n 一、基本概念：n无特定病原体动物(specific pathogen free animal,SPF)是指机体内无特定的微生物和 寄生虫存在的动物，而非特定的微生物和寄 生虫是允许存在的n1978年，英、美、日、法等国协商制定了应 排除的病原微生物小鼠有22种、大鼠18种、 豚鼠18种、地鼠15种、兔16种第三节 无特定病原体动物（SPF动物）n我国（1992年）医学实验动物标准中，规 定了SPF动物应排除的病原微生物和病毒的 种类如下：n细菌：小鼠有19种、大鼠18种、豚鼠16种 、地鼠16种、兔16种、猫2种、犬3种、猴 3种n病毒：小鼠有17种、大鼠13种、豚鼠7种 、地鼠5种、兔4种、猫6种、犬6种、猴6 种n详见表3-1小 鼠 大 鼠豚 鼠地 鼠兔猫狗猴细菌 病毒19 1718 1316 716 516 42 63 63 6寄生虫无体内外所有寄生虫表3-2 卫生部对实验动物生物监测标准n二、饲养与监测nSPF动物来源于无菌动物或悉生动物， 必须饲养在屏障系统中，所以屏障系统 也称为SPF设施n通常SPF动物室都经严格净化，严格控 制病原微生物的侵入n在对SPF动物饲养过 程中，时间长了，难 免不发生污染。
n所以不仅对SPF动物 需要定期监测，而且 对SPF动物一般都作 周期性重建(F5～6 代淘汰制度)n三、应 用n国际上公认SPF动物适用于所有科学研究， 是目前国际标准级别的实验动物n生产各种疫苗所用的动物都应为SPF级动物 nSPF动物应用价值在于它没有人畜共患病病 原体、没有主要传染病病原体、没有对实验 结果可能产生干扰的微生物 nSPF动物不存在隐性感染（清洁级就有）n隐性感染不会影响动物健康的外表，容易被 忽视，但却能给实验带来严重的干扰类别类别无菌动动物SPF动动物普通动动物传传染病无无有或可能有寄生虫无无有或可能有试验结试验结 果明确明确有疑问问应应用动动物数少少多或大量统计统计 价值值很好可能好不准确长长期实验实验可能好可能好有困难难死亡率很低低高长长期实验实验 存活 率约约100%约约90%约约40%实验标实验标 准设计设计可能可能不可能实验结实验结 果的讨讨 论论价值值很高高有疑问问表3-3几种实验动物应用价值的比较n日本国立卫生试验所生物安全性试验研究中 心按照日本政府的规定，对所有医药品、化 妆品、食品添加物、农药、化学物质、家庭 用品、动物用医药品、饲料添加物等，都必 须进行生物安全性试验，合格者方准许正式 生产，投放市场。
n其试验内容包括：一般毒性试验、特殊毒性 试验、在体内衍变过程、变异原性试验及一 般生物学试验，共5大项(见表3-4)，这些试 验所用的大、小鼠必须是SPF级(表3-5)安全性试试 验验的种类类医 药药 品化 妆妆 品食 品 添 加 物农农 药药化 学 物 质质家庭 用品动动 物 用 医 药药饲饲 料 添 加 物一 般 毒 性 试试 验验急性毒性试验试验 亚亚急性毒 慢性毒性√ √ √√ √ √√ √ √√ √ √√ √ √√ √ √√ √ √√ √ √特 殊 毒 性 试试 验验局部刺激试验试验 变态变态 反应试验应试验 致畸形试验试验 繁殖试验试验 依赖试验赖试验 致癌性试验试验╳ ╳ √ √ √ ╳√ √ ╳╳╳ ╳ √√√ ╳ √ √√ √ √ √√╳ √ ╳√╳ ╳ √ ╳√√ √√表3-4日本关于生物安全性试验动物的规定安 全 性 试试 验验 的 种 类类动动 物 要 求Ⅰ.急性毒性试验试验4周龄龄的SPF小鼠、大鼠，经经1周适应应后使用；2.5~3.0kg 的兔，经经两周适应应后使用；6~7月龄龄的毕毕克狗，经经1 周适应应使用 Ⅱ.大鼠的亚亚急性及慢性毒 性试验试验 兔的亚亚急性毒性试验试验 毕毕克狗的亚亚急性及慢性毒 性试验试验4周龄龄的SPF大鼠，经经1周适应应后使用； 约约2.5kg的兔； 6~7月龄龄的毕毕克狗，经经4周适应应后使用。
