单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,2024/10/27,1,胚胎移植技术,2024/10/27,2,一、胚胎移植概述,1.,胚胎移植的概念,2.,胚胎移植技术的发展简史,3.,胚胎移植在畜牧生产上的意义,2024/10/27,3,1.,胚胎移植的概念,胚胎移植(,embryo transfer,ET,),也称受精卵移植,是指将一头良种母畜配种后的早期胚胎取出,或者由体外受精及其他方式获得的胚胎,移植到另一头同种的生理状态相同的母畜体内,继续发育成为新个体,所以又称之为人工授胎或借腹怀胎提供胚胎的个体称为,-,供体(,donor,),接受胚胎的个体称为,-,受体(,recipient,),2024/10/27,4,2.,胚胎移植技术的发展简史,2.1,初始阶段,1890-1900 W.Heape,将安哥拉兔和荷兰兔的受精卵分别移植到比利时兔的输卵管内,分别获得仔兔,2,只2.2,初级阶段,1900-1950,主要由英美科学家在家兔、绵羊、山羊小家畜方面研究,成功率,35%,左右2024/10/27,6,2.4,实用化初始阶段,1970-1980,加美开始成立牛胚胎移植公司,,1973,年牛冻胚移植成功(英)。
2.5,实用化研究阶段,1982-,大规模胚胎移植、核移植、嵌合体、胚胎分割、性别鉴定、体外受精在英美日德广泛开展克隆羊诞生2024/10/27,7,3.,胚胎移植在畜牧生产上的意义,1.,提高优良母畜繁殖力,加快优良品种改良和动物育种步伐;,2.,诱导双胎;,3.,濒危动物的拯救与保护将胚胎移入同种或近缘种生殖道内,以获得存活动物;,4.,保存遗传资源、胚胎库;,5.,胚胎移植是胚胎工程操作的重要步骤2024/10/27,8,二、胚胎移植的生理学基础与基本原则,1.,胚胎移植的生理学基础,2.,胚胎移植的基本原则,2024/10/27,10,2.,胚胎移植的基本原则,种的一致性:供体和受体属于相同的种,动物生理状态的一致性:黄体期,解剖部位的一致性:子宫角或者输卵管,2024/10/27,11,胚胎移植原则图解,2024/10/27,13,三、胚胎移植的技术程序,受体,土种动物或者本地品种,体格接近,营养良好,无疾病,繁殖生理特点与供体相似,比如多周期发情,移植前,2,个月进行编号和补饲,2024/10/27,15,超排方法:在发情周期的一定时期,用,PMSG,或,FSH,促进卵泡发育,于发情开始后,12-16h,和,20-24h,各配种(输精)一次,并于第一次配种后静脉注射,hCG,或,LH,,以便排出多数卵子。
2024/10/27,16,2024/10/27,18,山羊:减量法,6,次注射,3d,,,100IU1,75IU1,50IU3,25IU=350IU,或,100,504,251=325IU,,首次注射后,36h,撤栓,并在,36h,和,48h,分别注射,PG 0.1mg,各种动物的超排程序,2024/10/27,19,超排效果好的卵巢黄体,2024/10/27,20,超排效果不好的卵巢黄体,2024/10/27,21,3.,受体的同期发情,对母畜进行同期发情一般采取两种手段:,一种是延长黄体期:最常用的方法是进行孕激素处理常用的有孕酮、甲孕酮、甲地孕酮、炔诺酮、氯地孕酮等处理方法是皮下埋植、阴道栓、口服和肌肉注射等另一种方法是缩短黄体期的方法有,注射促性腺激素注射促性腺激素释放激素注射前列腺素等2024/10/27,22,同期发情的方法,1.,孕激素阴道栓法 孕激素可通过口服、注射、皮下埋植和阴道放置孕激素缓慢释放装置等方法皮下埋植或阴道放置缓慢释放装置使用方便易行、效果可靠、成本低廉,尤其是阴道栓法2.,前列腺素及其类似物处理法 对有功能性黄体的母畜于注射后,48,96h,内发情:一次,PG,法、二次,PG,法,2024/10/27,24,5,、胚胎回收与鉴定,收集胚胎就是在配种或输精后的适当时间,从超排供体回收其胚胎,以备给受体移植,亦称胚胎回收或胚胎采集,简称采卵。
采卵的效果与采集时间、方法和检卵技术均有关系1,)采卵时间:,一般将配种当日定为,0,天,由配种后第二天开始计算采卵天数根据采集目的不同,决定在第几天采卵2,)采卵方法:,有手术法和非手术法两种在大家畜基本上已将手术法淘汰,但在绵羊、山羊、猪和实验动物由于受解剖特点的限制,一直采用手术方法不管用何种方法,一般收集卵子数只能相当于黄体数的,40,80,2024/10/27,25,第一种由宫管结合部冲向输卵管本法冲卵率高,很少损害生殖道除了猪因宫管结合部具有阀门样结构不能采用以外,各种中、小动物均可采用第二种方法是由输卵管伞冲向宫管结合部本法适用于猪,是由一个插入该处的钝注射针头或光滑的细玻管收集卵子;其缺点是术后常造成宫角尖端或输卵管粘连手术法采卵,2024/10/27,26,第三种方法是由子宫角尖端冲向子宫角基部本法用于发情,5,天以后收集子宫内的卵,其收集数量比,A,B,法略少,易引起子宫粘连冲卵液为杜氏,PBS,用量,:,第一、第二两种方法用,5-l0ml,,第三种方法用,10-20ml,2024/10/27,28,2024/10/27,29,2024/10/27,31,显微镜下的胚胎,2024/10/27,32,2024/10/27,33,2024/10/27,34,胚胎鉴定及短期保存,胚胎质量鉴定,在,60,80,倍立体显微镜下。
超排处理后,卵巢内的卵泡并非同时排卵,加之超排处理使生殖道内的内分泌环境改变,回收到的胚胎发育程度发生变化有的卵子可能未受精或受精后退化这就需要对胚胎进行形态学鉴定,选出形态比较正常的胚胎进行移植胚胎分级,A,、,B,、,C,、,D,优质(,Excellent,)优良胚(,Good,)普通胚(,Fair,)不良(,Poor,),胚胎的短期保存,常温保存(,22,25,)和 低温保存,2024/10/27,35,显微镜下的胚胎,2024/10/27,36,6.,给受体移植胚胎,移植胚胎就是将采取的可用卵移给受体母畜,亦称卵的移植,简称移卵移植前受体准备 受体移植前应证实卵巢上有发育良好的功能性黄体在羊,有条件时可以进行腹腔镜检查,确定黄体数量、质量和在哪一侧;受体在术前要饥饿,12,24h,术部在术前,1d,剃毛牛在进行非手术移植前,通过直肠检查确定是否有黄体和黄体的位置及大小手术法移植 输卵管 子宫,非手术法移植 牛现在一般采用经子宫颈移植,以前曾采用绕过子宫颈移植法和,Testart,移植法,现已基本不采用羊需要腹腔镜和配套的操作器械,2024/10/27,37,动科,072,班 李振,THE END,。