阿莫西林的分析与检验1 阿莫西林化学式化学名为(2S,5R,6R)-3,3-二甲基-6[(R)-(-)-2-氨基-2-(4-羟基苯基)乙酰胺基卜7-氧代-4硫杂-1-氮杂双环[3,2,0] 庚烷-2-甲酸散水合物又名羟苄西林，是氨苄西林的衍生物2 药理特性：本品为半合成广谱青霉素，对革兰氏阴性菌如淋球菌，流感杆菌，百日咳杆菌，大肠杆菌，布 氏杆菌等作用强，对革兰氏阳性菌的作用与青霉素相同或稍低，其耐酸可口服但不耐酶，可产生抗药性3 性状：本品为白色或类白色粉末，味微苦，本品在水中微溶，在乙醇中几乎不溶，4 采用胶囊剂型的优势4.1 阿莫西林味微苦，将阿莫西林密封于胶囊内，可掩盖该药物的苦味，使其外形美观易于携带4.2 阿莫西林在一定条件的水溶液下不稳定4.2.1 可发生降解，引起聚合反应4.2.2水中有磷酸盐，山梨醇，硫酸锌，二乙醇氨等存在时，则会发生分子内成环反应，生成2，5吡嗪 二酮4.2.3 将阿莫西林包入胶囊中，可提高其对水分的稳定性，4.3 本品阿莫西林结构中有酚羟基，易发生自动氧化，在光热及重金属催化下，氧化反应加速，将阿莫西 林包入胶囊剂，可提高其对光线和空气的稳定性5 阿莫西林胶囊项下胶囊的检验，5.1 外观：胶囊剂应整洁不应有粘连，变形和破损现象，并应无异臭。
5.2 装量差异：除另有规定外，应取供试品 20 粒，分别精密称重后，倾出内容物，(不得损害胶囊壳)， 用小刷或其它适宜用具拭净，再分别精密称定囊壳重量，求出每粒内容物的装量，每粒的装量与平均的装量相比 较，超出装量差异，限度的胶囊，不得多于2粒，并不得有一粒超出限度值的一倍平均装量为0.3克以下的，装量差异限度为土 10%,平均装量为，0.3g或0.3g以上的，装量差异限度为 ± 7.5%5.3 崩解时限的检查 崩解时限的检查，采用生降式崩解仪，其主要结构为一能升降的金属支架与下端镶有筛网的吊篮，并附有挡板测定时使用胶囊剂在液体介质中，若胶囊剂漂浮在页面，可加挡板，阿莫西林胶囊剂应在30min内崩解， 如有一粒不能完全崩解，则另取6 粒重复试验，均应符合规定5.4 微生物限度检查阿莫西林为抗细菌口服抗生素制剂，应检查霉菌每1g中不得超过100个，因其对铜绿假单胞菌无效，还 应检查铜绿假单胞菌5.4.1 霉菌的检查5.4.1.1配制供试液：称取供试液10g置0.9%无菌氯化钠溶液100ml中，用匀浆仪或其它方法进行 混匀，作为供试液5.4.1.2 预处理:可采用以下方法Q稀释法：将供试液注入较大的培养集中，使该供试液稀释至不具抑菌作用的浓度。
Q离心沉淀集菌法：将规定量的供试液，离心（3000r /min）30min弃去上清液，留底部集菌液约2ml,再稀 释成原规定量的的供试液，如有不溶性药渣，可离心（500r/min） 5min,取全部上层液，再集菌处理Q薄膜过滤法：取定量供试液至稀释剂100ml中，摇匀，以无菌操作加入装有直径约50mm,孔径不大于 0.45um±0.02um微孔滤膜的过滤器内，减压抽干后，用稀释剂冲洗滤膜3次，每次50T00ml，取出滤膜备检5.4.1.3利用平皿菌落计数法，将供试液涂布在玫瑰红钠培养基上，在适宜的温度下进行培养，观察肉 眼可见的霉菌菌落数5.4.2铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）的检查5.4.2.1 检验程序：铜绿假单胞菌按增菌、分离、纯培养革兰氏染色镜检，及生化试验等步骤进行检查5.4.2.2检查方法：取胆盐乳糖培养基3份，每份100ml,两份分别加入规定量的供试液，其中一份入 对照菌液作为阳性对照，第3份加入与供试液等量的稀释液作为阴性对照培养18-24h阴性对照应无菌生长，其 余2份培养液划线接种于溴化十六烷基三甲铵琼脂培养基平板上培养18-24h，当阳性对照的平板呈阳性菌落时， 供试品的平板无菌落或无疑似菌落的生长，可判未检出铜绿假单胞菌。
