三羧酸循环过程乙酰-CoA进入由一连串反应构成的循环体系，被氧化生成H2Q和CQ2o由于 这个循环反应开始于乙酰CoA与草酰乙酸(oxaloaceticacid)缩合生成的含有三 个羧基的柠檬酸，因此称之为三羧酸循环或柠檬酸循环(citratecycle)在三羧酸 循环中，柠檬酸合成酶催化的反应是关键步骤，草酰乙酸的供应有利于循环顺利 进行其详细过程如下： 1、乙酰-CoA进入三羧酸循环 乙酰CoA具有硫酯键，乙酰基有足够能量与草酰乙酸的羧基进行醛醇型缩合首先柠檬酸合 酶的组氨酸残基作为碱基与乙酰-CoA作用，使乙酰-CoA的甲基上失去一个h+， 生成的碳阴离子对草酰乙酸的羰基碳进行亲核攻击，生成柠檬酰-CoA中间体， 然后高能硫酯键水解放出游离的柠檬酸，使反应不可逆地向右进行该反应由柠 檬酸合成酶(citratesynthase)催化，是很强的放能反应由草酰乙酸和乙酰-CoA 合成柠檬酸是三羧酸循环的重要调节点，柠檬酸合成酶是一个变构酶，ATP是 柠檬酸合成酶的变构抑制剂，此外，a-酮戊二酸、NADH能变构抑制其活性，长 链脂酰-CoA也可抑制它的活性，AMP可对抗ATP的抑制而起激活作用。
2、异柠檬酸形成 柠檬酸的叔醇基不易氧化，转变成异柠檬酸而使叔醇变成仲醇，就易于氧化，此反应由顺乌头酸酶催化，为一可逆反应 3、第一次氧化脱羧 在异柠檬酸脱氢酶作用下，异柠檬酸的仲醇氧化成羰基，生成草酰琥珀酸(oxalosuccinicacid)的中间产物，后者在同 一酶表面，快速脱羧生成a-酮戊二酸(a-ketoglutarate)、NADH和CQ2，此反应 为6-氧化脱羧，此酶需要镁离子作为激活剂此反应是不可逆的，是三羧酸循 环中的限速步骤，ADP是异柠檬酸脱氢酶的激活剂，而ATP，NADH是此酶的 抑制剂 4、第二次氧化脱羧 在a-酮戊二酸脱氢酶系作用下，a-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰-CoA、NADH-H+和 CQ2,反应过程完全类似于丙酮酸 脱氢酶系催化的氧化脱羧，属于a?氧化脱羧，氧化产生的能量中一部分储存于 琥珀酰coa的高能硫酯键中a-酮戊二酸脱氢酶系也由三个酶(a-酮戊二酸脱羧 酶、硫辛酸琥珀酰基转移酶、二氢硫辛酸脱氢酶)和五个辅酶(tpp、硫辛酸、hscoa、 NAD+、FAD)组成此反应也是不可逆的a-酮戊二酸脱氢酶复合体受ATP、 GTP、NADH和琥珀酰-CoA抑制，但其不受磷酸化/去磷酸化的调控。
5、底物磷酸化生成ATP 在琥珀酸硫激酶(succinatethiokinase )的作用下，琥珀酰-CoA的硫酯键水解，释放的自由能用于合成gtp，在细菌和高等生物可直接生成ATP，在哺乳动物中，先生成GTP，再生成ATP，此时， 琥珀酰-CoA生成琥珀酸和辅酶A 6、琥珀酸脱氢 琥珀酸脱氢酶(succinatedehydrogenase)催化琥珀酸氧化成为延胡索酸该酶结合粒体内 膜上，而其他三羧酸循环的酶则都是存粒体基质中的，这酶含有铁硫中心和 共价结合的fad，来自琥珀酸的电子通过fad和铁硫中心，然后进入电子传递链 到2,丙二酸是琥珀酸的类似物，是琥珀酸脱氢酶强有力的竞争性抑制物，所 以可以阻断三羧酸循环 7、延胡索酸的水化 延胡索酸酶仅对延胡索酸的反式双键起作用，而对顺丁烯二酸(马来酸)则无催化作用，因而是高度立体 特异性的 8、草酰乙酸再生 在苹果酸脱氢酶(malicdehydrogenase)作用下，苹果酸仲醇基脱氢氧化成羰基，生成草酰乙酸(oxalocetate)，NAD+是 脱氢酶的辅酶，接受氢成为NADH•H+(图4-5) 在此循环中，最初草酰乙酸因参加反应而消耗，但经过循环又重新生成。
所以每循环一次，净结果为1 个乙酰基通过两次脱羧而被消耗循环中有机酸脱羧产生的二氧化碳，是机体中 二氧化碳的主要来源在三羧酸循环中，共有4次脱氢反应，脱下的氢原子以 NADH+H+和 FADH2的形三羧酸循环式进入呼吸链，最后传递给氧生成水，在此过程中释放的能量可以合成ATP 乙酰辅酶A不仅来自糖的分解，也可由脂肪酸和氨基酸的分解代谢中产生，都 进入三羧酸循环彻底氧化并且，凡是能转变成三羧酸循环中任何一种中间代谢 物的物质都能通过三羧酸循环而被氧化所以三羧酸循环实际是糖、脂、蛋白质 等有机物在生物体内末端氧化的共同途径三羧酸循环既是分解代谢途径，但又 为一些物质的生物合成提供了前体分子如草酰乙酸是合成天冬氨酸的前体，a- 酮戊二酸是合成谷氨酸的前体一些氨基酸还可通过此途径转化成糖。