《微生物实验》课件PPT教案用AMES法测定化学物质的致癌作用 实验二十一用AMES法测定化学物质的致癌作用用AMES法测定化学物质的致癌作用A法用AMES法测定化学物质的致癌作用?实验目的?实验原理?实验器材?试验程序?思考题实验目的?了解营养缺陷型微生物和原氧型微生物的区别 了解营养缺陷型微生物和原氧型微生物的区别 ?了解诱变剂对微生物遗传物质的影响 ?掌握用AMES法进行测定的原理 实验原理?绝大多数致癌物质引起生物癌变的原因是由于化学物质引起生物DNA的突变所致 因此测定化学物质诱变能力可以初步估计其致绝大多数致癌物质引起生物癌变的原因是由于化学物质引起生物DNA的突变所致 因此测定化学物质诱变能力可以初步估计其致 一一癌作用 般用鼠伤寒沙门氏菌（Salmonella typhimurium)的组氨酸营养缺陷型（his)的组氨酸营养缺陷型（his--)菌株，将其接种于含待测定物质的培养基中，看其是否发生回复突变 由于所产生的回复突变细胞的数量和化合物的诱变能力成正比，测定回复突变细胞的数量可以大致估计化学物质的诱变能力，进而判断其致癌作用。
)菌株，将其接种于含待测定物质的培养基中，看其是否发生回复突变 由于所产生的回复突变细胞的数量和化合物的诱变能力成正比，测定回复突变细胞的数量可以大致估计化学物质的诱变能力，进而判断其致癌作用 实验器材?培养基葡萄糖0.1g硫酸镁0.01g磷酸氢二钾0.7g硫酸铵0.15g培养基葡萄糖0.1g硫酸镁0.01g磷酸氢二钾0.7g硫酸铵0.15g0.71.5磷酸二氢钾g g琼脂g g柠檬酸钠0.05g水100mL A:以上培养基分装于试管中 10mL/支,2支/组 B:以上培养基加入组氨酸和生物素至0 05mmol/L,分装于试管中 2mL/支，2支/组 柠檬酸钠0.05g水100mL A:以上培养基分装于试管中 10mL/支,2支/组 B:以上培养基加入组氨酸和生物素至0 05mmol/L,分装于试管中 2mL/支，2支/组 ?1mL无菌移液管；镊子；无菌培养皿；无菌滤纸片浸有亚硝酸钠的滤纸片 1mL无菌移液管；镊子；无菌培养皿；无菌滤纸片浸有亚硝酸钠的滤纸片 ?沙门氏菌（Salmonella typhimurium)（his--,uvrB,rfa)培养24h的液体培养物。
,uvrB,rfa)培养24h的液体培养物 实验程序?将10mL/支和2mL/支分装的培养基于水浴上加热熔化 以无菌操作方法将10mL装的培养基倒入两个培养皿中，自然冷却，做成两个平板 将10mL/支和2mL/支分装的培养基于水浴上加热熔化 以无菌操作方法将10mL装的培养基倒入两个培养皿中，自然冷却，做成两个平板 2支400并?将2mL/支分装的培养基融后于545C C保温,,并于每支试管中加入0.1mL沙门氏菌体培养物 混匀后用无菌操作方法倒入已凝固平板上，缓缓摇动，使其在凝固的培养基上形成一薄层后，静止，待其凝固 0.1mL沙门氏菌体培养物 混匀后用无菌操作方法倒入已凝固平板上，缓缓摇动，使其在凝固的培养基上形成一薄层后，静止，待其凝固 ?在两个培养皿上贴上标签，用无菌镊子取亚硝酸浸过的滤纸片，放入一个培养皿的固体培养基的表面，另取一片普通滤纸片以同样方法放入另一培养皿中做对照 于37在两个培养皿上贴上标签，用无菌镊子取亚硝酸浸过的滤纸片，放入一个培养皿的固体培养基的表面，另取一片普通滤纸片以同样方法放入另一培养皿中做对照。
于3700C培养24h后观察结果 C培养24h后观察结果 思思考考题?简述为什么可用AMES法检测各种化学物质的致癌作用实验二十一结束 内容仅供参考 。