Ⅲ. 生殖试验试验 （妊娠前和 妊娠初期服药药反应应）5周龄龄雄性和12周龄龄雌性SPF小鼠、大鼠，经经1周检检疫适 应应后使用Ⅳ. 致癌性试验试验4周龄龄的SPF小鼠、大鼠，经经1周检检疫适应应后使用Ⅴ. 生殖试验试验 （器官形 成期的服药试验药试验 ） 生殖试验试验 （产产前1周和 哺乳期服药试验药试验 ）12周龄龄的SPF小鼠、大鼠，经经1周检检疫适应应后使用， 2.5 kg左右的雌兔，经经4周检检疫适应应后使其交配妊娠用于 实验实验 12周龄龄的SPF小鼠、大鼠，经经1周检检疫适应应后，使其交配 妊娠后用于实验实验表3-5 日本对供安全性试验动物的要求n一、清洁级动物（CL）n1.基本概念：是指动物体内、外不携带 有人畜共患病病原体，或动物传染病病 原体，并对科学研究无干扰的动物n清洁级动物是根据我国国情而设定的等 级动物，目前在我国已成为适用于科研 的标准的实验动物，其种群来源于SPF 动物或剖腹产动物第四节 清洁级动物与普通级动物n2、清洁级动物特点及应用n清洁级动物比普通级动物要求排除的微生 物和寄生虫多，但比SPF动物少即就微 生物净化程度CL比CV高，而比SPF低n清洁级动物除肉眼观察无病外，尸体解剖 时，主要脏器、组织无论是肉眼观还是病 理组织切片均应无病变。
n清洁动物饲养于温湿度恒定的、十万级 空气净化的半屏障系统中，其所用的饲 料、垫料、笼器具等都经过消毒灭菌处 理，饮用水除用高压灭菌外，也可采用 pH2.5～2.8的酸化水，工作人员需换 灭菌工作服、鞋、帽、口罩等进入动物 室进行操作n目前一般都饲养在IVC系统中n清洁级动物近年来在我国得到较广泛的 应用它较普通动物健康，又较SPF动 物易达到质量标准，在动物实验中可免 受动物疾病的干扰，其敏感性与重复性 亦较好n但国际上普遍认为清洁动物仅适合于短 期或中期部分科研实验• 清洁级动物微生物控制标准基本上与SPF 动物相同 • 不同之处是在抗体检查中，清洁级动物 经常可以查出鼠脑膜炎病毒和鼠肝炎病 毒抗体的存在这一点会对个别实验产 生不良的影响如隐性感染了鼠肝炎病 毒的小鼠，就会影响小鼠的免疫应答和 肿瘤研究 • 清洁级动物是我国常用的实验动物，可 应用于生物医学研究的各个领域n二、普通级动物（conventional animal CV ）n1.概念：不携带人畜共患病病原体和动物急 性传染病病原体的实验动物n2.特点：n①微生物控制要求最低n②生理学特性：健康的外貌，正常的饮食， 眼角、鼻腔无分泌物附着，尸检无眼观病灶n普通级小鼠应排除的病原微生物，常见 的有：n鼠疫杆菌、流行性出血热病毒、脑膜炎 病毒、沙门氏菌、皮肤真菌、弓形体及 体外寄生虫等对人体和动物危害较大的 病原体。
n为了预防人和动物共患病及动物群中急 性传染病的发生，普通级动物在饲养管 理中必须采取一定的防护措施n普通级动物的饲养管理：n饲料、垫料不需要高压消毒；n饮用水要符合城市饮水卫生标准；n青饲料应经洗净后再喂；n外来动物必须严格隔离检疫；n饲养室内要有防野鼠、防昆虫的设备；n要坚持经常性的环境卫生及笼器具的清 洗消毒，严格处理淘汰及死亡动物；n限制无关人员进人动物室 n病毒性疾病疾病病原媒介动动物人类临类临 床症状传传染途径猴疱疹病毒感染 (B- Virusinfection) cercopitheci ne Herpesvirus Type 1猕猕猴类类肌痛、发热发热、头头痛；迅速 发发展的上行性麻痹；感觉觉异 常、复视视、运动动失调调、潴尿 、抽搐、吞咽困难难，死亡唾液(咬伤伤)、抓 伤伤马马尔堡病毒症(Marburg- Viresdisease) Marburg- Virus非洲绿绿猴 肌痛、发热发热、头头痛、器官 坏死、出血性休克、眼结结膜 溢血、恶恶心、呕吐、严严重下 痢、白细细胞减少，急性死亡接触、空气传传染 ；人类类之间间可经经 由血液、分泌物 或精液传传染痘病毒症(PoxMrusdis