文档整理 | 借鉴参考collection of questions and answers斐林试剂和双缩脲试剂区别1、试剂的浓度和配制方法不同斐林试剂:甲液:0.1g/mL的NaOH溶液;乙液:0.05g/mL的溶液使用前临时配制,在2mL的甲液中滴入4滴~5滴乙液,振荡使混合均匀后即可双缩脲试剂:A液:0.1g/mL的NaOH溶液;B液:0.01g/mL的溶液分别配制好A液和B液即可2、试剂的作用和鉴定原理不同斐林试剂:作用:可鉴定可溶性复原糖原理:甲液和乙液混合后产生沉淀,与含醛基〔—CHO〕的可溶性复原糖,在加热条件下反响,将复原为砖红色的沉淀双缩脲试剂:作用:可鉴定蛋白质溶液原理:在碱性溶液〔NaOH〕中,双缩脲〔〕能与反响,形成紫色络合物由于蛋白质分子中含有许多与双缩脲构造相似的肽键〔—CO—NH—〕,因此,蛋白质都可以与双缩脲试剂发生反响而使溶液呈现紫色3、试剂的使用方法不同斐林试剂:使用时现配现用,要水浴加热如果斐林试剂放置一段时间,因沉淀在溶液底部而无法使用使用时,甲液和乙液不可分别参加到待测液中,否那么,待测液〔苹果组织样液〕中的有机酸会中和NaOH,使产生的缺乏而影响鉴定。
双缩脲试剂:使用时,双缩脲试剂A液和双缩脲试剂B液要分别先后参加到待测液中,不需要加热双缩脲试剂A液和双缩脲试剂B液不可以混合后再参加待测液如先混合,那么会产生沉淀而无产生参加的双缩脲试剂B液〔〕也不能过量,否那么蓝色的会遮盖产生的紫色4、反响中出现的颜色不同斐林试剂鉴定可溶性复原糖,出现的颜色变化为:浅蓝色→棕色→砖红色待测液参加刚配制的斐林试剂,溶液是浅蓝色;水浴加热后,一局部被复原为砖红色的,溶液呈现两种颜色的混合色——棕色;随着反响的完成,全部被复原为,溶液呈砖红色双缩脲试剂鉴定蛋白质,出现的颜色变化为:无色→浅蓝色→紫色参加双缩脲试剂A液,溶液无色;再参加双缩脲试剂B液,有形成,溶液呈浅蓝色;振荡均匀后,反响完成,溶液呈紫色。