Word文档空气、食品接触面（餐具，饮具，器皿表面）微生物检验方法、检验标准空气、食品接触面微生物检验方法、检验标准 目的： 检测生产车间空气、操作人员手部、与食品有直接接触面的机械设备的微生物指标，生产区域环境当中病原微生物的监控，达到规定标准，以掌握食品成品的质量 参照标准： 中华人民共和国国家标准《一次性使用卫生用品卫生标准》GB15979－1995、《HACCP原理与实施》、中华人民共和国国家标准《公共场所空气微生物检验方法细菌总数测定》GB/T18204.1－2021、中华人民共和国进出口商品检验行业标准SN0169-92/SN0172-92/SN0170-92、出入境检验检疫局二000四年《出入食品微生物检验培训教材》中《出入食品生产厂卫生细菌检验方法》、日本东京冷冻食品检验方法 采样与检测方法： 3.1空气的采样与测试方法 3.1.1样品采集：(1)取样频率：a)车间转换不同卫生要求的产品时，在加工前进行采样，以便了解车间卫生清扫消毒状况b)全厂统一放长假后，车间生产前，进行采样c)产品检验结果超内控标准时，应准时对车间进行采样，如有检验不合格点，整改后再进行采样检验。
d)试验性新产品，按客户规定频率采样检验e)正常生产状态的采样，每周一次2）采样方法在动态下进行，室内面积不超过30m2，在对角线上设里、中、外三点，里、外点位置距墙1m；室内面积超过30m2，设东、西、南、北、中五点，四周4点距墙1m采样时，将含平板计数琼脂培育基的平板(直径9cm)置采样点(约桌面高度)，并避开空调、门窗等空气流通处，打开平皿盖，使平板在空气中暴露5min采样后必需尽快对样品进行相应指标的检测，送检时间不得超过6h，若样品保存于0～4℃条件时，送检时间不得超过24h3.1.2菌落培育：（1）在采样前将预备好的平板计数琼脂培育基平板置37℃1℃培育24h，取出检查有无污染，将污染培育基剔除2）将已采集样品的培育基在6h内送试验室，细菌总数于37℃1℃培育48h观看结果，计数平板上细菌菌落数3）菌落计算：a)记录平均菌落数，用"个/皿'来报告结果用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，然后用5～10倍放大镜检查，不行遗漏b)若培育皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可辨别时仍以2个或2个以上菌落计数3.2工作台（机械器具）表面与工人手表面采样与测试方法：3.2.1样品采集：(1)取样频率：a)车间转换不同卫生要求的产品时，在加工前进行擦拭检验，以便了解车间卫生清扫消毒状况。
b)全厂统一放长假后，车间生产前，进行全面擦拭检验c)产品检验结果超内控标准时，应准时对车间可疑处进行擦拭，如有检验不合格点，整改后再进行擦拭检验d)试验新产品，按客户规定擦拭频率擦拭检验e)对工作表面消毒产生怀疑时，进行擦拭检验f)正常生产状态的擦拭，每周一次2）采样方法：a)工作台（机械器具）：用浸有灭菌生理盐水的棉签在被检物体表面（取与食品直接接触或有肯定影响的表面）取25cm2的面积，在其内涂抹10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检b)工人手：被检人五指并拢，用浸湿生理盐水的棉签在右手指曲面，从指尖到指端来回涂擦10次，然后剪去手接触部分棉棒，将棉签放入含10mL灭菌生理盐水的采样管内送检3）采样留意事项：擦拭时棉签要随时转动，保证擦拭的精确性对每个擦拭点应具体记录所在分场的详细位置、擦拭时间及所擦拭环节的消毒时间3.2.2细菌大肠菌群的检测培育:样液稀释：将放有棉棒的试管充分振摇此液为1：10稀释液如污染严峻，可十倍递增稀释，吸取1ml1：10样液加9ml无菌生理盐水中，混匀，此液为1：100稀释液3.2.2.1细菌总数：（1）以无菌操作，选择1～2个稀释度各取1ml样液分别注入到无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿（平行样），将已溶化冷至45℃左右的平板计数琼脂培育基倾入平皿，每皿约15ml，充分混合。