ease) Pox virus其他灵长长 类类类类似天花症状，如发热发热、 皮疹、头头痛、咽喉痛、虚脱 、偶有腹痛，严严重致死接触传传染或呼吸 道感染猴痘 (Monkeypox) Pox virus猕猕猴类类 眼睑睑、脸脸部、身体或生殖 器有局部的卵圆圆形或圆圆形隆 起红红斑接触传传染附：人畜共患病续表疾病病原媒介动动物人类临类临 床症状传传染途径麻疹 (Measles； Rubeola)Paramyxo virus自然宿主为为 人群，灵长类长类 患病后可感染 人类类发热发热、结结膜炎、鼻炎、 咳嗽、有红晕红晕小白点于 颊颊部黏膜，在脸脸部及其 他部位出现现皮疹空气传传染、呼吸道分 泌物接触能传传染甲型肝炎 (Hepatitis A)Hepatitis A virus黑猩猩、械 猴、石蟹猕猕猴 、枭枭猴发热发热、身体不适、厌厌食 、恶恶心、腹部不适、黄 疸粪粪便排毒、经经口或胃 肠肠道外途径感染出血热热(Korean hemorrhagic fever)Hantaan Virus大鼠、小鼠肌痛、咳嗽，发热发热、腹 泻、出血、蛋白尿、肾肾 脏损脏损害，严严重致死吸入感染、啮齿类啮齿类 动动物咬伤伤、伤伤口污污 染淋巴细细胞脉络丛络丛 脑脑膜炎病毒感染 症 (Lyphocytic choriomeningitisvirus infection)Lyphocytic choriomenin gitisvirus小鼠、仓仓鼠类类似流行性感冒的症状 ，头头痛、肌痛、发热发热、 恶恶心、呕吐、喉痛、畏 光。
接触感染(接触小鼠 粪粪便和尿液)；吸入 ；咬伤伤，或由节节肢 动动物如蚊子、蟑蟑螂 传传播 狂犬病(Rabies)Rhabdo virus所有哺乳类类头头痛、肌痛、发热发热、恐 水、狂妄、抽搐、昏厥 、死亡 咬伤伤、皮肤伤伤口或黏 膜感染含狂犬病毒的 唾液 n细菌性疾病 疾病病原媒介动动物人类临类临 床症状传传染途径全身性感染 (Systemic infections) 布氏杆菌病 (Brucellosis)犬Brucdla Canis、猪 Brucella suis犬、牛、猪、 羊发热发热、头头痛、恶恶心、体 重减轻轻有可能发发生菌 血症，睾丸炎、不育等由接触感染，可经经口、 皮肤、呼吸道、尿液、 黏膜感染钩钩端螺旋体病 (Leptospirosi s)Leptospiros is interro- gans各种脊椎动动物 的哺乳类类、两 栖类类、爬行类类精神萎靡、体重减轻轻 、呕吐、下痢、发热发热、 黄疸、突发发性死亡接触感染动动物的尿液， 由创伤创伤、皮肤或口腔感 染 鼠疫(Plague) Yersinia(Pa steurella) pestis鼠类类、猫、 犬、兔、山羊淋巴结结型鼠疫：发热发热 、淋巴结肿结肿大与发发炎。
化脓脓型鼠疫：全身性尤 其是肺、脑脑膜化脓脓由蚤传传染另外，接触 受感染的动动物，或吸入 带带菌的空气感染皮肤 伤伤口或黏膜亦可感染 鹦鹉热鹦鹉热 (Psittacosis)Chlamydia psittaci多种鸟类鸟类(鹦鹦 鹉鹉科、火鸡鸡、 鸽鸽、鸭鸭等)呈急性或隐隐性感染， 包括发热发热、厌厌食、肌痛 、干咳与带带病原的渗出物、分 泌物、排泄物接触传传染 ，或经经呼吸道感染 鼠咬热热(Rat- BiteFever) Streptobacill us monili- fonnis spirillum minus 大鼠等啮齿啮齿 类类 发热发热、淋巴结肿结肿大、 发发抖、头头痛、肌痛 被带带菌的大鼠、小鼠、 犬、猫咬伤伤，由空气、 灰尘尘或饮饮用污污染的牛乳 感染 n续表疾病病原媒介动动物人类临类临 床症状传传染途径呼吸道感染 ( Respiratory lnfections) 结结核病 (Tuberculosis ) Mycobacteri um tu- berculosis 犬、猫、猴 咳嗽、生痰、。