苹果中糖含量测定（蒽铜比色法）2010/10/8一、基本原理蒽铜可以和游离的己糖或多糖中的己糖基、戊醛糖及己糖醛起反应，反应后溶液城蓝 绿色，在波长为260nm处测定其吸光度，此时吸收值最大二、试剂和溶液 分析中，除非另有说明，限用分析纯试剂、蒸馏水或相同纯度的水1） 蒽铜试剂（C14H10O）:取2g蒽铜溶于100ml 80%的H2S04溶液中2） 葡萄糖溶液（C6H1206）:标准葡萄糖溶液0.1mg/ml标准葡萄糖溶液的配置：称取葡萄糖100mg，溶于950ml蒸馏水中，用硫酸或氢 氧化钠溶液调节溶液的PH=7,定量移入1000ml容量瓶中，稀释至刻度，混匀 此溶液1ml,含葡萄糖0.1mg三、仪器:1） 恒温水浴锅2） 分光光度计四、分析步骤:（1）标准曲线的绘制:1）标准比色溶液的配置：适用于3cm光径长度比色皿的光度测量按表所示量，将葡萄糖标准溶液（0.1mg/ml）注入6个大试管中，每个试管按表 分别加入蒸馏水（ml）和蒽酮试剂（ml），摇匀，把试管放在试管架上，浸入沸 水浴中准确煮沸10min,不时摇动，然后取出，用自来水冷却至室温，放置 10min表一：葡萄糖标准溶液中葡萄糖的含量试剂 管号0 1 2 3 4 5标准葡萄糖溶液/ml00.10.20.30.40.5蒸馏水/ml1.00.90.80.70.60.5蔥酮试剂/ml4.04.04.04.04.04.02） 吸光度测定：在30min内，以葡萄糖吸光度为零的溶液作为参比溶液，在波长 620nm处，用分光光度计测定标准比色溶液的吸光度。
3） 标准曲线的绘制：以5ml标准比色溶液中所含葡萄糖的毫克数为横坐标，相应的 吸光度为纵坐标，用Excel作图表二：6组浓度测得吸光度值管号012345葡萄糖标准溶液体积/ml00.10.20.30.40.5葡萄糖的对应量/mg00.010.020.030.040.05吸光度值00.0350.0870.1100.1650.222表三：标准曲线图（A=ebc）（2）测定：1） ①试样及试液准备：称取33.23g苹果，用榨汁机搅碎，置于1000ml烧杯中，加 水冲干净榨汁机内壁，最后定容至1000ml，然后用真空抽滤装置过滤取5ml 试液，溶于145ml蒸馏水中②取上诉试液1 ml加入大试管中，并加4ml蒽酮试剂，混匀，把试管放在试管架 上，浸入沸水浴中准确煮沸10min,不时摇动，然后取出，用自来水冷却至室 温，放置10min2） 空白试验：按上述操作步骤进行空白试验，除不用样品外，操作手续和应用的试 剂与测定试样时相同3） 吸光度测定：与标准曲线绘制方法相同，对试验及空白试验溶液进行光度测定， 测定其吸光度4） 测得吸光度:A=1.384五、 分析结果和计算 从标准曲线查出所测吸光度对应的葡萄糖的量。
试样中葡萄糖含量s以质量百分数（％）表示，按下式计算：s=CV/m X100%葡萄糖的质量分数；Cf从标准曲线上查出葡萄糖质量浓度（mg/ml）；V—样品稀释后的体积（ml ）；mf样品的质量（mg）六、 计算：由葡萄糖标准曲线y = 4.4429x-0.0029得待测液中葡萄糖含量mx=0.3122mg ；C= m1/ V1=0.3122mg/1ml=0.3122mg/ml s=CV/m X100%xlOO%二 0.3122mg/mlX30000ml 33230mg=28.2%。