基础试验报告项目名称：水质总氮的测定碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法HJ636-2012项目负责人：张丹审批日期：一．项目概述水中各种形态无机和有机氮的总量包括no3-,no2-，无机铵盐，溶解态氨及大部分有机含氮化合物中的氮，以每升水含氮毫克数计算常被用来表示水体受营养物质污染的程度二．实验目的本实验以紫外分光光度法测定水中总氮本实验方法适用于地表水、地下水、工业废水和生活污水中总氮的测定本实验室现有条件与标准方法规定的一致，按照该方法做基础实验，验证本实验室条件下开展该检测项目的适用性三．检测方法与原理检测方法：紫外分光光度法HJ636-2012原理：在120〜124°C下，碱性过硫酸钾溶液使样品中含氮化合物的氮转化为硝酸盐，采用紫外分光光度法于波长220nm和275nm处，分别测定吸光度A^和A275，按公式（1）计算校正吸光度A,总氮（以N计）含量与校正吸光度A成正比1. Aj-2A275⑴四．主要仪器和试剂试剂和材料除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为无氨水① 无氨水每升水中加入0.10ml浓硫酸蒸馏，收集馏出液于具塞玻璃容器中也可使用新制备的去离子水。
20%氢氧化钠（NaOH）：称取20.0mg氢氧化钠溶于无氨水中，稀释至100mL碱性过硫酸钾（K2S2O8）：称取40.0g纯度大于99.99%的过硫酸钾溶于600ml水中228（可置于50C水浴中加热至全部溶解）；另称取15.0g氢氧化钠溶于300ml水中待氢氧化钠溶液温度冷却至室温后，混合两种溶液定容至1000ml,存放于聚乙烯瓶中，可保存一周② 硝酸盐氮标准溶液：500mg/L2. 硝酸盐氮标准使用液:10.0mg/L,准确移取上述标准溶液5mL,用无氨水稀释至250mL盐酸溶液：1+9浓盐酸：密度1.19mg/m3仪器和设备① 紫外分光光度计：10mm石英比色皿② 高压蒸汽灭菌器：最高工作压力不低于1.1〜1.4kg/cm；最高工作温度不低于120〜124C③ 具塞磨口玻璃比色管：25ml④ 一般实验室常用仪器和设备五．采样要求或样品与处理技术样品的采集和保存参照HJ/T91和HJ/T164的相关规定采集样品将采集好的样品贮存在聚乙烯瓶或硬质玻璃瓶中，用浓硫酸调节pH值至1〜2,常温下可保存7d贮存在聚乙烯瓶中，一20°C冷冻，可保存一个月水样的预处理取适量样品用氢氧化钠溶液或硫酸溶液调节pH值至5〜9,待测。
六．检测步骤1 校准曲线的绘制分别量取0.00、0.20、0.50、1.00、3.00、7.00mL硝酸盐氮标准溶液于25ml具塞磨口玻璃比色管中，其对应的总氮（以N计）含量分别为0.00、2.00、5.00、10.0、30.0、70.0pg加水稀释至10.00mL，再加入5.00mL碱性过硫酸钾溶液，塞紧管塞，用纱布和线绳扎紧管塞，以防弹出将比色管置于高压蒸汽灭菌器中，加热至顶压阀吹气，关阀，继续加热至120C开始计时，保持温度在120〜124C之间30min自然冷却、开阀放气，移去外盖，取出比色管冷却至室温，按住管塞将比色管中的液体颠倒混匀2〜3次注1：若比色管在消解过程中出现管口或管塞破裂，应重新取样分析每个比色管分别加入1.0mL盐酸溶液，用水稀释至25mL标线，盖塞混匀使用10mm石英比色皿，在紫外分光光度计上，以水作参比，分别于波长220nm和275nm处测定吸光度零浓度的校正吸光度Ab、其他标准系列的校正吸光度As及其差值Ar按公式（2）、（3）和（4）进行计算以总氮（以N计）含量（|Jg）为横坐标，对应的Ar值为纵坐标，绘制校准曲线人》讥0»275（2）AS=AS220_2AS275（3）Ar=As—Ab（4）式中：Ab——零浓度（空白）溶液的校正吸光度；Ab220——零浓度（空白）溶液于波长220nm处的吸光度；Ab275——零浓度（空白）溶液于波长275nm处的吸光度；As——标准溶液的校正吸光度；A220——标准溶液于波长220nm处的吸光度；A275——标准溶液于波长275nm处的吸光度；Ar——标准溶液校正吸光度与零浓度（空白）溶液校正吸光度的差。
