食品中维生素类含量的分析 一、水溶性维生素类的测定一、水溶性维生素类的测定（一）理化性质（一）理化性质 水溶性维生素都易溶于水，不溶于苯、乙醚、水溶性维生素都易溶于水，不溶于苯、乙醚、氯仿等大多数有机溶剂在酸性介质中很稳定，氯仿等大多数有机溶剂在酸性介质中很稳定，加热也不破坏；但在碱性介质中不稳定，易于分加热也不破坏；但在碱性介质中不稳定，易于分解，特别在加热情况下，可大部或全部破坏它解，特别在加热情况下，可大部或全部破坏它们易受空气、光、热、酶、金属离子等的影响，们易受空气、光、热、酶、金属离子等的影响，如维生素如维生素C C对氧、铜离子敏感，易被氧化对氧、铜离子敏感，易被氧化 所以测定水溶性维生素一般都在酸性溶液中所以测定水溶性维生素一般都在酸性溶液中进行前处理进行前处理 （二）维生素（二）维生素B B族的测定族的测定 维生素维生素B B1 1、、B B2 2通常采用稀盐酸水解，或再经通常采用稀盐酸水解，或再经淀粉酶、木瓜蛋白酶酶解，使结合态维生素游离淀粉酶、木瓜蛋白酶酶解，使结合态维生素游离出来，再进行提取。
为了去除杂质，可用活性人出来，再进行提取为了去除杂质，可用活性人造浮石、硅镁吸附剂等进行纯化处理造浮石、硅镁吸附剂等进行纯化处理 1 1、维生素、维生素B1B1的测定的测定 （（1 1）硫色素荧光法：国标法硫色素荧光法：国标法 ①①原理：硫胺素在碱性铁氰化钾溶液中能被氧化原理：硫胺素在碱性铁氰化钾溶液中能被氧化成一种强蓝色荧光物质成一种强蓝色荧光物质——噻嘧色素（硫色素）噻嘧色素（硫色素）硫色素在紫外线照射下，发出荧光，其强度与硫硫色素在紫外线照射下，发出荧光，其强度与硫色素浓度成正比，也即与溶液中硫胺素含量成正色素浓度成正比，也即与溶液中硫胺素含量成正比 激发波长激发波长365nm365nm；发射波长；发射波长435nm435nm ②②样品提取：对于一般样品、高蛋白样品、淀粉样品提取：对于一般样品、高蛋白样品、淀粉质样品处理方法不同，如样品中所含杂质较多，质样品处理方法不同，如样品中所含杂质较多，可用柱层析法处理，使硫胺素与杂质分离，然后可用柱层析法处理，使硫胺素与杂质分离，然后以所得溶液作测定以所得溶液作测定 操作过程：操作过程：试样匀浆或粉碎，称样于三角瓶中试样匀浆或粉碎，称样于三角瓶中————加稀盐酸，加稀盐酸，放入高压锅中加热水解放入高压锅中加热水解————加淀粉酶、蛋白酶酶加淀粉酶、蛋白酶酶解，过滤得提取液解，过滤得提取液————将提取液加入已准备好的将提取液加入已准备好的盐基交换柱中，过柱盐基交换柱中，过柱————热蒸馏水冲洗交换柱，热蒸馏水冲洗交换柱，去杂质去杂质————热酸性氯化钾过柱，收集滤液，即为热酸性氯化钾过柱，收集滤液，即为试样净化液试样净化液————净化液分别加入净化液分别加入A A、、B B两个反应瓶两个反应瓶————避光，避光，A A瓶中加入氢氧化钠溶液，瓶中加入氢氧化钠溶液，B B瓶中加入瓶中加入碱性铁氰化钾溶液，振摇碱性铁氰化钾溶液，振摇15s——15s——加加10mL10mL正丁醇，正丁醇，同时振摇，静置分层同时振摇，静置分层————吸去下层碱性溶液，加吸去下层碱性溶液，加无水硫酸钠使溶液脱水无水硫酸钠使溶液脱水————上机测定。
上机测定 （（2 2）高效液相色谱法）高效液相色谱法待测样品待测样品 色谱方式色谱方式 检检 测测 器器肉及肉制品肉及肉制品 正相液相色谱正相液相色谱 荧光检测器荧光检测器米粉米粉 反相键合相色谱反相键合相色谱 柱后衍生化后柱后衍生化后 荧光检测器荧光检测器食品食品 离子交换色谱离子交换色谱 紫外检测器紫外检测器米及米制品米及米制品 反相离子对色谱反相离子对色谱 紫紫外检测器外检测器 GB\GBT5009.84-2003 食品中硫胺素(维生素B1)的测定.pdf 2 2、维生素、维生素B2B2的测定的测定 国标第一法为荧光法，第二法为微生物法。
