PDA培养基的配制方法和注意事项

PDA培养基的配制方法和注意事项PDA培养基的配制方法和注意事项 PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Potato Dextrose Agar (Medium)，分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文它属于固体培养基、半合成培养基PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势，一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛 PDA培养基的配制 (1)称量和熬煮 按培养基配方逐一称取去皮土豆土豆切成小块放入锅中，加水1000ml，在加热器上加热至沸腾，维持20-30min，用可用2层纱布趁热在量杯上过滤，滤渣弃取滤液补充水分到1000ml (2)加热溶解 把滤液放入锅中，加入葡萄糖20g，琼脂15～20g(提前搞碎)，然后放在石棉网上，小火加热，并用玻棒不断搅拌，以防琼脂糊底或溢出，待琼脂完全溶解后，再补充水分至所需量 (3)分装 按实训要求，将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染 分装量：固体培养基约为试管高度的1/5，灭菌后制成斜面，分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。

(4)加棉塞 培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等)，以阻止外界微生物进入培养基内造成污染，并保证有良好的通气性能 (5)包扎 加塞后，将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳或橡皮筋扎好，用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期 PDA培养基配制注意事项 1.培养基经灭菌后，必须放在37C温箱培养24h，无菌生长者方可使用 2.PDA培养基一般不需要调pH对于要调节pH的培养基，一般用pH试纸测定其pH如果培养基偏酸或偏碱时，可用lmol/LNaOH或lmol/LHCL溶液进行调节调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液，防止局部过酸或过碱破坏培养基成分 3.培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡培养 4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量为0.2g/L培养基，主要是为了抑制细菌的生长，减少干扰性。