铜绿假单胞菌典型菌落呈扁平，无定形，周边扩散，表面湿润，灰白色，周围时有蓝绿色扩散如生长菌 落具有上述特征或疑似者，应挑选2-3个菌落，分别接种于营养琼脂培养斜面上，培养18-24小时取培养物做 革兰染色，并作氧化酶试验如革兰阴性杆菌、氧气酶试验阳性，及绿脓菌素试验阳性，可判检出铜绿假单胞菌绿脓菌素阴性的培养 物，应继续做硝酸盐还原产气实验、42r生长实验、明胶液化实验均为阳性时，应判检出铜绿假单胞菌6 阿莫西林的检验6.1 比旋度：旋光度的测定由旋光仪测定，物质的旋光度与物质的分子结构有关外，还随测定时所用的浓 度盛液管的长度、温度光的波长以及溶剂的性质等而改变其与比旋光度[a]t有下列关系式[a]t = a /CL式中，a为为由旋光仪测得的旋光度；入为所用光源的波长；t为测定时的温度；c为溶液的浓度，以 每毫升所含溶液的克数表示；L为成也管得长度，dm当C和L都等于1时，贝J[a ]= a因此旋光度的定义是： 在一定温度下，光的波长一定时，以1ml中含有1g溶质的溶液，放在1dm长的盛液管中测出的旋光度本品需精密称定，加水溶解并稀释成每1ml中含2mg溶液，放入旋光仪测定，依公式算出比旋度在+290° -+315°为合格。
6.2 鉴别试验6.2.1 钠盐的焰色反应;将其在物色火焰中燃烧显黄色6.2.2呈色反应：Q羟月亏酸铁反应：该药在稀酸中与高铁离子呈色◎茚三酮反应：该药与茚三酮显蓝 紫色⑥与费林试剂反应：本类药物具有类似肽键（-CONH-）结构，可产生双缩脲反应开环分解，使碱性酒石酸铜 盐还原显紫色变色酸硫酸呈色反应：阿莫西林加变色酸硫酸试剂混合后，于150r加热2-3min，因分解出甲 醛与变色酸缩合呈深褐色6.2.3 沉淀反应：在稀盐酸中生成白色沉淀6.2.4 本品红外光吸收图谱应与对照谱一致6.2.5 在含量测定下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应于对照片溶液主峰的保留时间一 致6.3 检查6.3.1 酸度：采用电位测定溶液的 PH 值，其中玻璃电极是作为测量溶液中氢离子活度的指示电极而饱 和甘汞电及作为参比电极在实际测定中试样的PH是同已知PH的标准缓冲液相比求得的在相同条件下，若标准 缓冲溶液的PH为PH标，以该缓冲液组成原电池的电动式为E标，则有公式：PH ^=PH标+ （E-E标）F/2.303RT,（R、T、F）均为常数，上式为按实际操作方式对水溶液PH的实用定义亦称为PH标度。
因此用电位法以PH计测 定时，先用标准缓冲溶液定位，然后可直接在PH计上读出PH试依上法取本品加水制成5mg/lml的溶液，在50°C水浴中微温使溶解后，进行测定PH应为3.5-5.56.3.2溶液的澄清度Q方法：取本品五份，各l.Og分别加0.5mol/L盐酸溶液10mL及2mol/L氨溶液 10mL溶解后，立即观察，溶液均应澄清，如显浑浊，与2号浊度标准液比较，均不得更浓Q2号浊度标准液配 制:称取105C干燥至恒重的l.OOg硫酸肼，置100mL容量瓶中，加水适量使溶解，并用水稀释至刻度，摇匀，放 置4-6h取此溶液与等量的10%乌洛托品溶液混合，摇匀，于25C，避光放置24h即得取配置标准液10.0ml水 90ml，充分摇匀即得6.3.3 水分6.3.3.1 取本品，照水分测定法中费休氏容量滴定法测定，含水分不得超过16%6.3.3.2 容量滴定法：本法是根据碘和二氧化硫在吡啶和甲醇溶液中，能与水起定量反应的原理以测 定水分所用仪器应干燥，并能避免空气中水分的侵入，测定操作已在干燥处进行费休氏试液的制备与标定Q制备：称取碘（置硫酸干燥器48小时以上）110g,置干燥的具塞锥形瓶 中，加无水吡啶160mL，注意冷却，振摇至碘全部溶解后，加无水甲醇300mL，称定重量，将锥形瓶置水浴中冷 却，在避免空气中水分侵入的条件下，通入干燥的二氧化碳至重量增加72g再加无水甲醇使成1000mL，密赛摇匀， 在暗处放置24小时。