国标第一法为荧光法，第二法为微生物法 （（1 1）荧光分光光度法）荧光分光光度法 原理：样品经酸解、酶解处理使核黄素游离出来，原理：样品经酸解、酶解处理使核黄素游离出来，用高锰酸钾和过氧化氢氧化杂质，再经硅镁吸附剂进行用高锰酸钾和过氧化氢氧化杂质，再经硅镁吸附剂进行柱层析，吸附提取核黄素，最后用洗脱液柱层析，吸附提取核黄素，最后用洗脱液————丙酮＋冰丙酮＋冰乙酸＋水洗脱并收集核黄素乙酸＋水洗脱并收集核黄素V VB2B2水溶液呈黄绿色荧光，水溶液呈黄绿色荧光，在在440nm440nm的激发波长，的激发波长，525nm525nm发射波长处可产生最大荧发射波长处可产生最大荧光强度 测定谷物中测定谷物中V VB2B2时最好在样品酸解后，加入一定量的时最好在样品酸解后，加入一定量的淀粉酶，在淀粉酶，在3535～～4040℃℃酶解酶解1515小时左右，这样有利于结合小时左右，这样有利于结合型的型的V VB2B2转化成游离型的转化成游离型的V VB2B2 （（2 2）高效液相色谱法）高效液相色谱法待测样品待测样品 色谱方式色谱方式 检检 测测 器器食品食品 反相键合相色谱反相键合相色谱 荧光检测器荧光检测器肉及肉制品肉及肉制品 正相液相色谱正相液相色谱 荧荧光检测器光检测器蛋及奶制品蛋及奶制品 反相键合相色谱反相键合相色谱 紫紫外检测器外检测器米及米制品米及米制品 反相离子对色谱反相离子对色谱 紫紫外检测器外检测器 3 3、维生素、维生素B5B5的测定的测定 国标方法为微生物法。
国标方法为微生物法 （（1 1）溴化氰比色法）溴化氰比色法 V VB5B5与溴化氰结合后可与对氨基苯乙酮（或其它芳与溴化氰结合后可与对氨基苯乙酮（或其它芳香族胺）作用生成黄色化合物，因而可在香族胺）作用生成黄色化合物，因而可在420nm420nm波长处波长处测定光密度，求出测定光密度，求出V VB5B5的含量 （（2 2）气相色谱法）气相色谱法 烟酸分子具有羟基，不溶于有机溶剂，不能直接用烟酸分子具有羟基，不溶于有机溶剂，不能直接用气相色谱法进行测定，但烟酸经酯化转变成烟酸乙酯或气相色谱法进行测定，但烟酸经酯化转变成烟酸乙酯或N—2N—2基烟酰胺之后，可以用气相色谱法进行分离测定基烟酰胺之后，可以用气相色谱法进行分离测定 （（3 3）高效液相色谱法）高效液相色谱法 利用酸水解法提取利用酸水解法提取V VB5B5，经高效液相色谱分离，测定经高效液相色谱分离，测定 4 4、维生素、维生素B6B6的测定的测定 国标法为微生物法。
国标法为微生物法 （（1 1）荧光分析法）荧光分析法 样品经硫酸加压水解，采用样品经硫酸加压水解，采用CGSCGS树脂的柱树脂的柱层析分离，以氯化钾的磷酸缓冲液洗脱洗脱液层析分离，以氯化钾的磷酸缓冲液洗脱洗脱液在二氧化锰和乙醛酸钠溶液存在下，可使在二氧化锰和乙醛酸钠溶液存在下，可使V VB6B6的的混合物即吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺一次转化为吡混合物即吡哆醇、吡哆醛、吡哆胺一次转化为吡哆醛吡哆醛在氰化钾作用下生成强荧光物质哆醛吡哆醛在氰化钾作用下生成强荧光物质——吡哆醛氰醇衍生物在激发波长吡哆醛氰醇衍生物在激发波长355nm355nm，发射波，发射波长长434nm434nm处，测定其荧光强度，就可计算出样品处，测定其荧光强度，就可计算出样品中中V VB6B6的含量 （（2 2）气相色谱法）气相色谱法 V VB6B6与七氟丁基咪唑反应可生成挥发性的衍与七氟丁基咪唑反应可生成挥发性的衍生物，该衍生物在气相色谱中可以很好地分离生物，该衍生物在气相色谱中可以很好地分离最低检出限最低检出限10ng10ng气相色谱条件：电子捕获检测器；气相色谱条件：电子捕获检测器；3%SE—523%SE—52，，固定相固定相Chromosorb W—HPOChromosorb W—HPO （（3 3）液相色谱法）液相色谱法 样品水解后上机测定。
