综合性探究实验——肿节风的药片制作一、主要药品成分简介：肿节风又名九节茶、草珊瑚、接骨茶等,为金粟兰科植物草珊aScrandraglabar(Thubn.)Nakia 的于燥全株主要用于血热紫斑、紫痈,风湿痹痛, 跌打损伤中国药典收载的剂型有肿节风片、肿节风注射液和血康口服液肿节风有抗肿瘤、抗菌消炎、抗血小板减少等药理作用为了更好的利用开发肿节风药材资源, 进一步研究疗效的物质基础,本文对近年来肿节风的化学成分、药理作用等最新研究成果进行综述夏、秋二季采收，除去杂质，晒干别名：接骨金粟兰、九节茶、九节花、九节风、竹节茶、接骨莲、观音茶、接骨木、九节风、驳节茶、鸭脚节、山牛膝、珍珠兰、九节草、野靛、学士茶、接骨丹、接骨草、铜脚灵仙、九节兰、节骨茶、接骨莲、竹茶功能主治抗菌消炎凉血清热解毒，祛风通络，活血散结用于肺炎、阑尾炎、蜂窝组织炎属热毒壅盛证候者；以及风湿痹痛、跌扑损伤、肿瘤的辅助治疗二、主要功效清热解毒凉血，活血消斑散瘀，祛风除湿通络用于血热紫斑、紫癜，风湿痹痛，跌打损伤肢体麻木；骨折；妇女痛经；产后瘀滞腹痛；肺炎；急性阑尾炎；急性胃肠炎；菌痢；胆囊炎；脓肿；口腔炎；风湿痹痛肿节风片与肿节风注射液联合用于消化道癌、胰腺癌、肝癌等肿瘤。
三、主要成分1 化学成分根据目前文献资料报道,从肿节风药材中分离得到的化合物主要有黄酮类、菇类、香豆素类、酚酸类,还包括一些挥发油、有机酸和微量金属元素等物质1.1 菇类成分分离的得到的菇类化合物共有 27 个,见表 11.2 黄酮(普)类从肿节风中分离得到 25 个黄酮类化合物,见表 21.3 香豆素类从肿节风中分离得到 11 个香豆素类化合物,见表 3.1.4 酚酸类化合物分离得到酚酸类化合物有 11 个, 见表 4.1.5 有机酸类肿节风中的有机酸有硬脂酸,棕搁酸,正十五烷酸,延胡索酸和琥珀酸1.6 其它肿节风中还含有大量挥发油,主要为榄香烯,雅槛蓝烯,1 一对一孟烯一 8 一乙酸酷,葡萄糖,蔗糖,胡萝卜苷,白桦脂酸,B 一谷幽醇,己六醇三、临床应用3 1 治疗肺炎肿节风注射液是一复方制剂, 主要成分包括延胡索酸、乙酸芳樟醋、玻拍酸、异白蜡树定、香豆素等姚圣祥等 30[ }采用肿节风注射液治疗小儿病毒性肺炎 6 0 例, 并与同期应用利巴韦林注射液治疗比较, 治疗组总有效率 88.33 %, 对照组为 67.27 % , 两组临床疗效有显著性差异; 且不良反应较少3.2 抗肿瘤用肿节风注射液配合化疗治疗晚期消化道恶性肿瘤 33 例,单纯化疗 32 例,结果显示,治疗组显效 6 例,有效 19 例,无效 8 例,总有效率 75.8%;对照组显效 1 例,有效 14 例,无效 17 例,总有效率 46.9%:两组之间有显著性差异。
3.3 治疗肠炎用肿节风治疗小儿轮状病毒肠炎 42 例,对照组给予病毒啤,结果表明总有效率 100%,显效率为 95.2%,疗效确实可靠3.4 呼吸道感染将 78 例急性上呼吸道感染的儿童随机分两组,治疗组 46 例,用肿节风注射液治疗,对照组38 例,用病毒哇治疗,结果显示,治疗组在退热时间、症状、体征消失与对照组相比有显著性差异四、综合性实验步骤实验一 肿节风总黄酮的醇沉提取实验（一）实验基本流程水煮肿节风药材，浓缩得到浸膏（为制片提供原材料） 醇沉 通过芦丁标准曲线测定肿节风总黄酮的含量2 ） 实验操作1.水煮用电子天平称取 100g 的肿节风药材于烧杯中，加 800ml 水在电炉上煮 2h 左右，过滤保留药液，药材残渣再加 800ml 水煮 2h 左右，过滤合并药液并将药液在电炉上蒸发至50ml 左右将药液移至旋转蒸发仪中蒸发至液体相对密度为 1.3 左右，即得肿节风浸膏（差不多 20ml）2.醇沉取 1ml 肿节风浸膏于烧杯中（用注射器），加水使其初膏浓度为 1：2 （即每毫升浸膏相当于 2g 干药材） ，然后加入浸膏液体总体积 1.5 倍量的无水乙醇，使浸膏溶液中乙醇浓度达 60%（说明： 100g 药材旋蒸出 20ml 浸膏，初膏浓度即为 1:5，1ml 初膏浓度为 1：5的浸膏相当于 5g 干药材，加 1.5ml 水使液体量达 2.5ml，则此时其初膏浓度变为 1：2 ，再加 2.5×1.5=3.75ml 无水乙醇使乙醇浓度达 60%） 。
