马氏珠母贝选育过程中关键技术研究分类号学校代码学号花“二二密级？？广秉嗨洋大学硕士学位论文马氏珠母贝选育过程中关键技术的研究李雷斌指导教帅姓名刘志刚教授专业名称水产养殖研究方向水产无脊椎动物增养殖及珍珠培育年月日论文提交口期马氏珠母贝选育过程中关键技术的研究摘要马氏珠母贝是我国主要的海水珍珠养殖贝种，自年我国成功地开展马氏珠母贝的人工育苗以来，经过多年数十代的人工繁殖以及没有控制的远缘杂 交,已使我国的马氏珠母贝种群出现不同程度的近交衰退和种质混杂为此，本 研究考查了雷州市流沙港海区现有的马氏珠母贝养殖群体的种质资源情况，运用 数量遗传理论对马氏珠母贝的选择育种和近交生物学效应进行了初步的研究，并 针对困扰马氏珠母贝苗种生产过程中饵料供应不稳定的问题开发了自溶酵母这 一新的辅助饵料来源主要结果和结论如下：•为了寻找优秀的养殖群体作为马氏珠母贝选择育种的基础种群，本研究通过调查发现在雷州市流沙港海区养殖的马氏珠母贝养殖群体中具有复杂的 遗传背景，为此选取了个具有代表性的群体进行了分析结果表明:每个经济性状系数在个群体中的均值和范I#分别是，壳高系数・・・、•.、绞合壳宽系数・・、・、壳厚系数.线长系数・・~・、左壳珍珠层高系数・•'•、壳重系数…\、体重系数…、・、软体重系数・・〜・和闭壳肌重系数.• ~・，方差分析表明不同群体间的经济性状系数差异显著丿I;由多重比较可知，按大小排序，壳高系数为撑撑撑撑群撑撑;壳宽系数为舞鼻撑撑壳厚系数为撑撑撑撑撑撑，绞合线长系数为撑撑撑群撑舟，左壳珍珠层高系数为撑撑撑群$挣撑，壳重系数为 撑N撑撑挣HH,体重系数为撑三撑撑,软体重系数为撑撑，闭壳肌重系数为撑撑HHHH群撑撑，从上述各系数排序可见,HH群体综合性状最好，其 最重要的育珠性状如壳宽、壳厚、左壳珍珠层高等系数均列第一位,壳重、 软体重系数列第二位，符合珍珠培育对珍珠贝育珠性状的要求，可以作为插核育 珠母贝选育的首选基础群体;对个群体各经济性状的相关分析表明，不同群体各 个性状Z间相关系数的大小和排序都有较大的差异，提醒对不同养殖群体进行H标性状的间接选育应根据该群体的具体情况而定。
•研究了不同亲本规格对后代的影响，以期为育种和苗种生产中的亲贝选择 提供科学的理论指导试验从来口同一养殖群体的个随机个体马氏珠母贝中 选取规格最大壳长.±.、中等壳长.±.、最小壳长・±.的性成熟个体各个作为亲贝早：：，按规格分成大、中、小组，分别进行各组内亲本个体群交在相同环境及试验条件下通过比 较各群交组的受精率、孵化率、稚贝育成率、海上暂养及标粗期存活率、养成 期存活率、芫长壳高体重同增长率和选择反应等指标的差界，分析亲木选择对了 代生产性能的影响结果表明，从上述各指标看,大规格亲贝优于中规格亲贝・；中规格亲贝优于小规格亲贝・大规格亲贝壳长、壳高、壳宽和壳重的选择反应分别为 和.，小规格亲贝分别为一•、一・、一•和一.，小规格亲贝分别为一・、・、•和・大规格亲贝壳高、壳长、壳宽和壳重的实现遗传力分别为 和.研究证明，马氏珠母贝亲代选择对子一代生产性能具有显著影响.，大规格亲贝群交后代表现出明显生长优势,截断选择策略有效•研究了马氏珠母贝早期选择的效果，在担轮幼虫早期和眼点幼虫期分别对幼虫进行了选育，以期通过早期选择来降低良种选育中的工作量和加快选育 进程实验结果表明，先期上浮的扌J1轮幼虫在第的大小和成活率以及稚贝出池 吋的大小和育成率都显著地•高于后期上浮的担轮幼虫;先期附着的眼点 幼虫在稚贝出池吋的大小和育成率也都显著地•高于后期附着的眼点幼 虫。
