丹参药材的指纹图谱特点分析丹参药材的指纹图谱特点分析【摘耍】目的对丹参药材的指纹图谱特点进行分析探讨，为 今后的中药学研究工作提供可靠的理论依据方法 建立高效液相色 谱法指纹图谱，色谱柱选用C18柱，流动相为乙月青-0.5%冰醋酸溶液 梯度洗脱，柱温为30°C,流速为l.Oml/min,检测波长为270mn,进 样量为20ulo结果经相似软件对5个不同产地的丹参药材进行指纹 图谱分析，标定8个共有峰，相似度评价＞0.9结论经高效液相色 谱法建立丹参指纹图谱，可为不同产地丹参药材遴选提供可靠的理论 依据，值得关注 【关键词】丹参高效液相色谱法指纹图谱产地丹酚酸B 中药材丹参为唇形科植物丹参的干燥根以及根茎，上耍药理作用为扩张血管，改善微循环，使得心肌供血量 和供氧量增加，降低心肌耗氧量［1］丹参中主耍有效成分包括脂溶 性丹参酮和水溶性成分丹酚酸B曾有研究发现［2］,不同产地丹 参中有效成分含量存在明显差异本次研究中出于对丹参药材的指纹 图谱特点进行分析探讨的目的，建立了高效液相色谱法指纹图谱，并 对不同产地的指纹图谱进行了对比分析，现汇报如下 1实验材料 1・1实验仪器 所需仪器包括：日本岛津LC-2010A高效液相色谱仪，十万分之一天平，超声清洗仪。
1・2试验试药试验药品包括：丹酚酸B对照品（批号：111563-201209）,川■参酮IIA（批号:110768-201219）,购自中国药品生物制品检定所，丹参药材 产地分别为安徽、山东、河北、甘肃和辽宁；所需试剂包括：乙膳为 色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯 2方法与结果2.1色谱条件［3-4］ 色谱柱选用C18柱，流动相为乙腊-0.5%冰醋酸溶液梯度洗脱，柱温为30°C,流速为1. Oml/min,检测波长为 270nm,进样量为20ul梯度洗脱程序为：O.Olmin时乙脂5%, 0. 5% 冰醋酸水溶液95%, lOmin时乙月青10%, 0. 5%冰醋酸水溶液90%, 35min 时乙M 50%, 0.5%冰醋酸水溶液50%, 45min时乙膳80%, 0・5%冰醋酸 水溶液20%, 60min时乙腊90%, 0・5%冰醋酸水溶液10%, 75min时乙品混合溶液制备 精密称定丹酚酸B和丹参酮IIA对照品1. 72mg和1. 10mg,放置在10ml容量瓶中，经甲醇溶解后定容至刻度，配制成丹酚酸B农委0. 172mg/ml,丹参酮IIA浓度为0. llmg/ml混合溶液。
2. 2. 2供试品溶液制备[5] 取丹参药材粉末适量，过60目筛,精密称定2g,放置在具塞锥形瓶中加入50ml甲醇，超声处理40分 钟，药材残渣继续加入501订甲醇超声40分钟，合并超声提取液，水 浴蒸干，经甲醇溶液定容至50ml,过0.45uni微孔滤膜，取续滤液作 为供试品溶液 2.3精密度试验 取同一批次丹参供试品溶液，在2. 1所示色谱条件下连续进样5次，记录峰面积，计算RSD值， 结果发现各色谱峰保留时间相对标准偏差RSD值均VI%,证实该仪器 精密度良好 2.4重现性试验 取同一批次的供试品溶液5份，分别在2.1所示色谱条件下进样检测，记录峰面积，计算RSD值， 结果发现，5份供试品溶液色谱图直观观察无明显差异，以丹酚酸B 和丹参酮IIA峰面积作为标准计算RSD值均V3%,证实该方法的重现 性良好 2.5稳定性试验 取同一批次的供试品溶液，在溶液配制完成后0、2、4、6、8、12、24h在2. 1所示色谱条件下进样检测，记录峰而积，计算RSD值，结果发现，RSD值均V2.0%,证实 供试品溶液在24小时内稳定 2. 6丹参指纹图谱共有模式建立试验中选取5个不停产地的10个批次的丹参药材确定丹参的指纹图 谱，结果得到10个批次药材的共有模式，有8个共有峰，其中1号 峰为丹参酮IIA, 8号峰为丹酚酸氏 详见表1。
