仪器操作规程-稳定同位素比质谱仪

仪器操作规程-稳定同位素比质谱仪仪器操作规程-稳定同位素比质谱仪一、标准操作规程稳定同位素质谱测试碳氮同位素样品步骤（固体样品稳定同位素质谱测试碳氮同位素样品步骤（固体样品 C/N 同位素测试）同位素测试）第一步 设备状态准备1、装填反应管：石英管从下到上为：石英棉 3cm，镀银氧化钴 3cm，石英棉 0.5～1.0cm， 铜 11cm，石英棉 0.5～1.0cm，三氧化二铬 5.5cm，石英棉垫子 0.5cm；注意填充过程要转动 反应管，保证试剂混装均匀2、安装反应管，链接气路3、设置载气流速：先将 carria 和 reference 都设置为 10mL/min,待气流稳定后，设置 carria 为 300mL/min 和 reference 为 110mL/min4、 He 气泄漏检查： 先用肥皂泡沫涂抹线路的接口处， 仔细检查有无泄漏， 如没有发现泄漏， 用 EA 软件的自动检漏功能检查，在 200 秒时，carria 和 reference 不大于 3ml/min；认为系 统不漏气5、反应炉升温：逐步升温，设置 right furnace:400℃-600℃-800℃-950℃，每个温度待 30min 左右,Oven:50℃；6、等待反应管烧稳定：一般大于 12 小时；7、设备状态调整：依次打开针阀、离子源，查看氩（Ar）和 H2O 的的本底，待氩的本底基 本稳定，打开参考气（CO2 或 N2） ，对离子源做自动聚焦，做参考气的平行行和线性，使 参考气稳定。

第二步 样品测试1、设备状态测试：先做一个空样品，再烧一个空锡杯，通过图形可以判断反应管的状态和 气路的稳定状态，如初步判断设备状态良好，至少连续测定标准样品 6 个（3 个 GLY 和 3 个 UREA）,标准偏差在δ13C<0.2‰，δ15N<0.3‰，认为设备状态可以做样2、包样：一般都用 4×6 锡杯包样，做δ13C 测试时，GLY 和 UREA 的称量量均为 0.08～ 0.1mg,植物样品的称量量一般为 0.05-0.08mg，动物样品的称量量一般为 0.05～0.25mg做 δ15N 测试时， GLY 的称量量均为 0.18-0.2mg, UREA 称量量为 0.08～0.1mg， 植物样品的称 量量 1.5-2.5mg，动物样品的称量量一般为 0.25～0.5mg，土壤样品和其他类型的样品样通过 试测确定样品量的多少3、样品测试：做δ13C 测试时，每天早晨开始测样前做离子源的自动聚焦，先做 2 个 GLY 和 2 个 UREA 后，一般每隔 12 个样品放 1 个 GLY 和 1 个 UREA，如果是膜的样品，样品 间可以适当多加一些标准样品做δ15N 测试时，每天也要做自动聚焦，先做 2 个 GLY 和 2 个 UREA 后，一般每隔 6 个样品放 1 个 GLY 或 1 个 UREA，如果是膜和土壤的样品可以 适当多加一些标准样品。

第三步 数据处理1、导出数据：用 Workspace 软件将数据导出为 EXCEL 文档2、数据校正：δ13C 的标样 GLY 的偏差<0.1‰，数据结果一般不需要校正δ15N 的值， 采用 GLY 和 UREA 俩点校正法二、送样要求1、酸处理：采集的土壤和沉积物样品中含有无机碳，会影响到有机体碳同位素的数据所以，在干燥前应该进行酸处理具体操作如下：将土壤和沉积物样品适当粉碎（为了更好的反应），放在小烧杯或离心管中，倒入适量浓度为 1N 的盐酸，这时会发现有小气泡冒出，这是盐酸于土壤中的无机碳反应产生的 CO2，用玻璃棒搅拌使反应更完全，可以间隔 1 小时搅拌一次使之充分反应 反应至少 6 小时， 除去土壤中的无机碳， 沉淀，倒掉上层清夜，再用去离子水搅拌洗涤，沉淀，倾倒上层清夜，重复 3-4 次，充分洗净过量盐酸然后烘干，条件和烘干植物一样2、磨样：经过烘干的样品需要研磨才能进行分析分析，为了保证样品的均匀，研磨程度至少要过 60 目的筛子。