膜的结构,最内层的膜称为细胞质膜、外层膜称为外周胞质膜,最外层膜称为外膜。

外膜与肽聚糖(Peptidog。

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