然后置冰箱中冷藏 15h，得到醇沉后溶液醇沉过程需做 3 个平行样3.标准品溶液的制备精密称取芦丁标准品 10.0mg，在小烧杯中加体积分数为 60%的乙醇溶解后转移至 50mL量瓶中，定容至刻度4.建立标准曲线分别精密吸取芦丁标准品溶液 0、2、3、4、5、6、7mL，置 25mL 量瓶中，分别加体积分数为 60%的乙醇补足至 7mL，然后加入质量分数为 5%亚硝酸钠 1.0mL，摇匀，静置 6min，加入质量分数为 10%硝酸铝 1.0mL，摇匀，静置 6min，再加入质量分数为 4%的氢氧化钠10.0mL，用蒸馏水定容至 25mL，摇匀，静置 10min 后，然后按 2.2.3 中方法处理，用可见-紫外分光光度计于 510nm 处测吸光度以芦丁标准品的浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线芦丁标准曲线的制备及肿节风中总黄酮含量的测定Figure 1. 芦丁标准曲线，横坐标为标准芦丁处理后溶液浓度 g/ml，纵坐标为 510nm 下的吸光值，通过线性拟合可以得出，标准曲线为 y = 8.553x + 0.008，R 2 为 0.999样品一 样品二吸光度 A510 0.538 0.508Figure 2.样品总黄酮吸光度测定。
本实验测得样品结果为结果为 0.538 以及 0.508，得到相对应浓度为 0.0620g/ml 和 0.0585g/ml5.样品溶液的制备取醇沉后溶液，离心（4000r/min,5min）,再取离心上清液置蒸发皿中，在烘箱中烘1h 左右烘干，先加入 1ml 蒸馏水溶解，再加入 8ml 无水乙醇，搅拌均匀，然后离心取上清液，用 0.45μm 的微孔滤膜滤过，加水定容至 25mL，作为样品溶液6.样品含量测定精密吸取样品溶液 1.0ml，按 4 项中所示方法加试剂，于 510nm 处测定吸光度；另取一空的 25ml 容量瓶，按相同操作加试剂，作为空白对照，测定吸光度将三个平行样取平均值计算含量实验二 肿节风分散片的制备及片剂的质量控制（一）片剂成品的制备1.肿节风分散片的制备[处方]主药：肿节风浸膏 4.0g填充剂：微晶纤维素 12.0g崩解剂：羟丙基纤维素 5%（占干颗粒重）崩解剂：羧甲基淀粉钠 3%（占干颗粒重）润滑剂：滑石粉 4%（占干颗粒重）黏合剂：3%羧甲基纤维素钠 适量润湿剂：50%乙醇 适量[制法]按处方量准确称取肿节风浸膏、填充剂，搅拌均匀，喷洒 50%乙醇适量，并加入适量黏合剂，混合均匀，制成软材。
把软材置于 20 目筛，边小力挤压边抖动钢筛，使软材过筛成较结实的小颗粒放于 600C 的烘箱中烘干，干颗粒过 20 目筛整粒，称重，按处方量加入事先过 100 目筛的崩解剂、润滑剂，混合均匀，即可进行压片二）片剂的质量检查1.查阅药典“制剂规则”的片剂内容2.外观检查[检查法]取所制分散片，平铺于白底板上，置于 75w 光源下 60cm 处，距离片剂 30cm，以肉眼观察 30 秒钟检查结果应符合下列规定，完整光洁，色泽一致，无杂质，无异物3.