实验一实验一 细菌的形态学细菌的形态学 实验内容l油镜的使用与保护油镜的使用与保护l细菌染色标本观察细菌染色标本观察l（革兰染色法）（革兰染色法）l细菌基本形态观察细菌基本形态观察（球菌、杆菌、螺形菌）（球菌、杆菌、螺形菌）l细菌特殊结构观察细菌特殊结构观察（荚膜、鞭毛、芽胞）（荚膜、鞭毛、芽胞） 一、普通光学显微镜的使用l显微镜的构造图 l油镜头的辨认l油镜的使用方法l显微镜的维护 一、一、油镜的使用与保护油镜的使用与保护1.原理原理2.方法方法 四，细菌的三种基本形态四，细菌的三种基本形态l球菌：葡萄球菌l杆菌：大肠杆菌l螺形菌：霍乱弧菌 细菌的三种基本形态示意图⊕ 葡萄球菌：葡萄球菌： Figure 1 - A Gram stain of Gram + Staphylococcus cells. 显微镜下的杆菌杆菌(bacillus) Figure 2 - Gram stain of Gram - E. coli cells 弧菌弧菌 霍乱弧菌Figure 3 - Gram stain of Gram – Cholera cells 五，细菌的特殊结构观察五，细菌的特殊结构观察l芽胞示教片：破伤风杆菌。
l鞭毛示教片：变形杆菌l荚膜示教片：肺炎双球菌 芽孢产芽孢细菌的种类 菌体 （营养细胞）芽胞 破伤风梭菌破伤风梭菌×1000 鞭毛 变形杆菌鞭毛×1000 细菌荚膜示意图细菌荚膜示意图 荚膜的观察： 负染色负染色 三，细菌标本染色检查法三，细菌标本染色检查法 l【【菌种菌种】】大肠杆菌大肠杆菌+ +葡萄球菌葡萄球菌l【【试剂试剂】】生理盐水、革兰染液生理盐水、革兰染液l【【其他材料其他材料】】酒精灯、接种环、玻片、吸水纸、显微镜等酒精灯、接种环、玻片、吸水纸、显微镜等l【【方法方法】】1 1、细菌涂片标本的制片、细菌涂片标本的制片 2 2、革兰染液染色、革兰染液染色 3 3、油镜下观察结果、油镜下观察结果 革兰染色法革兰染色法由丹麦医生由丹麦医生Hans Christian GramHans Christian Gram于于18841884年年创立创立 l操作原则：无菌操作（烧灼灭菌）操作原则：无菌操作（烧灼灭菌）Aseptic area10-20cm外焰外焰焰芯焰芯内焰内焰 器具：器具：接种环（上）和接种针（下）接种环（上）和接种针（下） 柄约22cm2—5mm绝缘柄约7.5cm金属柄约14.5cm5—8cm安装环(针)的螺口(约8mm)细菌涂片的制备细菌涂片的制备 菌液采取法菌液采取法细菌涂片的制备细菌涂片的制备 菌液采取法菌液采取法细菌涂片的制备细菌涂片的制备 一、细菌涂片的制备一、细菌涂片的制备 一般制备涂片包括涂片、干燥、固定三步。
一般制备涂片包括涂片、干燥、固定三步 涂片涂片 干燥干燥 固定固定【【操作步骤】】 固定的目的：固定的目的：l使细菌的细胞凝固，使菌体与玻片粘使细菌的细胞凝固，使菌体与玻片粘得更牢固；得更牢固；l可改变菌体对染料的通透性；可改变菌体对染料的通透性；l加热固定可杀死细菌，比较安全加热固定可杀死细菌，比较安全 结晶紫结晶紫 1’ 1’ 碘液碘液 1’ 1’ 95% 95% 乙醇乙醇 30” 30” 复红复红 1’ 1’ 冲洗冲洗 滤纸干燥滤纸干燥 油镜观察油镜观察冲洗冲洗冲洗冲洗冲洗冲洗革兰染液染色革兰染液染色初染初染媒染媒染脱色脱色复染复染【【操作步骤】】 紫色（紫色（G＋＋））革兰氏革兰氏染色步骤示意图染色步骤示意图革兰染色革兰染色甲菌甲菌乙乙菌菌初染初染结晶紫结晶紫媒染媒染碘液碘液脱色脱色乙醇乙醇复染复染稀释复红稀释复红紫色（紫色（G＋＋））红色（红色（G-））革革兰染色步骤示意图兰染色步骤示意图 【【结果结果】】l细菌被染成紫色者，称为革兰阳性菌；细菌被染成紫色者，称为革兰阳性菌；l而细菌染成红色者，称为革兰阴性菌；而细菌染成红色者，称为革兰阴性菌；阳性菌阳性菌————紫色紫色 阴性菌阴性菌————红色红色 实验报告实验报告l简要写出革兰染色原理、操作步骤，简要写出革兰染色原理、操作步骤，绘制革兰染色镜下细菌图绘制革兰染色镜下细菌图l绘制细菌的基本形态及其特殊结构图绘制细菌的基本形态及其特殊结构图 。