编号:TCD0155植物提取物中多糖含量测定方法一、仪器与试剂1. 仪器：UV2101 PC紫外-可见光分光光度计2. 试剂： 5%苯酚溶液、浓硫酸、80%乙醇溶液二、样品测定1. 对照品溶液制备 精密称取105°C干燥至恒重的无水葡萄糖约50mg，置 50mL 容量瓶中，加水溶解定容2. 标准曲线的制备精密量取对照品溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL分别 置于50mL容量瓶中，加水定容，即为对照品供试液另各取对照品供试液l.OmL 于25mL具塞刻度试管中，分别加5%苯酚溶液l.OmL,摇匀，加入浓硫酸5.0mL（加 入浓硫酸时,勿沿壁加入应将移液管悬于试管口使浓硫酸垂直冲入液面），立即摇匀于沸水浴中加 热 10min ，取出后置冰水浴中冷却并放置至室温以试剂空白做参比在 485nm 的 波长处测定吸收度，以吸收度为纵坐标，浓度（mg/mL）为横坐标，绘制标准曲 线3. 样品溶液的制备 精密称取多糖样品约300mg，置lOOmL容量瓶中，加80% 乙醇溶液80mL，超声振荡60min,放置至室温，过滤，残渣用80%乙醇溶液洗涤2〜 3 次后， 用少量沸水将残渣洗入原 100mL 容量瓶中， 加入沸水共约 80mL， 超声振 荡 60min 溶解, 放置至室温定容。
摇匀过滤，取续滤液 2.0mL 置 50mL 容量瓶中 （对于含量低于30%，高于 60%的样品，应适当改变移取续滤液的体积），加水定 容，即为供试样品溶液按标准曲线制备项下操作，由标准曲线求得供试样品溶 液浓度三、结果计算C X 100 X50iX% = X 100WXViiC :由标准曲线求得供试样品溶液的浓度（mg/mL）iWj：样品称样量（mg） Vj：移取样品续滤液的体积（mL）注：a・在显色反应操作中，空白、对照、样品的操作应保持一致b・80%乙醇溶液的配制；用干燥、洁净的量筒分别量取100ml蒸馅水，400ml 无水乙醇，混合均匀c. 试验过程的超声处理时间必须严格控制。