研究表明对幼虫在浮游期的选择具有显著的效果.O•研究了近交对马氏珠母贝的影响，以期为苗种生产提供科学的理论指导对马氏珠母贝的全同胞交配・、半同胞交配.和群体交配三种近交水平对子代在幼虫浮游期和稚贝培育期的影响进行了考查实验结 果表明，随着近交系数的降低，形幼虫的孵化率升高,畸形率下降;浮游期幼虫的 生长速度和存活率以及稚贝出池吋的大小和育成率也随近交系数的降低而明显地•升高近交会导致马氏珠母贝幼虫及稚贝存活和生长性能的下降，产生明显的近交衰退现彖•研究了自溶面包酵母作为辅助饵料在马氏珠母贝育苗中的效果以期解决该贝育苗过程中饵料供应不稳定、饵料效果差、 易培饵料品种小球藻利用率低等问题,为马氏珠母贝健康苗种规模繁育提供技术 支撑研究结果表明：在温度・：・°c、含盐％、・••的自溶条件下，经过自溶的酵母投喂形幼虫，可取得显著•高于其它自溶吋问组的饵料效果，单独投喂非自溶酵母时幼虫不能存活；自溶酵母单投时在形毋「“，幼虫成活幼虫期可以完全替代湛江等鞭金藻率与金藻组没有显著差并.,生长速度比金藻组提高%・,但在壳顶幼虫期和稚贝期不能使幼虫和稚贝正常发育和存活;壳顶幼虫期及眼点幼虫至粧贝期投喂“自溶酵母小球藻・”或“自溶酵母扁藻”，其生长速度及存活率或稚贝育成率均显著氏•高于单投扁藻或小球藻,单投小球藻的饵料效果最差：口溶酵母与小球藻混投,相对于与扁藻混投能更大幅度地提高幼虫及稚贝的存活率和生 长速度,大大地提高了小球藻的饵料效果；自溶酵母与小球藻不同混投水平对眼点幼虫至稚贝培育效果有显著•的影响，可显著•提高稚贝的耐干露能力、生长速度和育成率。
研究结果优化了马氏珠母贝健康苗种规模繁育中的饵料供应工艺及提高了易培饵料品种小球藻的利用价值，也为其它殆种贝类 人工育苗提供了参考关键词:马氏珠母贝，养殖群体，经济性状，选育，近交，自溶面包酵母，饵料• •，,撑撑撑撑撑撑•伍为垒工忿由垒撑工忿卉【撑挣•撑甜捍撑撑撑,撑撑撑捍撑撑撑，撑撑撑撑抡撑撑,抡抡撑群撑.撑撑撑 抡抡抡捍撑甜，撑捍撑撑撑群铺H椁H・撑:•士•，•士••士•，早：：,•91 1 9• ，• ，•Q —•9• •，9•, •俨.广东海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果作詁对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均己在文中以明确方式标明本人完全意识到本声明的 法律后果由本人承担护年易刀/多日作者签名/孝需试学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和屯子版，允许论文 被查阅和借阅本人授权广东海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内 容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存 和汇编本学位论文。
本学位论文属于、保密口，在年解密后适用本授权书不保密团请在以上相应方框内打“”甲年莎月彭日作者签名彩瞅年占艮，导师签名：刎老刮广东海洋大学硕士学位论文第一章前言马氏珠母贝乂名合浦珠母贝，属于软体动物,瓣鲍纲，翼形亚纲,珍珠贝珍珠贝科，,是我国海水珍珠养殖珍珠贝属，马氏珠母贝的主要贝类在我国主要分布在两广、海南、台湾沿海，尤其以广西的合浦 白龙尾至西村长约公里的海区及广东的大亚湾、大鹏湾等地为多：以及太平洋西濒海的几个国家，自□本千叶县以南至菲律宾、越南、缅甸、印度、斯罩兰 