2）待琼脂凝固后，将平皿翻转，置36℃1℃培育48h后计数3）结果报告：报告每25cm2食品接触面中或每只手的菌落数3.2.2.2大肠菌群：（1）平板法:a)以无菌操作，选择1～2个稀释度各取1ml样液分别注入到无菌平皿内，每个稀释度做两个平皿（平行样），将已溶化冷至45℃左右的去氧胆酸盐琼脂培育基倾入平皿，每皿约15ml，充分混合待琼脂凝固后,再掩盖一层培育基，约3-5mlb)待琼脂凝固后，将平皿翻转，置36℃1℃培育24h后计数c)结果计算：以平板上消失紫红色菌落的个数乘以稀释倍数得出d)结果报告：报告每25cm2食品接触面中或每只手的菌落数（2）试管法:a)以无菌操作，选择3个稀释度各取1ml样液分别接种到BGLB肉汤培育基中，每个稀释度接种三管b)置BGLB肉汤管于36℃1℃培育482h记录全部BGLB肉汤管的产气管数c)结果报告：按BGLB肉汤管产气管数，查MPN表报告每25cm2食品接触面中或每只手的大肠菌群值3.2.3金黄色葡萄球菌检测（1）定性检测a)取1ml稀释液注入灭菌的平皿内，倾注15-20ml的B-P培育基，（或是吸取0.1稀释液，用L棒涂布于表面干燥的B-P琼脂平板），放进361℃的恒温箱内培育482小时。
b)从每个平板上至少挑取1个可疑金黄色葡萄球菌的菌落作血浆凝固酶试验c)结果报告：B-P琼脂平板的可疑菌落作血浆凝固酶试验为阳性，即报告手（工器具）上有金黄色葡萄球菌存在2）定量检测a)以无菌操作，选择3个稀释度各取1ml样液分别接种到含10﹪氯化钠胰蛋白胨大豆肉汤培育基中，每个稀释度接种三管b)置肉汤管于361℃的恒温箱内培育48小时划线接种于表面干燥的B-P琼脂平板，置36℃1℃培育45～48小时c)从B-P琼脂平板上，挑取典型或可疑金黄色葡萄球菌菌落接种肉汤培育基，36℃1℃培育20～24小时d)取肉汤培育物做血浆凝固酶试验，记录试验结果e)报告结果：依据凝固酶试验结果，查MPN表报告每25cm2食品接触面中或每只手的金黄色葡萄球菌值3.3工厂环境中病原体的检测方案与方法检测方案：为了保证食品平安，工厂应当对生产环境中的病原微生物进行检测和评估，检测项目包括李斯特菌，沙门氏菌等病原体微生物，化验室应当根据肯定的方案对生产场所环境中的病原体进行检测，其中包括地面、下水道、排水沟、墙壁、天花板、设备框架、运输的支架，冷藏装置、速冻机、传送带、设备的螺丝、修理工具等部位当某个点检测到病员微生物时，应当对环境中的相像点加大检测频率；在把全部的预定点检测完后，应当对环境中的病原微生物的存在状况进行全面评估，在下一次环境检测循环过程中加强检测简单消失病原体的环境点，达到持续改进的目的。
检测频率:每月两次,每次每个区域至少选取5个检测点,分别进行检测3.3.1环境李斯特菌的检测方法（3MTMPetrifilmTM环境李斯特菌的测试片）3.3.1.1用涂抹棒，海绵或者其他采样设备收集环境样本3.3.1.2将收集的样本添加10毫升灭菌的缓冲蛋白胨水，将样本与缓冲蛋白胨混合1分钟，将样品置于室温（20-30℃）1小时，最久不超过1.5小时，以修复损伤的李斯特菌3.3.1.3将测试片放在平坦处，掀起上层膜3.3.1.4用移液器垂直滴加3毫升样品到下层膜中央，将上层膜缓慢盖下，以免产生气泡3.3.1.5轻轻将塑料压板放在位于接种区上层膜上，不要压，扭转或者滑动压板提起压板等至少非常钟，以使胶体凝固3.3.1.6将测试片透亮面朝上，可叠放至十片，在37℃1℃培育26-30小时，可以用标准菌落记数器或者其他光学放大器判读，不要记数圆形轮廓上的菌落，由于他们不受选择性培育基的影响3.3.1.7对于定性检测，依据紫红色菌落是否存在，结果记为检出或者未检出3.3.2环境中沙门氏菌的检测方法3.3.2.1采样地点:选取采样点时因尽量选取微生物简单滋生的地方 