本文格式为Word版，下载可任意编辑分析工作常用显色剂 常用鉴定试剂的配制和应用 一、通用试剂 1、碘试剂 检查一般有机化合物 （1）碘蒸气 预先将盛有碘结晶的小杯置于密闭的玻璃容器内，使容器空间被碘蒸气饱和，将薄层置于容器内数分钟即显棕色斑点有时，于容器中加放一小杯水，增加容器内的湿度，可提高显色的灵敏度 （2）0.5％碘的氯仿溶液 喷洒试剂，置空气中待过量的碘挥发后，喷1％淀粉溶液，斑点由棕色转为蓝色 2、硫酸试剂 检查一般有机化合物 5％硫酸乙醇溶液作为色谱显色剂用喷洒后，置空气中枯燥15min，100℃烤至斑点呈色（不同化合物呈不同颜色） 3、重铬酸钾—硫酸试剂 检查一般有机化合物 5g重铬酸钾溶于l00ml40％硫酸中喷该试剂后，150℃加热至斑点展现(不同化合物呈不同颜色) 4、磷钼酸试剂 检查恢复性成分 5％磷钼酸乙醇溶液喷洒后，120℃加热至呈蓝色斑点 5、磷钨酸试剂 检查恢复性成分 20％磷钨酸乙醇溶液喷洒后，120℃烘烤，恢复性物质呈蓝色斑点 6、硝酸银—氢氧化铵试剂 检查恢复性成分 溶液I：0.1mol／L硝酸银溶液。
溶液Ⅱ：10％氢氧化铵溶液临用前溶液I和Ⅱ以 1∶5混合喷洒后105℃加热5~l0min，至深黑色斑点展现 7、中性高锰酸钾试剂 检查易恢复性成分 0.05％高锰酸钾溶液喷洒后粉红色背景上显黄色斑点 8、碱性高锰酸钾试剂 检查恢复性成分 溶液I：1％高锰酸钾溶液溶液Ⅱ：5％碳酸钠溶液溶液I和Ⅱ等量混合使用，喷洒后，粉红背景上显黄色斑点 9、四唑蓝试剂 检查恢复性成分 溶液I：0．5％四唑蓝甲醇溶液溶液Ⅱ：25％氢氧化钠溶液临用前两液等量混合喷洒后，微热或室温放置显紫色斑点 10、荧光素—溴试剂 检查不饱和化合物 溶液I：0.1g荧光素溶于l00ml乙醇中溶液Ⅱ：5g溴溶于l00ml四氯化碳中先喷洒溶液I，然后将薄层板放入盛有溶液Ⅱ的缸内，黄色斑点展现后，于紫外光灯下检视，红色底板上显黄色荧光斑点 11．荧光显色试剂 检查一般有机化合物 （1）0.2％2，7--'氯荧光素乙醇溶液 （2）0.01％荧光素乙醇溶液 （3）0.1％桑色素乙醇溶液 （4）0.05％罗丹明B乙醇溶液 喷洒任一溶液，不同的化合物在荧光背景上可显黑色或其它荧光斑点。
二、苷类鉴定试剂 1、糖鉴定试剂 （1） －萘酚－硫酸试剂 检查恢复糖 ①溶液I：10％ —萘酚乙醇溶液溶液Ⅱ：硫酸取lml样品的稀乙醇溶液或水溶液，参与溶液I 2～3滴，混匀，沿试管壁缓缓参与少量溶液Ⅱ，二液面交界处产生紫红色环为阳性回响 ②15％ —萘酚乙醇溶液21m1、硫酸13ml、乙醇87ml及水8ml混匀后使用喷洒于薄层板上，100℃烤3～6min，多数糖显蓝色，鼠李糖显橙色，所显颜色于室温可稳定2天～3天 （2）斐林试剂 检查恢复糖 ‘ 溶液I：6.93g结晶硫酸铜溶于l00ml水中溶液Ⅱ：34.6g酒石酸钾钠、10g氢氧化钠溶于l00ml水中取lml样品热水提取液，参与4～5滴用时配制的溶液Ⅰ、Ⅱ等量混合液，在沸水浴中加热数分钟，产生砖红色沉淀为阳性回响如检查多糖和甙，取lml样品水提液，参与lmll0％盐酸溶液，在沸水浴上加热l0min，过滤，再用10％氢氧化钠溶液调至中性，按上述方法检查恢复糖 （3）氨性硝酸银试剂 检查恢复糖 硝酸银1g，加水20ml溶解，提防滴加适量氨水，边加边搅拌，至开头产生的沉淀将近全部溶解为止，过滤。
