文件名称洁净区浮游菌测定操作规程页 次共4页 第1页编制依据药品生产质量管理规范（1998年修订）文件编码ZL-SOP-0075-0 起 草 人审核 人批 准 人 起草日期审核日期批准日期 颁布部门行政部执行日期 分发部门质量控制部 质量保证部目 的：建立洁净（区）室浮游菌检测标准操作规程 范 围：适用于洁净（区）室浮游菌监测责 任：QC人员负责实施，QA人员负责监督内 容：1取样前准备工作：1.1 依据检测区域的取样点数，按照《培养基配制、灭菌标准操作程序》制备适量的营养琼脂培养基1.2 在超净工作台内，以无菌操作法将配制好的营养琼脂培养基以每皿约15ml的装量分装，待培养基凝固后移出洁净区1.3 将制备的营养琼脂平皿倒置于隔水式恒温水浴培养箱内于30～35℃培养48小时取出逐个检查，确认无菌落数后即可使用1.4采样：将上述制备好的营养琼脂平皿交与QA人员取样2.仪器、设备和培养基：2.1所用的仪器、设备和培养基：2 浮游菌采样器2 培养皿（φ90mm×15mm）2 培养基（营养琼脂培养基）2 恒温培养箱2.2 仪器、设备、培养基的要求：2 浮游菌采样器：2.1 浮游菌采样器必须要有流量计和定时器。
2.2 应严格按仪器说明书的要求进行操作2.3 采样器必须按仪器的检定周期，定期对仪器作检定，以保证测试数据的可靠性，检验项目有：定时器，转盘转速，流量计文件名称洁净区浮游菌测定操作规程页 次共4页 第2页文件编码 ZL-SOP-0075-0.4 每次测试前应先接通电源，启动真空抽气泵，然后调节流量计和定时器2.5 空气采样量根据需要选定，已知采样器的流量（L/min）,设定采样时间（min）两者相乘即得采样量（L）2.6 采样口必须用便于消毒及化学性能稳定的材料制造，采样管严禁渗漏，内壁应光滑，采样管的长度应根据测定点的高度定，尽量减少弯曲3. 测试方法：3.1 测试用仪器、培养皿表面必须严格消毒3 采样器进入被测房间前先用消毒剂灭菌3 用消毒剂擦净培养皿的外表面3 采样前，先用消毒剂消毒采样器的顶盘、转盘以及罩子的内外面，采样结束再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘3 采样口及采样管使用前必须高温灭菌，如用消毒剂对采样管的外壁、内壁进行消毒，应将管中的残留液倒掉并晾干3 采样者应穿戴与被测洁净区域相应的工作服，在转盘上放入或调换培养皿前，双手用消毒剂消毒。
3.2 采样程序：3 仪器经消毒后先不放入培养皿，开动真空泵抽气，使仪器的残余消毒剂蒸发，时间不少于5min，并调好流量、转盘转速3 关闭真空泵，放入培养皿，盖上盖子后调节采样品缝隙高度3 置采样器于采样点后，开启采样器、转动定时器，根据采样量设定采样时间4 测试规则：4.1 测试状态：4 浮游菌测试前微生物限度检查室已经消毒过4 测试状态为静态测试，并在报告中注明测试状态4.2 测试人员：文件名称洁净区浮游菌测定操作规程页 次共4页 第3页文件编码 ZL-SOP-0075-04 测试人员必须穿戴符和被测环境级别的工作服4 静态测试时，室内人员不得多于2人4.3 测试时间：4 对单向流，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始4 对非单向流，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始4.4 最少采样点数目及其布置，最小采样量，见下表:面积（m2）洁净度级别ABC验证监测验证监测验证监测＜102～31212--≥10～＜2042212--≥20～＜4083212--≥40～＜100164412--≥100～＜20040--10--3--≥200～40080--20--6--400160--40--13--4 工作区测点位置离地～左右，送风口测点位置离开送风面30cm左右；可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点。
4 每个采样点一般采样一次4 对于单向流或送风口，采样器采样管口朝向应正对气流方向；对于非单向流，采样管口向上4 布置采样点时，至少应离开尘粒较集中的回风口1m以上4 采样时，测试人员应站在采样口的下风侧5 培养：取样结束后将平皿复倒置隔水式恒温水浴培养箱内于30～35℃培养48小时并以未采样的营养琼脂平皿作对照皿6菌落计数：6.1用肉眼直接计数，然后用5-10倍放大镜检查，是否遗漏文件名称洁净区浮游菌测定操作规程页 次共4页 第4页文件编码 ZL-SOP-0075-06.2 若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，可分辨时，仍以2个或2个以上的菌落计数计数：培养结束，将上述培养后的平皿取出，逐个点计菌落数，必要时用放大镜检查，并记录 7 结果计算：7.1 平均菌落数的计算见下式：平均菌落数 m= 式中：m为该房间（或区域）的平均菌落数；m1、m2‥‥‥mn为该房间（或区域）各取样点的菌落数； N为培养皿总数8 结论：8.1 洁净室（区）内的平均菌落数必须低于所选定的评定标准8.2 若某洁净室（区）的平均菌落数超过评定标准，则必须对此区域先行消毒，然后重新测试两次，测试结果必须合格。