重量差异限度的检查[检查方法]取药片 20 片,精密称重总重量,求得平均片重后,再分别精密称定各片的重量,每片重是与平均片重相比较,超出重量差异限度的药片不得多于 2 片,并不得有 1 片超出重量差异限度的 1 倍[附注]（1）片剂重量差异限度（《中国药典》2000 版）片剂的平均重量 重量差异限度0.30 以下 ±7.5%0.30 或 0.30 以上 ±5%（2）只需要保留小数点以下两位重量差异限度检测结果0.144 0.156 0.139 0.155 0.153 0.159 0.154 0.157 0.156 0.151每片重（g ） 0.151 0.141 0.158 0.159 0.157 0.150 0.161 0.156 0.156 0.160总重（g ）平均片重（g ）重量差异限度超限的有X 片超限 1 倍的有Y 片结论3.037 0.15365 0.142126~0.165174 2 0 合格4.崩解时限的检查（1）将吊篮通过上端的不锈钢轴悬挂于金属支架上，浸入1000ml 烧杯中，并调节吊篮位置使其下降时筛网距烧杯底部25mm，烧杯内盛有温度为37℃±1℃的水，调节水位高度使吊篮上升时筛网在水面下15mm 处。
2）除另有规定外，取供试品6 片，分别置上述吊篮的玻璃管中，加挡板，启动崩解仪进行检查，各片均应在3 分钟内全部崩解；如有1 片不能完全崩解，应另取6片复试，均应符合规定如果供试品黏附挡板，应另取 6 片，不加挡板按上述方法检查，应符合规定检测结果：两次崩解测试中，样品均超过三分钟后才崩解样品在四分半钟实现全部崩解5.硬度检查[检查方法]（1）指压法：取药片置中指和食指之间，以拇指用适当的力压向药片中心部，如立即分成两片，则表示硬度不够2）自然坠落法：取药片 10 片，以 1 米高处平坠于 2cm 厚的松木板上，以碎片不超过 3片为合格，否则应另取 10 片重新检查，本法对缺解不超过全片的 1/4，不作碎片论3）片剂四用测定仪：开启电源开关，检查硬度指针是否零位将硬度盒盖打开，夹住被测药片将倒顺开关置于“顺”的位置，拔选择开关至硬度档硬度指针左移，压力逐渐增加，药片碎自动停机，此时的刻度值即为硬度值（kg） ，随后将倒顺开关拔至“倒”的位置，指针退到零位硬度检测样品一 样品二 样品三 样品四 样品五硬度（N） 47.16 55.36 51.32 74.23 59.386 分散均匀性取肿节风分散片 2 片，置（20±1）℃的 100ml 水中，振摇 3min，平行测定 3 份，结果分散片全部崩解并全部通过二号筛。
7.溶出度检查（1）溶出度测定方法 ： 以水为溶出介质，向溶出杯中加入 800ml，加热到 37±1℃，恒温，随机取样品 6 片，置于转篮中，转速为 50r/min，在 3、5、10、15、30、45min 取样5ml（向溶出杯中补回等温等量的水） ，过 0.45nm 滤膜移取 2ml 样品溶液于 50ml 容量瓶中，加入 2.3ml 无水乙醇，再加 2.7ml70%乙醇至 12ml，加入 5%亚硝酸钠 2ml，摇匀，放置6min，加入 10%硝酸铝溶液 2ml，摇匀，放置 6min，加入 4%NaOH20ml，加 70%乙醇至刻度，摇匀，放置 10min，测量以芦丁为检测指标，紫外分光光度法测定黄酮含量，并计算浓度和各取样时间的累积溶出百分率2）溶出度测定 ： 取肿节风分散片 6 片，按（1）中方法测定分散片在3、5、10、15、30、45min 时的溶出度3）得出溶出曲线五、思考与探究1、中药材常用的提取技术有哪些？1．萃取法——最常用的方法2．冷浸法——冷浸法适用于固体制剂中测定组分的提取3．回流提取——固流提取法主要用于固体制剂的提取4．连续回流提取法——采用索氏提取器进行5．水蒸气蒸馏法——部分具挥发性可随水蒸气蒸出的组分6．超声提取法——适用于固体制剂中测定组分的提取7．超临界流体萃取2、 为什么药液醇沉时初膏浓度不能太稀或太浓？[2]初膏浓度过大 , 则药液粘稠度较高 , 乙醇与药液难以充分接触 , 所产生的沉淀易包裹药液 , 造成有效成分的损失初膏浓度过低 , 则药液量较大 , 需耗费大量乙醇 , 延长工序时间 , 费时费力。
3、片剂的质量检查结果判断根据。