第十一章 非营养物质的代谢1.肝脏的生物转化作用： a.第一相反应：氧化，还原，水解第二相反应：结合b.生物转化不等于解毒作用2.胆汁的主要成分是胆汁酸盐（结合型为主） ：a.游离胆汁酸：鹅脱氧胆酸、脱氧胆酸、胆酸、石胆酸结合胆汁酸：指上述四种与甘氨酸和牛磺酸的结合b.初级胆汁酸：鹅脱氧胆酸、胆酸以及二者与甘和牛的结合次级胆汁酸 :脱氧胆酸、石胆酸以及二者与甘和牛的结合3.胆色素的代谢a．胆色素的组成：胆绿素，胆红素，胆素原，胆素b.胆色素合成的原料：体内的铁卟啉类物（血红蛋白，肌红蛋白，细胞色素，过氧化物酶，过氧化氢酶）c.胆红素主要与清蛋白结合运输：结合后胆红素性质改变—水溶性↑，通透性↓，容易随尿液排出d.结合胆红素（与葡糖醛酸结合），以上性质以及重氮试剂反应（ +）；同义名称：直接胆红素，肝胆红素3.血红素的合成原料：琥珀酰 CoA、甘氨酸， Fe2+；关键酶： ALA 合酶a.血红素是以下物质的辅基：血红蛋白，肌红蛋白，细胞色素，过氧化氢酶，过氧化物酶第十三章 真核基因与基因组1. 真核基因的结构：a.编码序列：外显子（在成熟的 mRNA 中有保留），内含子b.非编码序列 -调控序列 3 个：启动子、增强子、沉默子c.真核基因结构的最大特点：不连续性d.高等真核生物编码蛋白的基因大都有内含子，组蛋白例外；原核细胞的基因基本没有内含子；编码 rRNA 和一些mRNA 的基因也有内含子e.真核生物的内含子与外显子连接处有共有序列： GT 开始AC 结束f.真核生物的三种启动子： GC盒、 TATA盒、（ A、 B、C 盒）2．真核基因组的结构：包括 —细胞核染色体 DNA 和 mtDNAa.结构特点：1）非编码序列 >编码序列（ 5%）P.S内.含子的数量和大小在很大程度上决定高级真核基因的大小！2）真核基因组含有大量重复序列（不编码）3）真核基因存在多基因家族和假基因4）大约 60%的人基因具有可变剪切， 80%的可变剪切可以使蛋白质的序列发生改变5）真核细胞体细胞为二倍体b.重复序列的分类：高度重复序列 eg:反向重复序列、卫星 DNA中度重复序列 eg: 短分散片段 —Alu 家族、kpnI家族、Hinf 家族长分散片段—真核生物基因组的 rRNA 基因低度重复序列 （单拷贝序列） c.mtDNA 可以独立编码线粒体中的一些蛋白3．人的基因组最大，复杂程度也最高，但所含的基因数并不是最多。
第十八章 基因表达的调控1. 基因表达—就是指基因转录和翻译的过程；但是并非所有基因表达都能产生蛋白质；基因表达的基本控制点是：转路起始；人类组含有 2 万 ~2.5 万个基因， 但是只有很小一步分基因处于表达状态2. 基因表达特点 :a.时间特异性 (阶段特异性 )b.空间特异性（组织特异性）3.基因表达方式的多样性 :a.持续表达—管家基因（只受启动序列与 RNA 聚合酶相互作用的影响）b.诱导 / 阻遏—诱导 / 阻遏基因4.顺式作用原件和反式作用因子共同调节a.顺势作用原件：调控序列与编码序列位于同一条 DNAb.反式作用因子： 调节基因产物可以调节同一条 DNA 上的结构基因，也可以调节不在一条DNA 上的结构基因5.原核基因表达调控——操纵子是基本单位操纵子结构 a.结构基因b.调控基因：启动子（ +DNA 聚合酶）操纵元件（ +阻遏蛋白）调节基因（特异因子、阻遏蛋白、激活因子（ CAP））第十九章 细胞信号转导的分子机制1 细胞外的化学信号（配体）a 可溶性：神经递质，内分泌，旁分泌自分泌b 膜受体 :多为蛋白2 细胞内的分子接受细胞外的化学信号（受体）a 胞内受体：只有三种 - 甲状、类固、维 ADb 膜受体：离子通道受体、 G蛋白偶联受体、酶偶联受体3 细胞内信号转导分子：a 小分子第二信使： cAMP、 cGMP、 DAG、IP3 、 Ca 离子、 NOb 酶: 蛋白激酶 A、蛋白激酶 C、蛋白激酶 Gc 调节蛋白： G蛋白（ eg:Ras 蛋白）、衔接蛋白、支架蛋白4.PDE 催化 cAMP水解，这是使环核苷酸浓度降低的酶。