样品水解后上机测定 C C1818柱柱荧光检测器：激发波长荧光检测器：激发波长290nm290nm，发射波长，发射波长395nm395nm 5 5、维生素、维生素B12B12的测定的测定 （（1 1）比色法）比色法 样品用浓硫酸和高氯酸钾消化后，样品中的样品用浓硫酸和高氯酸钾消化后，样品中的钴与钴与M—α—M—α—吡啶联腙生成钴的红色化合物，可吡啶联腙生成钴的红色化合物，可以进行比色测定，再从钴的含量换算成以进行比色测定，再从钴的含量换算成V VB12B12的含的含量注意：样品中存在游离钴离子将使测定结果偏高，注意：样品中存在游离钴离子将使测定结果偏高，可以预先用可以预先用8—8—羟基奎宁羟基奎宁——氯仿溶液提取，分离氯仿溶液提取，分离除去 （（2 2）原子吸收分光光度法）原子吸收分光光度法 维生素维生素B12B12的分子中含有钴离子，占的分子中含有钴离子，占V VB12B12的的4.35%4.35%，采用原子吸收分光光度法可以测定其钴，采用原子吸收分光光度法可以测定其钴含量，再换算成含量，再换算成V VB12B12的含量。
的含量 样品预处理：样品预处理： 样品用样品用V VB12B12提取液（无水磷酸氢二钠＋柠檬提取液（无水磷酸氢二钠＋柠檬酸＋无水焦亚硫酸钠加水至酸＋无水焦亚硫酸钠加水至100ml100ml）提取，滤液）提取，滤液中加入中加入EDTAEDTA，用氨水调，用氨水调pHpH至至7 7，再加入活性炭，，再加入活性炭，振摇，用无灰滤纸过滤，振摇，用无灰滤纸过滤，V VB12B12被吸附在活性炭上，被吸附在活性炭上，将活性炭连同滤纸一起在将活性炭连同滤纸一起在600600℃℃下灰化完全，用下灰化完全，用硝酸将残渣溶解，以原子吸收分光光度法测定钴硝酸将残渣溶解，以原子吸收分光光度法测定钴的含量 从钴换算为从钴换算为V VB12B12的换算系数的换算系数 GB\GBT 5009.217-2008 保健食品中维生素B12的测定.pdf GB\GBT 5009.210-2008 食品中泛酸的测定.pdf GB\GBT 5009.211-2008 食品中叶酸的测定.pdf 文章\高效液相色谱法测定蔬菜中B族维生素.pdf （三）维生素（三）维生素C C的测定的测定 在食品中在食品中VCVC有三种存在形式：有三种存在形式：还原型抗坏血酸（－还原型抗坏血酸（－2H2H，氧化）脱氢型抗坏血酸，氧化）脱氢型抗坏血酸 二酮古洛糖酸。
二酮古洛糖酸 1 1、提取方法、提取方法 食品中的维生素食品中的维生素C C通常采用草酸、草酸－醋酸、偏通常采用草酸、草酸－醋酸、偏磷酸－醋酸溶液直接提取在一定浓度的酸性介质中，磷酸－醋酸溶液直接提取在一定浓度的酸性介质中，可以消除某些还原性杂质对维生素可以消除某些还原性杂质对维生素C C的破坏作用草酸对的破坏作用草酸对维生素维生素C C有很好的稳定性能；偏磷酸能沉淀蛋白质，澄清有很好的稳定性能；偏磷酸能沉淀蛋白质，澄清提取液，适合于蛋白质含量较高的样品提取液，适合于蛋白质含量较高的样品 2 2、还原型抗坏血酸的测定、还原型抗坏血酸的测定 （（1 1）分光光度法）分光光度法 在乙酸溶液中，抗坏血酸与固蓝盐在乙酸溶液中，抗坏血酸与固蓝盐B B反应生反应生成黄色的草酰肼成黄色的草酰肼-2--2-羟基丁酰内酯衍生物在最大羟基丁酰内酯衍生物在最大吸收波长吸收波长420nm420nm处测定吸光度，与标准系列比较处测定吸光度，与标准系列比较定量 非蛋白性样品在乙酸溶液中提取，过滤后上非蛋白性样品在乙酸溶液中提取，过滤后上清液供测定；蛋白性样品需再加入乙酸锌溶液和清液供测定；蛋白性样品需再加入乙酸锌溶液和亚铁氰化钾溶液，沉淀蛋白质。
