拐枣总黄酮的提取与测定摘要［目的］研究枳椇果、枳椇子中黄酮提取与测定的最佳方法，并对它 们中的含量作一个比较通过单一变量试验，研究枳椇果、枳椇子中黄酮提取的 最佳条件［方法］以干燥的枳椇果、枳椇子为材料，将其粉碎，经过 40 目筛， 再将其干燥，彻底去除水分后，用索氏提取器，先装入乙醚，进行脱脂，一段时 间后，将乙醚倒掉，再装入乙醇，提取其中的黄酮研究乙醇浓度、提取时间和 提取温度对黄酮提取量的影响；用芦丁绘制标准曲线，用紫外-可见分光光度计 测定提取液中的黄酮含量［结果］当乙醇浓度为70%、提取温度为95°C、提取时 间为 4h 时，黄酮提取量最高；［结论］枳椇子中的黄酮含量比枳椇果中多，枳椇 子、枳椇果黄酮提取的最佳条件为：用70%乙醇在95C条件下提取4h关键词 拐枣 枳椇果 枳椇子 黄酮 测定前言黄酮类化合物是一类重要的天然有机化合物，是植物长期自然选择过程中产 生的一类次生代谢产物它在植物的根、茎、叶、花、果实中广泛存在，且因为 它存在于不同植物中、在同一植物的不同器官中构型也复杂多样，所以它具有较 高的生物活性和理化作用作用也非常多，例如它可以止渴、解酒、抗疲劳，有 的黄酮在疾病治疗上发挥了巨大的作用：它可以抗癌、抗病毒、抗肿瘤、抗糖尿 病、抗抑郁、抗骨质疏松等。
文献中前人对荷叶、女贞子、大青枣叶、麦冬等植 物中的黄酮类化合物的作用、提取、测定作了详细研究，但是有关于拐枣的研究 报导比较少，目前文献中只介绍了枳椇子中的黄酮提取，对枳椇果中的黄酮类化 合物研究很少拐枣又名枳椇、金钩子、鸡距子、金钩钩，鼠李科(Rhamnactae),枳椇属， 落叶乔木，高达10米多；《本草纲目》中记载“枳椇木高三四丈，叶圆大如桑拓， 夏月开花，枝头结实，如鸡爪形，长寸许，扭曲，开作二三歧俨若鸡之足距， 嫩时青色，经霜乃黄，嚼之味甘如蜜［1］主要分布陕西、江西、安徽、浙江、 广东、福建、湖北、湖南、广西、四川、贵州、云南等省 本实验的目的与意义：拐枣在陕西分布也比较多，但长期以来除了鲜食和榨汁外， 并没有对其进行相关的深加工、开发以提高其附加值，造成资源利用率低，浪费严重本文对陕南山区旬阳县新森林生态农业有限公司提供的拐枣总 黄酮提取条件进行了初步研究，并对它们中的不同器官的含量作一个比较，通过 对枳椇果中黄酮提取单一变量，确定拐枣中黄酮的最佳提取工艺通过本实验的 主要研究用索氏提取器从拐枣、枳椇子中提取黄酮的方法和工艺，用分光光度计 测定其含量，并通过单因素试验，分析得出黄酮提取的最佳工艺，以便为陕西拐 枣中黄酮的综合开发利用提供依据，为进一步开发利用创造出更大的经济效益和 提供科学依据。
Extraction and determination of total flavonoids in hovenia acerbaAbstract [Objective] The aim was to study the optimum method on the extraction and determination of flavonoids from hovenia dulcis Thunb fruit and hovenia dulcis thumb and did a comparison of the content. Through a single variable experiments,the optimal extraction conditions of Flavonoids from hovenia duleis Thunb fruit,hovenia dulcis Thumb.[method] with dry hovenia dulcis Thunb fruit hovenia dulcis thunb as the material,the crushing,through 40 mesh sieve,thendrying,thoroughly removemoisture,by using Soxhlet extractor,first into the ether,degreasing,after a period of time,will fall again into the ether,ethanol,extract the flavoooids .the effects of ethanol conch,extracting time and extracting temperature on extraction amount of flavoooids were studied.After drew the standard curve with the rutin standard solution.Flavonoids content of extract was determined by UV-visible spectrophotometry.[results] When the ethanol was 70％，the extracting temperature was 95 °C and extracting time was 4h,the extraction amount of flavonoids was the highest. [conclusion] Flavonoids extraction of hovenia dulcis thunb is more than the hovenia dulcis Thunb fruit,the eoptimum extracting condition for flavonoids from hovenia dulcis Thunb fruit and hovenia dulcis thumb was that using ethanol to extract flavonoids for 4 h at 95C.Key words Hovenia acerba hovenia dulcis Thunb fruit hovenia dulcis thumb Flavonoids determination1拐枣、枳椇子的成分简介拐枣，鼠李科(Rhamnactae)，枳椇属，学名：Hoveniaacerba lindl,木本 植物，落叶乔木。
