实验六 霉菌的形态观察,一、目的要求 掌握观察霉菌形态的基本方法,并观察其形态特征二、基本原理 霉菌菌丝较粗大,细胞易收缩变形,而且孢子很容易飞散,所以制标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液此染色液制成的霉菌标本片其特点是:(a)细胞不变形;(b)具有杀菌防腐作用,且不易干燥,能保持较长时间;(c)溶液本身呈蓝色,有一定染色效果搭片培养法,三、器材 曲霉(Aspergillussp.),青霉(Penicillium sp.),根霉(Rhizopus sp.),毛霉(Mucor sp.); 乳酸石炭酸棉蓝染色液,20%甘油,查氏培养基平板,马铃薯培养基;无菌吸管,载玻片,盖玻片,U形棒,解剖刀,玻璃纸,滤纸等四、操作步骤 1.将灭菌后的马铃薯培养基倒入培养皿,每皿倒15ml左右,凝固后备用; 2.将3—5ml无菌水倒入曲霉(Aspergillus sp.),青霉(Penicillium sp.),根霉(Rhizopus sp.),的斜面培养物里,制成菌悬液,再适当稀释; 3.用无菌吸管取0.1ml的孢子悬液稀释液,无菌的高氏1好培养基平板上,均匀涂布;,4.用经火焰灭过菌的小镊子将灭菌盖玻片如图示放在挖好沟的平皿培养基上,置28℃培养,直至菌长好; 5.观察时用镊子小心拔出一片,把有菌的一面朝上,放在洁净的载玻片上,置显微镜下进行观察。
6. 在另一片洁净的载玻片中央滴一小滴吕氏碱性美蓝,将有菌的一面朝下,小心去除气泡,置于油镜下观察。