histologyhistologyhistologyhistologyhistologyhistologyhistologyhistologyhistologyhistologyhistologyhistologyhistologyhistologyhistology第1章：组织学绪论基基础础学学院院组组织织学学与与胚胚胎胎学学教教研研室室崔运河崔运河 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 实验室：北实验教学楼三层东侧实验室：北实验教学楼三层东侧注意事项：注意事项：1.1.穿隔离衣穿隔离衣2.2.带实验报告册、红蓝铅笔和橡皮，绘图带实验报告册、红蓝铅笔和橡皮，绘图 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 目目 录录•组织学发展简史和当代组织学组织学发展简史和当代组织学 •组织学的学习方法组织学的学习方法 •组织学技术简介组织学技术简介 •组织学的内容和意义组织学的内容和意义 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 一、组织学的内容和意义一、组织学的内容和意义 概念概念概念概念：：组织学组织学组织学组织学(histology)(histology)：：研究机体研究机体研究机体研究机体微细结构微细结构及其及其及其及其相相相相关功能关功能关功能关功能的科学。
以显微镜观察组织切片为基本的科学以显微镜观察组织切片为基本的科学以显微镜观察组织切片为基本的科学以显微镜观察组织切片为基本方法，又称方法，又称方法，又称方法，又称显微解剖学显微解剖学 (microanatomy)(microanatomy)细胞细胞细胞细胞(cell)(cell)(cell)(cell)：机体结构和功能的基本单位，成：机体结构和功能的基本单位，成：机体结构和功能的基本单位，成：机体结构和功能的基本单位，成人约有人约有人约有人约有1x101x101x101x1015 15 15 15 个、个、个、个、200200200200 余种组织组织组织组织(tissue)(tissue)：：：：细胞群和细胞外基质细胞群和细胞外基质构成 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 一、组织学的内容和意义一、组织学的内容和意义 •组织类型组织类型组织类型组织类型：：上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织 四种组织以不同的种类、数量和方式组合形成四种组织以不同的种类、数量和方式组合形成器官器官（（organorgan）） 。
完成一个或几个生理活动完成一个或几个生理活动 若干功能相关的器官构成一个若干功能相关的器官构成一个系统系统（（systemsystem）） 并完成一个连续的的生理活动并完成一个连续的的生理活动 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 一、组织学的内容和意义一、组织学的内容和意义 •研究层次：研究层次：研究层次：研究层次：–光镜结构（常称为光镜结构（常称为光镜结构（常称为光镜结构（常称为显微结构显微结构显微结构显微结构））））–电镜结构（又称为电镜结构（又称为电镜结构（又称为电镜结构（又称为超微结构超微结构超微结构超微结构））））• 意意意意 义：义：义：义：是一门重要的医学基础课，属主干学科与是一门重要的医学基础课，属主干学科与是一门重要的医学基础课，属主干学科与是一门重要的医学基础课，属主干学科与解剖学、生理学、病理学及内科学、外科学解剖学、生理学、病理学及内科学、外科学解剖学、生理学、病理学及内科学、外科学解剖学、生理学、病理学及内科学、外科学等学科有密切关系等学科有密切关系等学科有密切关系等学科有密切关系。
Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 二、组织学发展简史和当代组织学二、组织学发展简史和当代组织学 •发展简史：发展简史：发展简史：发展简史：16651665年年英国人英国人HookeHooke首先利用显微镜发现细首先利用显微镜发现细胞胞(cell)(cell)随后意大利学者、荷兰学者又相继发现了精子、随后意大利学者、荷兰学者又相继发现了精子、红细胞、肌细胞、神经细胞等红细胞、肌细胞、神经细胞等18311831年年发现了细胞核，对细胞的结构有了初步发现了细胞核，对细胞的结构有了初步认识 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 18381838年年德国植物学家德国植物学家Schladen(Schladen(施来登施来登) )、、18391839年动物学家年动物学家SchwannSchwann（施万）（施万）分别发现植物和分别发现植物和动物都是由细胞组成的，细胞是植物和动物的动物都是由细胞组成的，细胞是植物和动物的结构、功能和发生的基本单位创立了结构、功能和发生的基本单位创立了“细胞细胞学说学说”。