取lml样品的水溶液，参与lml试剂，混匀后，40℃微热数分钟，管壁析出银镜或产生黑色沉淀为阳性回响本试剂也可作为色谱显色剂，喷洒后于110℃加热数分钟，显棕黑色斑点为阳性回响恢复性物质如醛类、邻二酚类等有干扰 （4）茴香醛－硫酸试剂 检查糖类化合物 硫酸lml加到含茴香醛0.5ml的乙酸溶液50ml中，需临用前配制喷洒于薄层板上，105℃加热至显示色斑，不同糖显不同颜色 （5）苯胺－邻苯二甲酸试剂 检查糖类化合物 苯胺0.93g和邻苯二甲酸1.66g溶于100ml水饱和的正丁醇中作色谱显色剂用喷后105℃烤5min，显红棕色斑点 （6）l,3－二'羟基萘酚－磷酸试剂 检查酮糖、醛糖 0.2％1，3--'二羟基萘酚乙醇溶液50ml与85％磷酸50ml混合平匀后使用喷后105℃烤5min～10min，酮糖呈红色，醛糖显淡蓝色 （7）苯胺－二苯胺－磷酸试剂 检查糖类化合物 苯胺4ml、二苯胺4g及85％磷酸20ml溶于丙酮200ml中喷洒于薄层板上，85℃加热10min，不同糖显不同颜色 （8）2，3，5－三苯基氯化四氮唑(T．T．C)试剂 检查恢复糖。
溶液Ⅰ：4％T．T．C甲醇溶液溶液Ⅱ：4％氢氧化钠溶液临用时将溶液Ⅰ和Ⅱ等体积混合喷洒后，100℃加热5～10min，显红色斑点为阳性回响(醛类无干扰) （9）三氯化铁－冰醋酸(K．K)试剂 检查 －去氧糖，常用于强心甙 溶液I：1％三氯化铁溶液0.5ml，加冰醋酸至l00ml溶液Ⅱ：硫酸取样品乙醇提取液lml，置试管中，水浴上蒸去乙醇，残渣用0.5ml溶液I溶解，沿试管壁缓缓参与溶液Ⅱlml，静置分层，上层渐显蓝色，下层显红色或棕色为阳性回响(其颜色随苷元羟基和双键的位置和个数不同而不同) （10）占吨氢醇试剂 检查 －去氧糖(常用于强心甙) 10mg占吨氢醇溶于100ml冰醋酸中，再参与lml硫酸混合取lml样品，参与试剂lml，置水浴上加热30min，显红色为阳性回响 （11）Gregg-Gisvold试剂 检查2．6－去氧糖 溶液I：10％三氯化铁溶液溶液Ⅱ：1％盐酸甲醇溶液(97.2ml甲醇中含2．8ml盐酸)0.5ml溶液I与100ml溶液Ⅱ混合将样品的乙醇溶液点于滤纸片上，晾干后，喷洒上述混合试剂，110℃加热5min，显蓝色为阳性回响。
（12）3，5－二氨基苯甲酸－磷酸试剂 检查2－去氧糖 3，5－二氨基苯甲酸二盐酸盐1g溶于80％磷酸25ml，加水稀释至60ml喷洒后，100℃加热15min，2－去氧糖在日光下显棕色，在紫外光下显黄绿色荧光 （13）对硝基苯胺－过碘酸试剂 检查去氧糖 溶液I：饱和偏高碘酸溶液1份加水2份混匀溶液Ⅱ：1％对硝基苯胺乙醇溶液4份与盐酸1份混合先喷溶液I，放置10min，再喷溶液Ⅱ，去氧糖显黄色，紫外光下显强荧光，再喷5％氢氧化钠甲醇溶液，颜色转绿，乙二醇同样显色 2、酚类鉴定试剂 （1）三氯化铁试剂 检查酚类化合物、鞣质 1～5％三氯化铁水溶液或乙醇溶液，加盐酸酸化取1m1样品的乙醇溶液，参与试剂1～2滴，显绿、蓝绿或暗紫色为阳性回响作色谱显色剂用，喷洒后，显绿或蓝色斑点为阳性回响 · （2）4－氨基安替匹林－铁氰化钾(Emerson)试剂 检查酚羟基对位无取代基的化合物 溶液I：2％4－氨基安替匹林乙醇溶液溶液Ⅱ：8％铁氰化钾溶液作色谱显色剂用，先喷洒溶液I，再喷洒溶液Ⅱ，用氨气熏，显橙红或深红色斑点为阳性回响 （3）Gibbs试剂 检查酚羟基对位无取代基的化合物。
溶液I：0.5％2，6－溴(氯)苯醌氯亚胺的乙醇溶液溶液Ⅱ：1％氢氧化钾乙醇溶液取lml样品的乙醇溶液，滴加溶液Ⅱ，使pH9～10，再参与1滴～2滴溶液I，显深蓝色为阳性回响 （4）铁氰化钾－三氯化铁试剂 — 6 —。