表1丹参指纹 图谱特征峰统计 序号 近似保留时间(min)相对峰面积 成分名称 1 26. 61 1 丹参酮 IIA 2 40. 23 0. 07 3 44. 79 0. 144 45. 81 0. 16 5 47. 89 0. 23 6 48. 33 0. 26 7 49. 52 0. 188 51. 03 0. 59丹酚酸B 保留吋间(min) 丹参指纹图谱共有模式 2. 7丹参指纹图谱分析与评价 本次试验中对5个不同产地的丹参药材进行了指纹图谱测定，对色谱图进 行了记录，结果发现，不同产地的丹参含有的有效成分基本一致，但 是不同类成分的含量存在明显差异由丹参指纹图谱共有模式可发现, 各样品较为相似，指纹图谱要求保证色谱的整体面貌基本不变[6],但是对保留时间的精确度、以及峰的及分娩及的精密度没有太高的要 求，因为各色谱峰的保留吋间在指纹图谱中的作用为对其相似位置进 行表达，峰面积、或峰高值可以对各个峰的高低、大小相应关系进行 表达，因此不必精确测量，体现了中药指纹图谱的两大评价原则分别 为整体性和模糊性相似性为对有效成分间相对含量i致性进行评价 的一个重要指标，以相关系数和夹角余弦系数为相似性对指标进行测 定，采取相应软件进行分析，经中位数法对10批次丹参样品谱图与 共有模式谱图的相似性进行评价，结果发现，本实验中，共有峰面积 均占总峰面积的90%以上，相似度〉0・9。
3讨论 出于对丹参化学成分指纹图谱进行分析，进而获得更多以色谱峰为代表的化 学成分信息的目的，本次试验中建立了高效液相色谱法丹参指纹图谱, 结果发现,所建立方法的精密度、重现性良好，具有专属性强等优势， 且操作简单5个产地10个批次的丹参药材指纹图谱中标定8个共 有峰，相似度评价＞0.9由此可推断，经高效液相色谱法建立丹参 指纹图谱，可为不同产地丹参药材遴选提供可靠的理论依据[7-8], 值得关注 参考文献 [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M]・北京:化学工业出版社,2010:52-53. [2]阎正,阎海荣，赵珅娇，等•丹参药材的PHLC指纹图谱[J]•河北大学学 报,200& 28(01) :69. [3]刘妍，游富英,毕慧敏•陕西祖师麻药材HPLC指纹图谱研究[J] •安徽农业科学,2010,12(07):332-334.[4]宋洁瑾，陈涛，李进，等•不同产地丹参药材指纹图谱比较研究[J]・ 辽宁中医杂志,2008, 17(03) :112-114. [5]王小平，刘峰，韩翠，等•丹参、红花分提和合提提取液的指纹图谱比较[J]・云南中医学院 学报,2011, 17(04):345-347. [6]吴志军，秦绪江，崔嘉，等•丹参药材HPLC指纹图谱研究[J]・黑龙江医药,2010, 16(04) : 429-431・ [7]刘梅，夏鑫华,❷桂新，等•丹参药材超高效液相色谱指纹图谱研 究[J] •广州中医药大学学报,2009, 14(06):396-398・ [8]王立萍,周凤琴，郭庆梅,等.山东丹参脂溶性组分HPLC指纹图谱及有效成 分含量测定[J]•中华中医药学刊,2009, 16(01) :211-212.。