会计学1实验实验(shíyàn)四糖发酵实验四糖发酵实验(shíyàn)第一页，共15页 一、目的(mùdì)要求1.了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用2.掌握通过(tōngguò)糖发酵鉴别不同微生物的方法第1页/共14页第二页，共15页 二、基本原理 糖发酵试验是最常用的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源，但是它们在分解糖的能力(nénglì)上有很大的差异，有些细菌能分解某种糖并产酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和气体（如氢、甲烷、二氧化碳等）；有些细菌只产酸不产气例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气；伤寒杆菌能分解葡萄糖产酸不产气，不能分解乳糖；普通变形杆菌分解葡萄糖产酸产气，不能分解乳糖第2页/共14页第三页，共15页 二、基本原理二、基本原理n n酸的产生可利用指示剂来断定在配制培养基时预先加入溴甲酚紫（黄色）（紫色）]，当发酵产酸时，可使培养基由紫色变为黄色n n气体的产生可由发酵管中倒置(dàozhì)的德汉氏小管中有无气泡来证明第3页/共14页第四页，共15页 三、实验(shíyàn)材料1.大肠杆菌，普通变形杆菌（ Proteus vulgaris）斜面各1支；2.盛有葡萄糖发酵培养基的试管和乳糖发酵培养基的试管各3支（内装有倒置(dàozhì)的德汉氏小管），试管架，接种环等。
第4页/共14页第五页，共15页 图1 糖类(tánɡ lèi)发酵试验 第5页/共14页第六页，共15页 四、操作步骤四、操作步骤1 1、编号、编号 用记号笔在各试管上分别标明发酵培养基名称和所接种的菌名用记号笔在各试管上分别标明发酵培养基名称和所接种的菌名2 2、接种、接种 取盛有葡萄糖发酵培养基的试管取盛有葡萄糖发酵培养基的试管3 3支，按编号支，按编号1 1支接种大肠杆菌支接种大肠杆菌(dà chánɡ ɡǎn (dà chánɡ ɡǎn jūn)jūn)，另，另1 1支接种普通变形杆菌，第支接种普通变形杆菌，第3 3支不接种，作为对照另取乳糖发酵培支不接种，作为对照另取乳糖发酵培养基试管养基试管3 3支，同样支，同样1 1支接种大肠杆菌支接种大肠杆菌(dà chánɡ ɡǎn jūn)(dà chánɡ ɡǎn jūn)，，1 1支接种普通变形支接种普通变形杆菌，第杆菌，第3 3支不接种，作为对照支不接种，作为对照3 3．将上述已接种的葡萄糖和乳糖发酵试管和对照管置．将上述已接种的葡萄糖和乳糖发酵试管和对照管置3737℃℃温室中培养温室中培养2424小时。
小时第6页/共14页第七页，共15页 n n注意事项：n n接种后应轻轻摇动试管，使其均匀(jūnyún)，防止倒置的小管进入气泡否则会造成假象，得出错误答案第7页/共14页第八页，共15页 第8页/共14页第九页，共15页 第9页/共14页第十页，共15页 第10页/共14页第十一页，共15页 观察观察(guānchá)(guānchá)结果结果: :n n观察结果时，看各管颜色(yánsè)变化及杜氏小管有无气泡n n产酸产气用“⊕”表示；n n只产酸不产气用“+”表示；n n不产酸也不产气用“—”表示第11页/共14页第十二页，共15页 第12页/共14页第十三页，共15页 假如某种微生物可以有氧代谢(dàixiè)葡萄糖，发酵试验应该出现什么结果？思考题：思考题：第13页/共14页第十四页，共15页 内容(nèiróng)总结会计学实验四糖发酵实验第1页/共14页糖发酵试验是最常用的生化反应，在肠道细菌的鉴定上尤为重要气体的产生可由发酵管中倒置的德汉氏小管中有无气泡来证明第3页/共14页1.大肠杆菌，普通变形杆菌（ Proteus vulgaris）斜面各1支图1 糖类发酵试验。
3．将上述已接种的葡萄糖和乳糖发酵试管和对照管(zhàoguǎn)置37℃温室中培养24小时思考题：第13页/共14页第十五页，共15页。