1HPLC 法测定胃康胶囊中厚朴酚、和厚朴 酚的含量【摘要】 目的 建立测定胃康胶囊中厚朴酚、和厚朴酚含量的高效液相色谱法方法 色谱柱为 Hypersil ODS C18 (4.6 mm×100 mm,5 μm)；流动相为甲醇-水(70∶30),检测波长为 294 nm；柱温为 30 ℃；流速为 1.0 mL/min结果 厚朴酚在 0.053 4～1.068 μg 范围内线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率 99.03%,RSD 为 0.68%；和厚朴酚在 0.09～1.80 μg 范围内线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为98.95%,RSD 为 0.69%结论 本方法简便、快速,测定结果准确,重现性好可作为该制剂的质量控制指标 【关键词】 胃康胶囊；厚朴酚；和厚朴酚；高效液相色谱法；含量测定Abstract：Objective To establish a HPLC method for determining the contents of Magnolol and Honokiol in Weikang Capsule. Methods Stationary phase was Hypersil ODS C18 (4.6 mm×100 mm, 5 μm), mobile phase was methanol-water (70∶30), with detection wavelength 294 nm, flow rate 1.0 mL/min and column temperature 30 ℃. Results There was good linearity in range of 0.0534～1.068 μg (r=0.999 8, n=6) for Magnolol. The average recoveries of Magnolol was 99.08%, RSD was 0.57%. There was good linearity in range of 0.09～1.80 μg (r=0.999 8,n=6) for Honokiol. The average recoveries of Honokiol was 98.95%, RSD was 0.69%. Conclusion This method is simple, fast and accurate for the quality control of the preparation. Key words：Weikang Capsule；Magnolol；Honokiol；HPLC；content determination 胃康胶囊为我院内科传统制剂,功效健脾和胃、行气止痛。
主治浅表性、糜烂性、萎缩性胃炎用于恶心、呕吐、泛酸、烧心、食欲不振、胃脘部疼痛、胃部怕冷、喜暖、喜按等症该制剂由党参、厚朴、白芍、砂仁等多味中药组成其中厚朴为君药,具有燥湿消痰、下气除满的功能[1],在方中起重要作用厚朴的主要成分为厚朴酚、和厚朴酚等[2],含量较高,易控制,可选为定量指标本实验采用 HPLC 法测定胃康胶囊中厚朴酚、和厚朴酚的含量21 仪器与试药高效液相色谱仪：Agilent1100 系列四元梯度泵、Agilent1100 手动进样器、Agilent1100 系列二极管阵列检测器、Agilent1100 工作站(Agilent 公司)超声波清洗器(昆山市淀山湖检测仪器厂),万分之一电子分析天平(沈阳龙腾电子称量仪器有限公司)厚朴酚(中国药品生物制品检定所,批号 0729-200309),和厚朴酚(中国药品生物制品检定所,批号 0730-200206)胃康胶囊(本院自制,批号 050613、051110、060306)甲醇(色谱纯,上海陆都化学试剂厂,20050623),其余所用试剂均为分析纯2 厚朴酚与和厚朴酚的含量测定2.1 色谱条件色谱柱：Hypersil ODS C18(4.6 mm×100 mm,5 μm)；流动相：甲醇-水(70∶30)；检测波长：294 nm；柱温：30 ℃；流速：1.0 mL/min；理论塔板数以厚朴酚峰计不低于 3 800。
2.2 对照品溶液的制备精密称取厚朴酚、和厚朴酚对照品适量,加甲醇分别制成每 1 mL 含厚朴酚 0.053 4 mg、和厚朴酚 0.09 mg 的溶液,即得2.3 供试品溶液的制备取本品 20 粒内容物,混合均匀,取 0.2 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇325 mL,摇匀,密塞,称定重量,超声提取 30 min,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,即得2.4 线性范围的考察精密吸取上述对照品溶液 1、2、4、6、8、10、20 μL,按上述色谱条件测定峰面积以对照品峰面积为纵座标,以对照品的量为横坐标进行线性回归,结果表明,厚朴酚在 0.053 4～1.068 μg 范围内呈线性关系,其回归方程为 Y=223 9.121 3X＋13.560 6,r=0.999 8；和厚朴酚在 0.09～1.80 μg 范围内呈线性关系,其回归方程为Y=729.705 5X＋6.507 8,r=0.999 8色谱图见图 12.5 阴性对照试验取去厚朴的阴性制剂,按 2.3 项下方法制得阴性对照液,以上述色谱条件测定结果阴性对照液与厚朴酚相同保留时间处,无色谱峰出现HPLC 图谱见图 1。
2.6 精密度试验取同一浓度的厚朴酚、和厚朴酚对照品溶液,在上述色谱条件下测定,重复进样6 次,结果厚朴酚 RSD 为 1.78%(n=6),和厚朴酚 RSD 为 1.04%(n=6)结果表明,进样精密度良好 2.7 稳定性试验取供试品溶液,分别于配制 0、1、2、4、8、24 h 依法测定,结果厚朴酚 RSD 为0.48%(n=6),和厚朴酚 RSD 为 0.40% (n=6)2.8 重复性试验4取同批号的样品 6 份,分别按 2.3 项下方法制得供试液,测定厚朴酚平均含量为0.081 mg/粒,RSD 为 0.79%(n=6)；和厚朴酚平均含量为 0.37 mg/粒,RSD 为 1.25%表明样品测定重现性良好2.9 加样回收试验取批号为 060306 供试品 0.2 g,精密称定,各精密加入一定浓度的对照品溶液(精密称取厚朴酚 4.86 mg、和厚朴酚 18.32 mg,置 10 mL 量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,备用)1.0 mL,分别按 2.3 项下方法制得供试液,以上述色谱条件测定厚朴酚、和厚朴酚的含量厚朴酚平均回收率为 99.03%,RSD 为 0.68%；和厚朴酚的平均回收率为 98.95%,RSD 为 0.69%。
结果见表 1、表 2表 1 厚朴酚的回收率试验结果(略)表 2 和厚朴酚的回收率试验结果(略)2.10 样品的测定取各供试品各 6 份,每份约 0.2 g,分别精密称定,按 2.3 项下方法制得供试品溶液,以上述色谱条件测定各供试品的含量,测定结果取平均值见表 3表 3 供试品中厚朴酚、和厚朴酚的含量(略)3 讨论厚朴的主要成分为厚朴酚、和厚朴酚,其含量测定方法有一阶导数紫外分光光度法[2]、薄层层析-紫外分光光度法[2]、薄层扫描法[2]、HPLC 法[1]等本实验HPLC 法,实验中所用方法提取简便,分离度好,结果准确对 3 批胃康胶囊的测定结果表明：其含量较稳定,可作为该制剂的质量控制方法参考文献】5[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典一部[S].北京：化学工业出版社,2005.176.[2] 郑虎占,董泽宏,佘 靖.中药现代研究与应用[M].北京：学苑出版社, 1998.3280.。