冷冻车间 FD车间 东区初加工 传递窗口表面、排水沟、 排水沟出口、墙壁、地面 卸料间 墙壁、墙角、地面、天花板、 物料车表面 东区精加工 地面、墙壁、墙角、排水沟、 排水沟出口、速动机链条、天花板 暂存间 墙壁、地面、天花板、墙角、墙缝 西区初加工 传递窗口表面、地面、墙壁、 排水沟、排水沟出口 选择间 墙壁、地面、天花板、墙角、垫板 西区精加工 地面、墙壁、墙角、排水沟、排水沟出口、速动机链条、天花板 包装室 墙壁、地面、天花板、金探传送带表面、落地料存放处 3.3.2.2操作步骤 3.3.2.2.1采样应在生产开头后进行，用已浸润过的棉拭在选定的被测表面旋转涂抹约100cm2的面积，然后将棉拭放回涂抹试管并盖紧。
3.3.2.2.2将样品带回试验室，每5个点混合成一个样品,登记编号,根据SN0170-92标准准时检测，若有阳性结果消失，应逐步对所混合的每个点分别检测物体表面涂抹菌落总数计算方式：物体表面细菌总数（cfu/c㎡）=平皿上菌落的平均数*采样液稀释倍数/采样面积（cm2）根椐GB15979－2021《一次性卫生用品卫生标准》的标准,生产环境卫生指标1装配与包装车间空气中细菌菌落总数应2500cfu/m32工作台表面细菌菌落总数应20cfu/cm23.工人手表面细菌菌落总数应300cfu/只手，并不得检出致病菌人员和环境卫生检测方法一、空气采样及检验方法1培育基：一般养分琼脂平板，按GB4789.28中3.7条配制2采样（空气沉降法）2.1布点：面积小于30平方米的车间，设一对角线，上取3点，即中心一点，两端在距墙1米处各取一点；面积大于30平方米的车间，设东、西、南、北、中5个点，其中东、西、南、北点均距墙1米2.2采样高度：与地面垂直高度80-150厘米2.3采样方法；用直径为9厘米的一般养分琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培育3培育：于37℃培育24小时4检测频率：每周空气质量标准：生车间、熟车间、成品车间：低于100个半成品库、成品库：低于10个二、设备的采样与检验方法依据生产过程所要求的重点卫生部位，试验室对其进行涂抹采样，进行细菌总数检验。
1采样方法1.1涂抹法（适用于表面平坦的设备和工器具产品接触面）取经过灭菌的铝片框（框内面积为50平方厘米）放在需检查的部位上，用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分，擦完后马上将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米1.2贴纸法（适用于表面不平坦的设备和工器具接处面）将无菌规格纸（55厘米，纸质要薄而软）用无菌生理盐水泡湿后，于需测部分分别贴上两张，两张纸面积共50平方厘米，然后取下放入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中，此液每毫升代表5平方厘米2检验方法2.1细菌总数的检验将上述样液充分振摇，依据卫生状况，相应地做10倍递增稀释，选择其中2-3个合适的稀释度作平皿倾注培育，培育基用一般养分琼脂，每个稀释度作2个平皿，每个平皿注入1毫升样液，于37℃培育24小时后计菌落数结果计算表面细菌总数（cfu/cm2）=平皿上菌落的平均数样液稀释倍数/3022.2致病菌的检验沙门氏菌，参照GB4789.4进行金黄色葡球菌，参照GB7918.5进行4.检验合格标准：细菌总数10－100个∕cm2，。