样品的测定量取10.00ml试样于25ml具塞磨口比色管中，按照校准曲线的绘制步骤进行测定注2：试样中的含氮量超过70pg时，可减少取样量并加水稀释至10.00ml空白试验用10.0ml水代替试样，按照校准曲线的绘制步骤进行测定七．结果1结果计算参照公式（1）计算试样校正吸光度和空白试验校正吸光度差值Ar,在校准曲线上查出样品中总氮的含量ug数，总氮含量有按公式（5）进行计算Ar-a）fP=bV5）式中：p-试样中含氮的质量浓度，mg/L；Ar——试样的校正吸光度与空白试验校正吸光度的差值；a——校准曲线的截距；b——校准曲线的斜率；f—稀释倍数；V——试样体积，ml2结果表示当测定结果小于1.00mg/L时，保留到小数点后两位；大于等于1.00mg/L时，保留三位有效数字3结果与评价标准曲线：取8个25mL具塞比色管，按照下表配制标准系列，由低到高测定220nm和275nm时相对应的吸光度减去空白的吸光度绘制总氮（ug）的标准曲线符合r三0.999的要求见下表：编号1#2#3#4#5#6#7#8#A2200.0490.1020.1490.2460.3530.5520.7330.833A2750.0100.0090.0110.0090.0110.0170.0130.010A220-2A2750.0290.0840.1270.2280.3310.5180.7070.813Ar00.0550.0980.1990.3020.4890.6780.784含量（ug）05.0010.020.030.050.070.080.0检出限：对预检出限的2~5倍（配制浓度为0.04mg/L）进行7次平行测定，测得最低检出限值如下所示，都符合要求，具体见下表：编号1#2#3#4#5#6#7#A2200.0670.0680.0680.0710.0690.0710.072A2750.0080.0080.0080.0100.0080.0090.010A220-2A2750.0510.0520.0520.0510.0530.0530.052Ar0.0230.0240.0240.0230.0250.0250.024浓度(ug/mL)0.200.210.210.220.220.210.21SD0.007MDL0.022mg/L准确度：对GSBZ50026-94标准样品进行3次平行测定，测定总氮含量均符合要求：编号1#2#3#A2200.1350.1280.129A2750.0120.0090.009A220-2A2750.1110.1100.111Ar0.0820.0810.082浓度（mg/L）0.7960.8060.806平均浓度（mg/L）0.803真值（mg/L）0.778±0.066相对偏差3.2%精密度：对曲线低、中浓度进行7次测定，测的精密度。
符合低点RSD在10%以内和中点RSD在5%以内的要求见下表：编号1#2#3#4#5#6#7#A2200.1160.1110.1060.1050.1090.1090.107A2750.0140.0150.0130.0110.0100.0120.011A220-2A2750.0880.0810.0800.0830.0890.0850.085低点A值0.0590.0520.0510.0540.0600.0560.056TN浓度(ug/mL)11.49.979.7310.411.610.810.8A2200.3550.3610.3700.3740.3670.3430.371A2750.0120.0120.0160.0170.0170.0120.017A220-2A2750.3310.3370.3380.3400.3330.3190.337中点Ar值0.3020.3080.3090.3110.3040.2900.308TN浓度(ug/mL)10.210.510.510.510.39.8410.5低点精密度6.5%中点精密度2.4%加标回收率：分别对已知测定值的试样进行一定量的加标，得回收率，如下表所示达到在90%-110%之间的要求，具体见下表：编号1#2#3#4#5#A2200.4830.4870.4860.4800.485A2750.0090.0110.0090.0080.008/A220-2A2750.4650.4650.4680.4640.469Ar0.4360.4360.4390.4350.440加标前含量ug44.644.644.944.545.0加标里ug30.0加标后含量ug13.113.213.413.413.7回收率P105%105%105%104%104%八．项目小结1 分析人员具有上岗资格，有能力承担该项目分析。
2 TU-1810紫外分光光度计经过相关的计量部门检定合格，满足分析要求3 设施和环境条件均控制在15°C〜30°C，湿度＜85%条件下，满足环境要求4 运用该方法对总氮进行了标准曲线的绘制，检出限实验，精密度实验和准确度实验，加标回收实验，测定结果均达到要求综上所述，实验室有能力开展此项目。