二、组织学发展简史和当代组织学二、组织学发展简史和当代组织学 1919世纪后叶世纪后叶是组织学和细胞学发展的黄金时代，是组织学和细胞学发展的黄金时代，放大倍数较高的显微镜，切片机和各种染料的放大倍数较高的显微镜，切片机和各种染料的应用已能较为正确地描述细胞结构，使组织应用已能较为正确地描述细胞结构，使组织学发展为一门独立而系统的学科学发展为一门独立而系统的学科 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 二、组织学发展简史和当代组织学二、组织学发展简史和当代组织学 当代组织学：当代组织学：当代组织学：当代组织学：20202020世纪后期世纪后期世纪后期世纪后期，新仪器、新技术的发明和应用；，新仪器、新技术的发明和应用；，新仪器、新技术的发明和应用；，新仪器、新技术的发明和应用；免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学免疫组织化学技术、原位杂交技术将组织学引入分子水平；组织工程学技术拓展了组织学引入分子水平；组织工程学技术拓展了组织学引入分子水平；组织工程学技术拓展了组织学引入分子水平；组织工程学技术拓展了组织学的临床应用前景。
的临床应用前景的临床应用前景的临床应用前景 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 三、组织学的学习方法三、组织学的学习方法 •审视角度审视角度审视角度审视角度•平面与立体平面与立体平面与立体平面与立体•形态与功能形态与功能形态与功能形态与功能 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 审视角度审视角度审视角度审视角度组织水平组织水平：层次顺序、特征性结构和细胞：层次顺序、特征性结构和细胞细胞水平细胞水平：主要细胞的分布、结构特点及：主要细胞的分布、结构特点及 功能功能亚细胞水平亚细胞水平：细胞的超微结构：细胞的超微结构分子水平分子水平：主要在生物化学课程讲解：主要在生物化学课程讲解 平面与立体平面与立体平面与立体平面与立体 形态与功能形态与功能形态与功能形态与功能舒张状态舒张状态收缩状态收缩状态 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 光镜技术四、组织学技术简介四、组织学技术简介 •（一）光镜技术（一）光镜技术（一）光镜技术（一）光镜技术 –石蜡切片术：石蜡切片术：石蜡切片术：石蜡切片术：适用于大多数组织样品的制作。
适用于大多数组织样品的制作适用于大多数组织样品的制作适用于大多数组织样品的制作 主要步骤：主要步骤：主要步骤：主要步骤：•取材取材取材取材 → → → → 固定固定固定固定 → → → → 水洗水洗水洗水洗 → → → → 脱水脱水脱水脱水 → → → → 透明透明透明透明 → → → → 包埋包埋包埋包埋 → → → → 切片切片切片切片 → → → → 贴片贴片贴片贴片 → → → →染色染色染色染色 → → → → 封片封片封片封片 –其它制片方法：其它制片方法：其它制片方法：其它制片方法：适用于某些特殊样品的制作，如适用于某些特殊样品的制作，如适用于某些特殊样品的制作，如适用于某些特殊样品的制作，如涂片法、铺片法、磨片法、火棉胶包埋法等涂片法、铺片法、磨片法、火棉胶包埋法等涂片法、铺片法、磨片法、火棉胶包埋法等涂片法、铺片法、磨片法、火棉胶包埋法等染色染色染色染色 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 染料性质染料性质碱性染料：具有阳电荷含氨基（碱性染料：具有阳电荷。