亚铁氰化钾溶液，沉淀蛋白质 （（2 2））2,6—2,6—二氯靛酚滴定法二氯靛酚滴定法 还原型抗坏血酸可以还原染料还原型抗坏血酸可以还原染料2,6—2,6—二氯靛二氯靛酚该染料在酸性溶液中呈粉红色，被还原后成酚该染料在酸性溶液中呈粉红色，被还原后成无色溶液在终点时，过量的未被还原的染料在无色溶液在终点时，过量的未被还原的染料在酸性溶液中呈粉红色，因此，在滴定过程中当溶酸性溶液中呈粉红色，因此，在滴定过程中当溶液从无色转变成微红色时，表示还原型抗坏血酸液从无色转变成微红色时，表示还原型抗坏血酸全部被氧化为脱氢抗坏血酸，此时即为滴定终点全部被氧化为脱氢抗坏血酸，此时即为滴定终点 3 3、总抗坏血酸的测定、总抗坏血酸的测定 （（1 1））荧光法：荧光法： 国标第一法国标第一法 样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢样品中还原型抗坏血酸经活性炭氧化为脱氢抗坏血酸后，与邻苯二胺（抗坏血酸后，与邻苯二胺（OPDAOPDA）反应生成有）反应生成有荧光的喹喔啉衍生物，其荧光强度与脱氢抗坏血荧光的喹喔啉衍生物，其荧光强度与脱氢抗坏血酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食品中酸的浓度在一定条件下成正比，以此测定食品中抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量。
抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总量 激发光波长激发光波长338nm338nm，发射波长，发射波长420nm420nm 当食物中含有丙酮酸时，也与邻苯二胺反应当食物中含有丙酮酸时，也与邻苯二胺反应生成一种荧光物质，干扰测定这时加入硼酸生成一种荧光物质，干扰测定这时加入硼酸硼酸与脱氢抗坏血酸结合生成硼酸脱氢抗坏血酸硼酸与脱氢抗坏血酸结合生成硼酸脱氢抗坏血酸螯合物，此螯合物不能与邻苯二胺反应生成荧光螯合物，此螯合物不能与邻苯二胺反应生成荧光物质；而硼酸不与丙酮酸反应，丙酮酸仍可发生物质；而硼酸不与丙酮酸反应，丙酮酸仍可发生上述反应因此，加入硼酸后测出的荧光值即为上述反应因此，加入硼酸后测出的荧光值即为空白的荧光值空白的荧光值 注意事项：注意事项： 试样用偏磷酸试样用偏磷酸- -乙酸溶液提取；乙酸溶液提取； 活性炭加入量要适量，量过多，对抗坏血酸活性炭加入量要适量，量过多，对抗坏血酸有吸附作用，使结果偏低；有吸附作用，使结果偏低； 空白氧化液中加入硼酸溶液后需在空白氧化液中加入硼酸溶液后需在4 4 ℃℃冰箱冰箱中放置中放置2-3h2-3h，使反应完全，否则本底偏高。