5 蛋白酶偶联受体的几条通路a. Ras/MAPK通路：表皮生长因子受体的主要通路b. JAK-STAT通路（白介素 ）、Smad通路 : 与细胞生长增殖有关c. PI-3K 通路：d. NF-kB 通路：炎症和应激反应信号分子6 信号转导的基本规律和复杂性7 细胞信号转导异常与疾病a 受体异常激活 / 失能 eg: 自身免疫性甲状腺病b 信号转导异常 eg: 肢端肥大症、巨人症、心肌收缩不足、高血糖、肾性尿崩症可溶性分子信号（配体分类）神经分泌内分泌旁分泌配体名称神经递质激素细胞因子作用距离nmmmm受体位置膜受体膜/ 胞内受体膜受体举例乙酰胆碱、甘氨酸胰岛、 甲状、生长激素白介素、生长因子膜受体的分类离子通道受体G 蛋白偶联受体酶蛋白偶联受体别称配体门控受体七跨摸受体单跨摸受体内源性配体神经递质神经递质、趋化因子生长因子、细胞激素、外源刺激因子跨摸区段471功能离子通道激活 G蛋白激活蛋白激酶第二十章 常用分子生物学技术的原理及其应用1. 印记技术的类别及应用：a. DNA 印记：用于基因组 DNA 的定性和定量的分析、分析重组质粒和噬菌体b. RNA 印记：用于检测某一组织或细胞中已知的特异 mRNA 的表达水平、也可比较不同组织或细胞中同一基因的表达情况c. 蛋白质印记（免疫印记） ：用于检测样品中特异性蛋白质的存在、细胞中特异蛋白质的办半定量分析、蛋白质分子的相互作用研究2. PCR技术：聚合酶链反应—可将微量的目的 DNApain 段大量扩增。
a． 反应体系基本成分包括： 模版 DNA、特异 DNA 引物、耐热性 DNA 聚合酶、 dNTP、含有 Mg2+的缓冲液b． PCR技术工作原理：变性、退火、延伸c． PCR技术的主要用途：①基因重组时获取目的基因；②基因的体外突变③ DNA 和 RNA 的微量分析④ DNA 测序⑤基因突变分析3．基因文库 :是指一个包含了某一生物体的全部 DNA 序列的克隆群体可分为：基因组 DAN 文库、 cDNA 文库4.生物芯片技术：包括基因芯片技术和蛋白芯片技术a.基因芯片：特别适用于分析不同组织细胞或同一细胞不同状态下的基因差异表达情况，原理是：双色荧光探针杂交b．蛋白质芯片：应用于蛋白质表达谱、蛋白质功能、蛋白质相互间作用的研究5.生物大分子相互作用研究技术a.蛋白质间相互作用研究技术 eg:标签蛋白沉淀、酵母双杂交技术；b．DNA—蛋白质相互作用分析技术 eg:电泳迁移率变动分析、染色质免疫沉淀技术第二十一章 DNA 重组及重组 DNA技术1. 自然界重组的类型 a.真核生物有 3 种：同源重组（基本重组）、位点特异性重组、转座重组；b.原核生物有 6 种：上面三种 +转化、转导、接合c.位点特异性重组 eg: ? 噬菌体、 细菌、免疫球蛋白接合 eg:细菌的菌毛转导 eg:噬菌体2. 重组 DNA 技术（别名：分子克隆、 DNA 克隆、基因工程）a.8 种重组技术中常用的酶：① RE：切割目的基因② DNA 连接酶：连接目的基因和载体基因③ DNApol- I、逆转录酶：合成cDNA④冈崎片段： 3’-5’外切酶活性⑤多聚核苷酸激酶： 5’端磷酸化⑥末端转移酶： 3’端加尾⑦碱性磷酸酶：切除末端磷酸基b.载体分为克隆载体和表达载体：克隆载体有 5 种：质粒、噬菌体 DNA、柯斯质粒（黏粒载体）细菌人工染色体 (BAC)、酵母人工染色体 (YAC)表达载体有：原核—启动子、 SD序列、转录终止序列等；真核—包括原核以及复制起点、抗性基因、MCS 等c.克隆载体具有的特点 （多选）：能够自主复制、 有选择标志、有多克隆位点d.目的基因的种类：基因组 DNA、 cDNAe.目的基因的获取方法：化学合成法、基因组文库、 cDNA 文库、 PCR3.基因重组的操作步骤：分、选、接、转、筛“筛”的方式：标志补救筛选、分子杂交、 PCR 法、测序法、利用噬菌体包装特性进行筛选、亲和筛选法。
第二十三章 癌基因、肿瘤抑癌基因、生长因子1. 癌基因包括细胞癌基因和病毒癌基因a.癌基因的特点：广泛存在于生物界；进化过程中有高度保守性，维持正常生理功能；激活可癌变b．癌基因活化的机制（多选） ：获得启动子或增强子、染色体易位、基因扩增、点突变c.原癌基因的产物：细胞内外的各种因子—细胞外生长因子、跨摸生长因子受体、细胞内信号转导分子、核内转录因子d.癌基因 eg: RAS、 SRC、ERB、 MYC2.抑癌基因有哪些： TP53（基因卫士）、p16、 P21、 PTEN、APC、DCC、 VHL、WT1、 NF1、NF23.生长因子：是一类由细胞分泌的、 类似于激素的信号分子，多数为肽类物质，具有调节细胞生长与分化的作用第二十五章 基因诊断和基因治疗1. 基因诊断主样品象：血液、组织块、羊水、绒毛、毛发、唾液、尿液等2. 基因诊断技术： 包括定性分析 （基因分型、 检测基因突变）定量分析（检测基因拷贝数及基因表达产物）。