含氨基（碱性染料：具有阳电荷含氨基（碱性染料：具有阳电荷含氨基（-NH2)-NH2)-NH2)-NH2)、、、、 二甲氨基二甲氨基二甲氨基二甲氨基〔〔〔〔-N(CH3)2-N(CH3)2-N(CH3)2-N(CH3)2〕〕〕〕等碱性助色团等碱性助色团等碱性助色团等碱性助色团酸性染料：具有阴电荷含羧基（酸性染料：具有阴电荷含羧基（酸性染料：具有阴电荷含羧基（酸性染料：具有阴电荷含羧基（-OOH-OOH-OOH-OOH）、）、）、）、 羟基（羟基（羟基（羟基（-OH-OH-OH-OH）或磺基（）或磺基（）或磺基（）或磺基（-SO-SO-SO-SO3 3 3 3H H H H）））） 等酸性助色团等酸性助色团等酸性助色团等酸性助色团光镜技术 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 染色原理染色原理嗜碱性：嗜碱性：嗜碱性：嗜碱性：细胞和组织中的细胞和组织中的酸性物质或结构酸性物质或结构与碱与碱性染料亲和力强，易被着色。
性染料亲和力强，易被着色嗜酸性：嗜酸性：嗜酸性：嗜酸性： 细胞和组织中的细胞和组织中的碱性物质或结构碱性物质或结构与酸与酸性染料亲和力强，易被着色性染料亲和力强，易被着色中性中性中性中性：：：： 与两种染料的亲和力均不强与两种染料的亲和力均不强光镜技术 染色方法染色方法苏木精苏木精(hematoxylin)(hematoxylin)：： 蓝色，碱性染料，可使细胞核和胞质内的蓝色，碱性染料，可使细胞核和胞质内的酸性酸性物质或结构物质或结构着着蓝紫色蓝紫色伊红伊红(eosin)(eosin)：： 红色，酸性染料，可使细胞质、溶酶体等大多红色，酸性染料，可使细胞质、溶酶体等大多数细胞器，以及细胞间质内的胶原纤维等数细胞器，以及细胞间质内的胶原纤维等碱碱性物质或结构性物质或结构着着红色红色 （（（（1 1 1 1）、）、）、）、苏木精和伊红染色（简称苏木精和伊红染色（简称 H E H E 染色染色）） 光镜技术 染色方法染色方法HEHE染色染色苏木精苏木精伊伊 红红嗜碱性结构：嗜碱性结构：细胞核细胞核粗面内质网粗面内质网游离核糖体等游离核糖体等嗜酸性结构：嗜酸性结构：细胞质基质细胞质基质溶酶体、线粒体溶酶体、线粒体等细胞器等细胞器胶原纤维等胶原纤维等光镜技术 染色方法染色方法•HEHE染色法以外的所有染色法，通常是为了染色法以外的所有染色法，通常是为了显示某些用显示某些用HEHE染色法显示不出的细胞和结染色法显示不出的细胞和结构。
如：构如：–苏丹法苏丹法——显示脂肪显示脂肪–镀银法镀银法——显示神经细胞、嗜银颗粒显示神经细胞、嗜银颗粒–铁苏木素法铁苏木素法——显示心肌闰盘显示心肌闰盘–马氏三色法马氏三色法——显示胰岛细胞显示胰岛细胞–甲苯胺蓝法甲苯胺蓝法——显示糖胺多糖显示糖胺多糖 （（2 2）、特殊染色）、特殊染色光镜技术 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 四、组织学技术简介四、组织学技术简介 几种特殊显微镜的应用 几种特殊显微镜的应用–荧光显微镜荧光显微镜 –相差显微镜相差显微镜–暗视野显微镜暗视野显微镜 –倒置显微镜倒置显微镜–其它：共焦激光扫描显微镜、偏光显微镜、其它：共焦激光扫描显微镜、偏光显微镜、紫外光显微镜、隧道扫描显微镜、紫外光显微镜、隧道扫描显微镜、X-X-射线显射线显微镜等 光镜技术 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 电镜技术电镜技术四、组织学技术简介四、组织学技术简介 •（二）电镜技术（二）电镜技术（二）电镜技术（二）电镜技术 发明：发明：发明：发明：1932 1932 年德国学者卢斯卡和科诺尔年德国学者卢斯卡和科诺尔年德国学者卢斯卡和科诺尔年德国学者卢斯卡和科诺尔•⒈⒈⒈⒈ 透射电镜术 透射电镜术 透射电镜术 透射电镜术 (transmission electron microscope ,TEM) (transmission electron microscope ,TEM) 电电子子束束穿穿透透样样品品( (超超薄薄切切片片) )。
放放大大倍倍数数为为几几万万至至几几十十万万倍倍，，分分辨辨率率可可达达0.2nm0.2nm标标本本在在荧荧光光屏屏上上呈呈黑黑白白反反差差的的结结构构影影像像被被重重金金属属浸浸染染呈呈黑黑色色的的结结构构，，称称高高电电子子密密度度 (electron-dense)(electron-dense)；；反反之之，，浅浅染的部分称染的部分称低电子密度低电子密度 (electron-lucent) Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 电镜技术电镜技术四、组织学技术简介四、组织学技术简介 •⒉⒉⒉⒉ 扫描电镜术 扫描电镜术 扫描电镜术 扫描电镜术 (scanning electron microscope(scanning electron microscope(scanning electron microscope(scanning electron microscope，，，，SEM)SEM)SEM)SEM) 观察组织表面的立体结构如细胞表面的观察组织表面的立体结构如细胞表面的观察组织表面的立体结构如细胞表面的观察组织表面的立体结构。