使反应完全，否则本底偏高 （（2 2））2,4—2,4—二硝基苯肼比色法：二硝基苯肼比色法： 国标第二法国标第二法 样品中样品中V VC C用草酸提取，活性炭使提取液中用草酸提取，活性炭使提取液中还原型抗坏血酸氧化成为脱氢抗坏血酸，然后与还原型抗坏血酸氧化成为脱氢抗坏血酸，然后与2,4—2,4—二硝基苯肼作用生成红色的脎在二硝基苯肼作用生成红色的脎在8585％硫％硫酸溶液的脱水作用下，可转变为桔红色的无水化酸溶液的脱水作用下，可转变为桔红色的无水化合物合物——双双-2,4-2,4二硝基苯最大吸收波长二硝基苯最大吸收波长500nm500nm，，吸光度与总抗坏血酸的总量成正比，进行定量分吸光度与总抗坏血酸的总量成正比，进行定量分析 文章\猕猴桃中维生素C的高效液相色谱分析.pdf 二、脂溶性维生素类的分析测定二、脂溶性维生素类的分析测定（一）理化性质（一）理化性质 1 1、溶解性：不溶于水，易溶于脂肪、乙醇、、溶解性：不溶于水，易溶于脂肪、乙醇、丙酮、氯仿、乙醚、苯等有机溶剂。
丙酮、氯仿、乙醚、苯等有机溶剂 2 2、耐酸碱性：维生素、耐酸碱性：维生素A A、、D D对酸不稳定，对酸不稳定，VEVE对酸稳定对酸稳定VAVA、、D D对碱稳定，对碱稳定，VEVE对碱不稳定，对碱不稳定，但在抗氧化剂存在下也能经受碱的煮沸但在抗氧化剂存在下也能经受碱的煮沸 3 3、耐热性、耐氧化性：、耐热性、耐氧化性：VAVA、、D D、、E E耐热性耐热性好；好；VAVA、、E E易氧化，光、热能促进氧化；易氧化，光、热能促进氧化；VDVD不易不易被氧化 根据上述性质，测定脂溶性维生素时，通常根据上述性质，测定脂溶性维生素时，通常先用皂化法处理样品，水洗去除类脂物然后用先用皂化法处理样品，水洗去除类脂物然后用有机溶剂提取脂溶性维生素（不皂化物），浓缩有机溶剂提取脂溶性维生素（不皂化物），浓缩后溶于适当的溶剂中测定为了防止氧化，常加后溶于适当的溶剂中测定为了防止氧化，常加入抗氧化剂对于入抗氧化剂对于A A、、D D、、E E共存的样品，或杂质共存的样品，或杂质含量高的样品，在皂化提取后，还需进行层析分含量高的样品，在皂化提取后，还需进行层析分离。
离 操作在避光条件下进行操作在避光条件下进行 （二）维生素（二）维生素A A的测定的测定 1 1、比色法、比色法 国标第二法国标第二法 维生素维生素A A在三氯甲烷中与三氯化锑作用，生在三氯甲烷中与三氯化锑作用，生成蓝色化合物，在波长成蓝色化合物，在波长620nm620nm处有特异吸收处有特异吸收 适用于维生素适用于维生素A A含量较高的样品含量较高的样品 该法的主要缺点是生成的蓝色络合物的稳定该法的主要缺点是生成的蓝色络合物的稳定性差，比色测定必须在性差，比色测定必须在6s6s内完成，否则蓝色会迅内完成，否则蓝色会迅速消退，造成极大误差速消退，造成极大误差 2 2、高效液相色谱法、高效液相色谱法 国标第一法国标第一法 （（1 1）原理：）原理： 试样中的维生素试样中的维生素A A及维生素及维生素E E经皂化提取处经皂化提取处理后，将其从不可皂化部分提取至有机溶剂中。
理后，将其从不可皂化部分提取至有机溶剂中用高效液相色谱用高效液相色谱C C1818反相柱将维生素反相柱将维生素A A及维生素及维生素E E分离，经紫外检测器检测，并用内标法定量测定分离，经紫外检测器检测，并用内标法定量测定 内标物：苯并内标物：苯并[e][e]芘标准液芘标准液 流动相：甲醇＋水（流动相：甲醇＋水（9898＋＋2 2）） 紫外检测器：波长紫外检测器：波长300nm300nm （（2 2）样品处理：）样品处理： ①①皂化：准确称样于皂化瓶中皂化：准确称样于皂化瓶中————加无水乙加无水乙醇，搅匀醇，搅匀————加抗坏血酸（抗氧化剂），加苯并加抗坏血酸（抗氧化剂），加苯并[e][e]芘标准液（内标物）芘标准液（内标物）————加氢氧化钾（加氢氧化钾（1 1＋＋1 1））————于沸水浴回流于沸水浴回流30min30min，使皂化完全，使皂化完全————立立即放入冰水中冷却即放入冰水中冷却 ②②提取：皂化物移入分液漏斗提取：皂化物移入分液漏斗————加乙醚提加乙醚提取取————弃去水层。