卡、澳大利亚等均有分布III自年我国成功地开展马氏珠母贝的人工育苗以来，人工育苗的成功使海水珍珠养殖真止得到了迅速发展，我国己成为世界海水珍珠养殖的大国，马 氏珠母贝也成为我国海水珍珠的主要养殖贝利I近年来我国的海水珍珠在产量提 高的同时，珍珠的质量却在明显的下降，这使得我国的海水珍珠在国际珍珠市场 上的竞争力逐渐降低同吋在生产养殖上表现出马氏珠母贝种质退化，育珠贝越 来越小,病害严重，育珠贝插核后的死亡率和吐核率增加，优质珠率下降,而薄层 珠、污珠、畸形珠、小型珠率耐'】出现这些现象的原因除养殖技术落后、管理 不科学、养殖密度过大和养殖环境污染外,这还与长期的人工近亲繁殖有关。
至今为止还没有一个科学规范的马氏珠母贝良种场,也没有相关的组织系统地引 导苗种生产现有马氏珠母贝苗种场在亲贝选用存在着很大的随意性和盲Fl性, 少数使用不同地理种群的马氏珠母贝进行杂交育苗，然后进行群体自繁；然而大 部分苗场的亲贝的选用直接从海区的养殖群体中挑选生殖腺饱满的贝用来作为 亲贝，一是不问该养殖群体的父母本的来源，二是亲贝的挑选没有统一的标准，甚 至是仅仅挑选生殖腺饱满者就行,血没有考虑贝体的形状和生产性能结果是由 于盲n的育苗导致不同程度的近交衰退，不系统科学的杂交育苗又导致了流沙本 地种群的种质混杂，从而出现了前面的状况同吋，近亲繁殖的生产用贝在各海区 的随意扩散可能造成天然种群遗传结构被破坏，也将影响到种质质量和遗传育 种针对我国海水珍珠养殖的现状，除了要对整个行业进行规范外，我们更需要从马氏珠母贝种质上来解决这些问题可釆用如下的遗传育种方法和手段 来解决种质问题：利用传统的遗传育种技术对种质进行改良通过对不同种群的马氏珠母贝进行自交、杂交、建立家系等方法，选育出具有优良生产性状如贝壳形状 优马氏珠母贝选育过程中关键技术的研究势、贝体大小、珠层色泽等和优良生产品质如抗高低温、抗低盐度、抗病害 等的品系，建立遗传稳定、品质优良的马氏珠母贝新品系，为培育优良的珍珠提 供优良的育珠贝脚。
利用生物技术主要是基因工程和细胞工程技术改良种质，培育新品种我国一直以来主要是对马氏珠母贝进行了三倍体、四倍体等多倍体的育种研 究基因工程技术是另一条种质改良途经，主要手段是转基因技术，如通过生长 激素的整合，培育岀生长速度快、个体超大的母贝，从而培育较大型的珍珠;通过 抗病基因或抗性基因的筛选及转移，培育出具有较强抗病性和抗逆性的新品【】进行育珠生产关键技术的研究其具体方法如下：①、进行育珠贝的术前处理技术研究由于合浦珠母贝含有大量的生殖细胞，而这些生殖细胞是影响珍珠质量的主要原因，因此在珍珠贝插核Z前,必 使用一些方法使其将体内的生殖细胞排出体外②、进行小片处理技术研究，如小片贝的选择，外套膜小片的切取位置,制片过程中的涂抹方法以及小片制成后所用浸泡的药物的研究等从血诚少 育珠期的死亡率、脱核率、污珠率，提高成珠率乜一对养殖生态环境、养殖容量和病害的防治进行研究通过对养殖生态环境及养殖容量研究的研究，我们可以在幼体的培育、稚贝的养成及育珠贝的 养殖过程中采取科学的养殖方法对该海区做出明确的规划明确养殖的容量, 避免盲n的，过量的养殖给海区带来过大的床力以及对海区造成污染同时也可 以为病害的研究奠定基础。
对病害的研究可以最人限度的降低自然带來的损失建立专门的良种场,长期进行种质选育和改良由良种场统一•向养殖户提供优质的种苗，从源头上保证培育出优良的珍珠瞄对我国海水珍珠养殖来说,开展马氏珠母贝的遗传改良和培育新品种是提高我国海水珍珠质量和单位产量的最有效的途径之一马氏珠母贝遗传多样性的研究生物多样性对于人类以及地球上。