拐枣是一种营养价值很高的植物它含有蔗糖 24％、葡糖糖 9.5％、果糖 7.92％因为拐枣糖含量比较高，所以吃起来非常甜，口感特别好 因而有“鸡爪梨”、“甜半夜”之美称除了含有糖类之外，拐枣中还含有铁、磷、 钙、铜、锰、锌等微量元素， 18 种人体必须氨基酸据有关研究统计，每 100 克拐枣中含有 74 毫克脂肪， 3.07毫克粗蛋白，总酸为345.8 毫克，含有维生素 C16.29 毫克［2］拐枣果上还有种子，枳椇子10〜11月果实成熟时采收，晒干，除去果壳、 果柄等杂质，收集种子它呈扁圆形，直径3〜5.5mm，厚1.5〜2.5mm表面棕 红色、棕黑色或绿棕色，有光泽，平滑或可见散在的小凹点，顶端有微凸的合点， 基部凹陷处有点状种脐，背面稍隆起，腹面有一条纵行隆起的种脊种皮坚硬， 不易破碎，胚乳乳白色，子叶淡黄色，肥厚，均富油性气微，味微涩枳椇子 的主要成分的质量分数为：粗蛋白 15.79％、粗纤维 53.45％、碳水化合物 10.95％、灰分2.08％、粗脂肪8.03％枳椇子中蛋白质氨基酸种类有 17种， 其中必须氨基酸占 29.1％金属元素中常量元素有钾、镁、钙、钠，微量元素 有铁、锰、铜、锌，还含有大量的苹果酸、草酸、乙酸等。
其中，葡萄糖、钙的 含量较其他水果要高枳椇子匀浆液有抗脂质过氧化作用和增强耐寒和耐热功能 ［3］枳椇果、枳椇子中除含有营养成分外，还含有黄酮类化合物黄酮类化合物 具有止渴、解烦、解酒等功效1.1 黄酮的特性及作用1.1.1 黄酮的特性黄酮类化合物(Flavonoids)是一类存在于自然界的、具有2-苯基色原酮 (flavone)结构的化合物它们分子中有一个酮式羰基，第一位上的氧原子具 碱性，能与强酸成盐，其羟基衍生物多具黄色，故又称黄碱素或黄酮黄酮类化 合物在植物体中通常与糖结合成苷类，小部分以游离态(苷元)的形式存在；黄 酮类化合物也是一类重要的天然有机化合物，是植物在长期自然选择过程中产生 的一类次生代谢产物它广泛存在与高等植物及羊齿植物的根、茎、叶、花、果 实等中［4］，一般多以苷的形式存在黄酮不仅在植物中的数量种类繁多，而且结 构类型复杂多样拐枣、枳椇子中也含有黄酮1.1.2黄酮的作用 黄酮类化合物因其独特的化学结构而对哺乳动物和其它类型的细胞具有许多重 要的生理、生化作用一方面黄酮类化合物具有高度的化学反应性，例如，它能 清除生物体内的自由基，具有抗氧化作用［5］；另一方面，黄酮类化合物又具有很多重要的药理作用，对许多人类疾病具有治疗价值。
例如它拥有抑制酶 的活性、抗癌、抗菌、抗病毒、抗炎症、抗过敏、抗糖尿病并发症等功能，且无 毒无害，对人类的肿瘤、衰老、心血管病等退变性疾病的治疗和预防有重要意义， 它作为弱雌激素，在治疗妇女更年期综合症方面有很好的应用前景此外，黄酮 类化合物还是茶及众多中草药如黄芩、银杏、沙棘等的活性成分因此，引起了 国内外化学家、药物学家的广泛重视，研究进展很快［6］1.2 黄酮的提取工艺研究进展1.2.1 水提法水提法仅限于提取黄酮苷类物质,其中加水量、浸泡时间、煎煮时间及煎煮 次数等因素都会影响黄酮苷类物质的提取量水提法的步骤为：先将物质晾干， 然后加水浸泡一定的时间后，用大火煮沸一定的时间，文火再闷蒸一段时间，待 稍冷倾出上层黄绿液，蒸发、萃取、过滤即得不同的物质浸泡时间、煮沸时间 和闷蒸时间不同此工艺成本低、安全,适合工业化大生产,但是用水提取时,提 取液中杂质较多（如无机盐、蛋白质、糖等）,给进一步分离带来许多麻烦现在, 已经很少单一使用本法1.2.2 碱性水或碱性稀醇提取法碱性水或碱性稀醇提取法的原理是：黄酮类物质大多具有酚羟基，用碱性 水或碱性稀醇可以将其浸出，经酸化后得到黄酮类物质经常用的碱性溶液为 稀氢氧化钠和石灰水。
两种溶液各有利弊用氢氧化钠时，它的浸出能力高， 但是同时它会把其他物质也浸出，在后期处理的时候比较困难用石灰水的时 候，它的浸出能力相对氢氧化钠比较弱，同时有些黄酮类化合物能与钙结合成 不溶性物质,不被溶出但是浸出的杂质相对来说较少因为它含有钙离子， 所以有利于后期纯化一般可以根据不同的原料使用不同的碱性溶液1.2.3 溶剂提取法溶剂提取法是根据相似相溶原理，利用原料中各成分极性的不同，选用对 活性成分溶解度大，对不需要溶出成分溶解度小的溶剂，而将有效成分从原料 组织内溶解出来的方法黄酮类化合物可溶于水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯等极 性溶剂，不溶于乙醚、氯仿等极性较小的溶剂，传统的溶剂提取包括热水和有 机溶剂，但热水提取法的选择性较差，产物得率及纯度较低，而且由于温度较 高，黄酮类化合物在提取过程中可能会发生降解，因此选用有机溶剂或有机溶 剂-水的混合液进行提取的较多常用溶剂提取法有浸渍法、渗漉法、煎煮法、 回流提取法及连续回流提取法等溶剂提取法普遍存在产物及纯度低、有效成 分易分解、用时较长、效率较低问题［7］ 在有机溶剂提取法中最常使用的溶剂是乙醇即醇提法在提取过程中,乙醇的浓度对总黄酮的提取有较大影响,一般认为乙醇的浓度增高有利于总黄酮 的提取。
但并不绝对,还跟黄酮类物质的结构有关,高浓度乙醇适于提取黄酮苷元 类,低浓度乙醇适于提取黄酮苷类1.2.4 微波法微波提取是近年来发展起来的新技术，在人们的生产生活中应用也越来越广 泛,此法在黄酮类物质的提取上也取得了。