技能训练1紫外分光光度法测定水杨酸的含量一、实验目的1、掌握紫外可见分光光度计的使用及维护方法2、学会分光光度法测定水杨酸含量的原理和方法二、实验原理水杨酸水溶液无色，在紫外光区有吸收，吸收峰位于 230nm因此，可采用 紫外分光光度法测定其含量三、仪器与试剂仪器：紫外-可见分光光度计、容量瓶（50mL）8个、容量瓶（100mL）3个、吸量管 （10mL） 1支、移液管（10mL） 2支、移液管（25mL） 1支、石英吸收池试齐水杨酸标准溶液（1mg/mL）、水杨酸试样＜50g/mL四、实验步骤1、标准溶液的配制：准确吸取10mL1mg/mLc杨酸标准溶液，于100mL容量 瓶中，配制成100仙g/mL水杨酸标准溶液；再分别取0、2.00、4.00、6.00、8.00、 10.00mL 100 [1 g/mL水杨酸标准溶液于6个50mL容量瓶中，稀释成一系列不同 浓度的标准溶液（0〜20Ng/mL）2、吸收曲线的绘制：用8 n g/mL或12n g/mL标准溶液，以蒸储水为参比， 于波长210〜350nm范围内测定吸光度，作吸收曲线，从曲线上查得最大吸收波 长（230nm附近）注：波长间隔在210〜350nm范围内每隔5nm测定一个数值，在最大吸收波 长土 5nm范围内每隔1nm测定一个数值。
3、标准曲线的绘制：以蒸储水为参比，于最大吸收波长处分别测定标准溶液 的吸光度，然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制出标准曲线4、水杨酸试样的测定：取适量的水杨酸试样溶液用蒸储水进行稀释（稀释倍 数由参赛选手自行确定），以蒸储水为参比，于最大吸收波长处测定试样的吸光 度，从标准曲线查出试样的浓度，平行测定两次五、实验数据1、吸收曲线的绘制与测定波长的选择入（nmi）A结论：入max=nm2、标准曲线的绘制与样品溶液的测定溶液代号吸取标液体积，mLP, g/mLA012345试液1试液2利用上述数据绘制标准曲线，从标准曲线上查出试液浓度，并计算出原始试 样的浓度技能训练2邻二氮菲分光光度法测定水样中铁含量、实验目的1、进一步学会使用分光光度计2、了解邻二氮菲法测定铁的显色反应原理、方法3、了解吸收曲线的绘制方法及最大吸收波长的确定方法4、能够绘制标准曲线，并利用标准曲线进行定量分析二、实验原理根据朗伯—比耳定律：A=£ bc,当入射光波长入及光程b一定时，在一定浓 度范围内，有色物质的吸光度 A与该物质的浓度c成正比只要绘出以吸光度 A 为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线 查得对应的浓度值，即未知样的含量。
用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高 灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点在pH=2〜9的溶液中，Fe2+与邻二氮菲(phen)生成稳定的桔红色配合物Fe(phen) 32+:此配合物的lgK稳=21.3,摩尔吸光系数 知0= 1.1 104 L mol-1 cm-1,而Fe3+能与邻二氮菲生成3 ： 1配合物，呈淡蓝色，lgK稳=14.1所以在加入显色剂之前，应用盐酸羟胺(NH2OH- HCl)将Fe3+还原为Fe2+,其反应式如下：2Fe 3++2N^OH・ HCH 2Fe2++N2+H?O+4ldr+2Cl-测定时控制溶液的酸度为pH-5较为适宜用邻二氮菲可测定试样中铁的总 量三、仪器与试剂1、仪器：紫外可见分光光度计，容量瓶(50mL)7个，吸量管(10mL)1支，烧 杯2、试剂：(1) 10 闻/mLFe2+标准液：准确称取 0.7020g [(NH4) 2Fe(SO4)2 6H2O]置 于烧杯中，加20mL (1+1)盐酸溶解后，移入1000mL容量瓶中用水稀释至刻 度，摇匀从此溶液中吸取50mL于500mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
2) 10%盐酸羟胺溶液(用时配制)：称取100g分析纯盐酸羟胺置于烧杯 中加少量水溶解后稀释至1L3) 0.15%邻二氮菲溶液(用时配制)：称取1.5g分析纯邻二氮菲置于烧 杯中，用少许酒精溶解后再用水稀释至 1L4) HAc-NaAc缓冲溶液(pH=5.5): 375克的无水乙酸钠溶于适量水中， 加入50mL冰乙酸，用水稀释至2500mL混匀5)含铁水样四、实验步骤1、标准系列及试液的配制准确移取 10 仙 g/mL Fe2+标准液 0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL 分别于6个50mL容量瓶中，在另一个50mL容量瓶中准确加入待测试液 3.00mL, 在上述标准溶液及试液中依次分别加入 1mLI0%盐酸羟胺溶液,2m!0.15%邻二氮 菲溶液，5mLHAc-NaA缓冲溶液，然后用蒸储水稀至刻度，摇匀后备用2、吸收曲线的绘制以第一份溶液为空白，以第四份溶液为测定液，用1cm比色皿在分光光度计 上，从450〜550nm每隔10nm测量上述测定溶液在不同波长下的吸光度，在峰 值附近每隔5nm测量一次然后以吸光度为纵坐标，以波长为横坐标，绘制 A- 入吸收曲线，找出最大吸收波长作为测定波长。
3、在步骤2所确定的最大吸收波长处，以1cm比色皿依次测定上述标准溶 液及试液的吸光度，然后以吸光度为纵坐标，以浓度为横坐标，绘制标准曲线， 并从曲线上查出待测试液的浓度，计算出原始试液的质量浓度( g/mL) 0五、实验数据1、A■入数据记录波长入/nmA利用上述数据绘制吸收曲线2、A-c数据记录容量瓶编号1#2#3#4#5#6#试液浓度/（_g/mLA利用上述数据绘制标准曲线，从标准曲线上查出试液浓度，并计算出原始试液中 铁的质量浓度（©mL）。