GB ××××—××××食品安全国家标准食品营养强化剂 酪蛋白钙肽（征求意见稿）201×-××-××实施201×-××-××发布中华人民共和国卫生部 发布2010-06-01实施2010-××-××发布GB ××××—××××食品安全国家标准食品营养强化剂 酪蛋白钙肽1 范围本标准适用于以牛乳或酪蛋白制品为原料，用酶解法生产制得的食品营养强化剂酪蛋白钙肽2 主要成分和相对分子质量主要有效成分是含有1个～6个磷酸丝氨酸残基的多肽，其相对分子质量为400～50003 技术要求3.1 感官要求感官要求应符合表1的规定表1 感官要求项 目要 求检验方法色泽白色至淡黄色取适量试样置于清洁、干燥的白瓷盘中，在自然光线下观察其色泽和状态状态粉末3.2 理化指标理化指标应符合表2的规定表2 理化指标项 目指 标检验方法酪蛋白磷酸肽含量（以干基计），w/%符合声称附录A中A.3等电点不溶物（以干基计），w/%≤30附录A中A.3钙（以干基计），mg/100g≥100附录A中A.4总氮（以干基计），w/%≥10GB 5009.5凯氏定氮法a干燥减量，w/%≤7GB 5009.3直接干燥法灰分，w/%≤20GB 5009.4铅（Pb）/（mg/kg） ≤2.0GB 5009.75a 结果不乘以氮换算为蛋白质的系数F。
3.3 微生物指标微生物指标应符合表3的规定表3 微生物指标项 目指 标检验方法菌落总数/（CFU/g）≤3000GB 4789.2大肠菌群/（MPN/g）＜3.0GB 4789.3霉菌和酵母/（CFU/g）≤50GB 4789.152附 录 A检验方法A.1 一般规定本标准所用试剂和水在未注明其他要求时，均指分析纯试剂和GB/T 6682规定的三级水试验中所用标准溶液、杂质测定用标准溶液、制剂和制品在未注明其他要求时，均按GB/T 601、 GB/T 602、 GB/T 603的规定制备试验中所用溶液在未注明用何种溶剂配制时，均指水溶液A.2 鉴别试验A.2.1 试剂和材料A.2.1.1 硫酸A.2.1.2 硫酸铜（CuSO4·5H2O）A.2.1.3 硫酸钾（K2SO4）A.2.1.4 混合试剂：硫酸溶液（质量分数25%）+钼酸铵溶液（25 g/L）+水+维生素C溶液（100 g/L），1+1+2+1A.2.2 分析步骤将酪蛋白磷酸肽含量的测定所得的干燥沉淀物（A.3.4）转移至凯氏消化管中，加入10 mL硫酸和1 g催化剂（0.1 g硫酸铜和0.9 g硫酸钾），加热消化完全。
取1 mL消化液于试管中，加入1 mL水，沸水浴10 min取出，冷却至室温，吸取100 μL至另一试管中，加入1.9 mL水，再加入3 mL混合试剂，于45 ℃水浴保温20 min取出，溶液应显蓝色A.3 酪蛋白磷酸肽含量（以干基计）及等电点不溶物（以干基计）的测定A.3.1 方法提要在试样溶液中加入一定浓度的钡离子，钡离子在酪蛋白磷酸肽分子间形成桥连，在适当的温度和pH下，加入一定浓度的乙醇即可使桥连状的酪蛋白磷酸肽分子团沉淀下来，将沉淀干燥并称量，计算得到产品的酪蛋白磷酸肽含量另外，在酪蛋白等电点（pH 4.6）条件下，通过离心分离不溶沉淀物和可溶上清液，将沉淀干燥并称量，计算得到等电点不溶物的质量分数A.3.2 试剂和材料A.3.2.1 无水乙醇：使用前冷藏至4 ℃A.3.2.2 氯化钡溶液：100 g/LA.3.2.3 盐酸溶液：取18 mL盐酸慢慢加入100 mL水中A.3.2.4 氢氧化钠溶液：80 g/LA.3.3 仪器和设备冷冻离心机A.3.4 分析步骤称取试样0.5 g~1.5 g（精确至0.0002 g），置于一个50 mL离心管A中，加入15 mL水使其完全溶解。
用盐酸溶液调节试样溶液的pH至4.6，然后置于冷冻离心机中，在约4 ℃下5000 r/min~7000 r/min离心30 min，离心管A及其中沉淀物用于等电点不溶物的测定取上清液于预先在105 ℃干燥至恒重的一个50 mL离心管B中，用氢氧化钠溶液调节此上清液的pH至6.8，控制溶液总量在20 mL以内，加入氯化钡溶液1.5 mL，再加入无水乙醇至50 mL，摇匀后于4 ℃冰箱中放置至少12 h然后，从冰箱中取出置于冷冻离心机中，在约4 ℃下5000 r/min~7000 r/min离心30 min，弃去上清液得沉淀物离心管A、B及其中沉淀物清洗后先在60 ℃~70 ℃干燥箱中烘1 h，再升高温度至105 ℃烘至恒重A.3.5 结果计算 酪蛋白磷酸肽含量（以干基计）的质量分数w1按公式（A.1）计算：…………………………………………（A.1）式中：mb——恒重后离心管B和沉淀物的质量，单位为克（g）；mb0——离心管B的质量，单位为克（g）；m——试样的质量，单位为克（g）；w0——试样的干燥减量，%试验结果以平行测定结果的算术平均值为准在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的10 %。
等电点不溶物（以干基计）的质量分数w2按公式（A.2）计算：…………………………………………（A.2）式中：ma——恒重后离心管A和沉淀物的质量，单位为克（g）；ma0——离心管A的质量，单位为克（g）；m——试样的质量，单位为克（g）；w0——试样的干燥减量，%试验结果以平行测定结果的算术平均值为准在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不大于算术平均值的5 %A.4 钙（以干基计）的测定取A.3中恒重后离心管B的沉淀物作为试样，按GB/T 5009.92原子吸收分光光度法测定。