如细胞表面的突起、微绒毛、纤毛及细胞的分泌与吞噬突起、微绒毛、纤毛及细胞的分泌与吞噬突起、微绒毛、纤毛及细胞的分泌与吞噬突起、微绒毛、纤毛及细胞的分泌与吞噬行为等 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 组织化学术组织化学术四、组织学技术简介四、组织学技术简介 （三）组织化学术（三）组织化学术（三）组织化学术（三）组织化学术( histochemistry ) ( histochemistry ) ( histochemistry ) ( histochemistry ) ：：：： 通通过过化化学学或或物物理理反反应应原原理理显显示示组组织织或或细细胞胞内内化化学学成成分分，，通通常常是是使使其其形形成成有有色色终终末末产产物物，，以以便便在镜下观察，可进行定位和定量在镜下观察，可进行定位和定量 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 四、组织学技术简介四、组织学技术简介 •1.1.1.1.一般组织化学术一般组织化学术一般组织化学术一般组织化学术–PASPAS反反应应（（过过碘碘酸酸希希夫夫反反应应，，periodic periodic acid acid Schiff Schiff reaction)reaction)。
形形成成紫紫红红色色反反应应产产物物，，反应显示反应显示糖类糖类–FeulgenFeulgen反反应应显显示示DNADNA的的传传统统方方法法，，先先用用稀稀盐盐酸酸处处理理，，使使DNADNA分分子子中中脱脱氧氧核核糖糖与与嘌嘌吟吟之之间间的的连连接接键键打打开开，，形形成成醛醛基基，，再再与与SchiffSchiff试试剂剂作用显色，故此反应显示作用显色，故此反应显示DNADNA组织化学术组织化学术 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 四、组织学技术简介四、组织学技术简介 •⒉ ⒉ 免疫组织化学术免疫组织化学术 （（immunocytochemistry)immunocytochemistry) 利用组织化学技术的原理，再结合免疫学方法，利用组织化学技术的原理，再结合免疫学方法，则为免疫细胞化学术主要的检测对象为则为免疫细胞化学术主要的检测对象为肽和肽和蛋白质蛋白质组织化学术组织化学术 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 四、组织学技术简介四、组织学技术简介 组织化学术组织化学术•⒊ ⒊ 原位杂交术原位杂交术（（in situ hybridization)in situ hybridization) 为核酸（为核酸（DNADNA和和RNARNA）组织化学术。
用带有标）组织化学术用带有标记物的已知碱基顺序的记物的已知碱基顺序的核酸探针核酸探针，与细胞内，与细胞内待测的核酸结合（杂交），从而在原位显示待测的核酸结合（杂交），从而在原位显示该该核酸核酸 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 四、组织学技术简介四、组织学技术简介 • 放射自显影术放射自显影术• 图像分析术图像分析术• 细胞培养术细胞培养术• 组织工程组织工程其它技术其它技术正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨骼肌、正在构建的有皮肤、软骨、骨、肌腱、骨骼肌、血管、角膜等；其中以组织工程皮肤较为成功，血管、角膜等；其中以组织工程皮肤较为成功，已成为商品用于治疗烧伤、皮肤静脉性溃疡等疾病已成为商品用于治疗烧伤、皮肤静脉性溃疡等疾病 Made by Cui YunheMade by Cui Yunhe 复习题复习题•名词解释名词解释名词解释名词解释 1. HE1. HE1. HE1. HE染色法染色法染色法染色法 2. 2. 2. 2. 组织组织组织组织 3. 3. 3. 3. 免疫组织化学术免疫组织化学术免疫组织化学术免疫组织化学术 4. PAS4. PAS4. PAS4. PAS反应反应反应反应 5. 5. 5. 5. 超微结构超微结构超微结构超微结构 胃的大体解剖胃的细微解剖返回 PAS反应，显示小肠上皮杯状细胞的粘原颗粒反应，显示小肠上皮杯状细胞的粘原颗粒返回 返回免疫组织化学，显示胰岛免疫组织化学，显示胰岛B细胞细胞 返回原位杂交，显示脐静脉内皮细胞的心房钠尿肽阳性原位杂交，显示脐静脉内皮细胞的心房钠尿肽阳性 。