弃去水层 ③③洗涤：用水洗乙醚层，至水层不显碱性洗涤：用水洗乙醚层，至水层不显碱性 ④④浓缩：将乙醚提取液脱水（经无水硫酸钠浓缩：将乙醚提取液脱水（经无水硫酸钠过滤）后移入旋转蒸发器的球形蒸发瓶中过滤）后移入旋转蒸发器的球形蒸发瓶中——55 ——55 ℃℃水浴中减压蒸馏水浴中减压蒸馏————蒸发瓶中剩余蒸发瓶中剩余2mL2mL乙醚时，乙醚时，取下蒸发瓶，用氮气吹干取下蒸发瓶，用氮气吹干————加乙醇溶解提取物加乙醇溶解提取物————离心，上清液供色谱分析离心，上清液供色谱分析 （三）维生素（三）维生素E E的测定的测定 1 1、比色法、比色法 维生素维生素E E与与FeClFeCl3 3反应，反应，FeFe3+3+被还原成被还原成FeFe2+2+，，FeFe2+2+可与可与 ——联氮苯发生颜色反应，联氮苯发生颜色反应，呈红色，因此在呈红色，因此在520nm520nm处测定吸光度，可定量测处测定吸光度，可定量测定样品中定样品中V VE E的含量。
的含量 2 2、、GCGC法法 3 3、、HPLCHPLC法法 维生素维生素E E测定的测定的GCGC分析条件分析条件化合物化合物 检测器检测器 固定相固定相 检测波长检测波长 内标物内标物α—α—生育酚生育酚 FID SE—30 275nm FID SE—30 275nm 十六烷基十六烷基 棕榈酸酯棕榈酸酯α—α—β—β—生育酚生育酚γ—γ—δ— FID DB—5 300nm δ— FID DB—5 300nm 胆甾烷胆甾烷胆固醇胆固醇 （程序升温，（程序升温，260260℃℃ 300300℃℃）） （四）（四）β—β—胡萝卜素的测定胡萝卜素的测定 1 1、高效液相色谱法、高效液相色谱法 国标第一法。
国标第一法 试样中的试样中的β—β—胡萝卜素，用石油醚胡萝卜素，用石油醚- -丙酮（丙酮（8080＋＋2020）混合液提取，提取液于旋转蒸发器上蒸发）混合液提取，提取液于旋转蒸发器上蒸发至干，残渣用少量石油醚溶解，然后经三氧化二至干，残渣用少量石油醚溶解，然后经三氧化二铝柱纯化，收集洗脱液，用微孔滤膜过滤，滤液铝柱纯化，收集洗脱液，用微孔滤膜过滤，滤液用用C C1818反相柱进行反相柱进行HPLCHPLC分析 流动相：甲醇＋乙腈（流动相：甲醇＋乙腈（9090＋＋1010）） 紫外检测器：波长紫外检测器：波长448nm448nm 2 2、纸层析法、纸层析法 国标第二法国标第二法 试样经过皂化后，用石油醚提取食品中的胡试样经过皂化后，用石油醚提取食品中的胡萝卜素及其他植物色素，以石油醚为展开剂进行萝卜素及其他植物色素，以石油醚为展开剂进行纸层析，胡萝卜素极性最小，移动速度最快，从纸层析，胡萝卜素极性最小，移动速度最快，从而与其他色素分离，剪下含胡萝卜素的区带，洗而与其他色素分离，剪下含胡萝卜素的区带，洗脱后于脱后于450nm450nm波长下定量测定。
波长下定量测定 （六）维生素 （六）维生素K K的测定的测定 维生素 维生素K K易分解，因此提取样品中的易分解，因此提取样品中的V VK K不采不采用皂化方法，而采用有机溶剂直接提取一般植用皂化方法，而采用有机溶剂直接提取一般植物样品经干燥后，将其置于有机溶剂如乙醚、丙物样品经干燥后，将其置于有机溶剂如乙醚、丙酮、石油醚中剧烈振摇，把酮、石油醚中剧烈振摇，把V VK K抽提出来动物组抽提出来动物组织样品也要预先干燥，再用有机溶剂抽提织样品也要预先干燥，再用有机溶剂抽提 GCGC法主要用于法主要用于V VK3K3的测定 目前测定目前测定V VK1K1的常用方法为的常用方法为HPLCHPLC法。