食用菌多糖的提取方法有水提法、碱提法和酶提法等，其中酶提法是利用酶对细胞结 构的破坏作用，使存在于细胞内部的多糖释放出来，从而提高了多糖的得率本次实验采用纤维素酶和果胶酶对紫蘑菇进行水解，研究香菇多糖的最佳提取工艺，并 探讨蘑菇粒度、蘑菇溶解方法以及酶法提取中多糖提取效果的评价方法可以同步做三组对比试验：⑴采用水提，不加酶；⑵采用酶法提取；⑶采用酶空白（只 加酶，不加蘑菇粉）由于酶中也含有少量的糖类成分，其存在将会对蘑菇多糖的提取产生影响因此，在计 算酶法提取多糖的效果时，要减去酶本身所引入的糖在确定最佳酶浓度时更要考虑一、 实验流程：蘑菇干燥f粉碎过筛f加水浸泡0.5h-调PH-加入纤维素 酶f提取f离心过滤f测多糖提取率提取率= —xlOO%m式中： n 一提取液稀释倍数；C 一提取液中多糖的浓度（mg/mL）；V 一提取液体积（mL）；m 一蘑菇的质量（mg）测定时取三个平行样，结果数据为平行样的平均数值二、 具体实验步骤：1、多糖标准曲线的绘制精密称取105 °C干燥恒重的葡萄糖标准品100mg,置于100 mL容量瓶中，加蒸 馏水至刻度,摇匀精密吸取0.4、0.8、1.2、1.6、2.0、2.4、2.8 mL分别置于50 mL 容量瓶中，加蒸馏水至刻度，摇匀。
精密吸取上述各种溶液2.0 mL,分别加入5%苯 酚溶液1.0 mL,摇匀，迅速加入5.0 mL浓硫酸，振摇5min,置沸水浴上加热15 min, 然后置冷水浴中冷却30 min,随行空白，在490 nm波长处测定吸光度以标准溶液 浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标绘制标准曲线，并计算其标准曲线回归方程1） 精密度试验:精密吸取1.0 ml供试液按“标准曲线的制备”项下操作， 分别测定吸光度，求得RSD2） 重现性及多糖含量测定:精密称取巴西蘑菇多糖0.1000g，按“供试液 的配制”和“标准曲线的制备”项下操作，分别测定吸光度，求得多糖的平均含量，及 RSD 值2、单因素实验（1）水提法称取蘑菇粉末2g,加入适量水（最佳固液比为1:20）,在50°C水中浸泡lh升温至100C，提取2.5h将混合物离心、浓缩、乙醇沉淀，计算多糖提取率和纯度单因素选择范围提取温度（C）固液比（W/V）提取时间（h）701:161h801:181.5h901:202h1001:222.5h1:243h2）酶法提取称取蘑菇粉末2g,加入适量水（最佳固液比为1:20）,在50C水中浸泡lh 升温至90C,提取0.5h。
冷却至40C,加入酶浓度1%,提取液总体积为100ml, PH值5.0,酶解提取lh然后升温至90C提取lh灭酶将混合物离心、浓缩、 乙醇沉淀,计算多糖提取率和纯度单因素选择范围酶浓度％酶解温度CPH值酶解时间h0.25303.50.50.5354.010.75404.521.0455.031.25505.541.5556.0实验所需药品：纤维素酶,果胶酶,葡萄糖,苯酚,浓硫酸,乙醇器材：100ml容量瓶，50ml容量瓶。