本液应遮光密封，置阴凉干燥处保存临用前应标定浓度0标定：用水分测定仪直接标 定获取干燥的具塞玻璃瓶，精密成入重蒸馏水约30mg除另有规定外，加无水甲醇2-5mL，在避免空气侵入的条 件下，用本液滴定至溶液呈浅黄色变为棕黄色，或用永停滴定法指示终点；另作空白试验按下式计算： F=W/（A-B） 式中：F为每1mL费休氏试液相当于水的重量mg； W为称取重蒸馏水的重量mg； A为滴定所消耗费 休氏试液的容积ml； B为空白所消耗费休氏试液的容积ml测定法：精密称取供试品适量（约消耗费休氏试液1-5ml）除另有规定外，溶剂为无水甲醇，可用水 分测定仪直接测定，或将供试品置干燥的具塞锥形瓶中加溶剂2-5ml，在不断振摇（或搅拌）下，用费休氏试液 滴定至溶液由浅黄色变为红棕色，或用永停滴定法指示终点，另作空白试验按下式计算：供试品中水分含量（%） = （A-B）F/WX 100%式中：A为供试品所消耗费休氏试液的容积ml； B为空白所消耗费休氏试液的容积ml； F为每1ml费 休氏试液相当于水的重量mg； W为供试品的重量mg6.3.4溶出度：取本品至于溶出仪的吊篮中在37C±0.5C的恒温下，以水900毫升为溶出介质转速为 每分钟100转操作，经45min时取溶液适量，滤过，精密称取续滤液适量,用溶出介质稀释成每1毫升中约含130ug 的溶液，照紫外-可见分光光度法，在 272nm 的波长处测定吸光度；另取装量差异下的内容物，混合均匀，精密 称取适量，（约相当于平均装量），按标示量加溶出介质溶解并稀释每1ml中约为130ug的溶液，滤过，取续滤液 作为对照溶液，同法测定，计算每粒溶出量，限度为80%应符合规定。
6.3.5有关物质：取本品的内容物适量精密称定，用流动相A溶解并制成每1ml中含2mg的溶液，滤过， 取续滤液，作为公司品溶液，另取阿莫西林对照品适量，精密称定，用流动相A溶解并定量稀释至每1ml中含20ug 的溶液作为对照液照高效液相色谱法，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相A为0.05mol/L磷酸盐缓冲 液,取0.05mol/L磷酸二氢钾溶液，用2mol/L氢氧化钠溶液调节PH至（5.0）-乙腈（99： 1 ）流动相B为0.05mol/L 磷酸盐缓冲液，（PH 5.0）-乙腈（80:20）流速为1.0ml/min检测波长为254nm，先以流动相A-流动相B （92： 8） 等梯度洗脱，待阿莫西林峰洗脱完毕后，立即按下表进行线性洗脱，理论板数按阿莫西林峰计算不低于2000，取 对照溶液 20ul 注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的 20%-25%，再精密称取供试 品溶液和对照溶液各20ul，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，供试品溶液的色谱图中有杂质峰，单个杂质峰面 积不得大于对照溶液主峰面积 1.0%，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的三倍（3。
0%）供试品溶液 中任何小于对照溶液主峰面积 0.05 倍的峰可忽略不计时间（分钟）025404155流动相 A%92009292流动相 B%8100100886.4含量测定：取装量差异项下的内容物，混合均匀，精密称取适量（约相当于阿莫西林0.125g）加流 动相溶解并稀释成每lml中约含0.5ug的溶液，滤过，取续滤液色谱条件与系统适应性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶，为填充剂，以 0.05mol/L 磷酸二氢钾溶液（用2mol/LK0H溶液，调节PH至5.0）-乙腈（97.5： 2.5）为流动相，流动相每分钟lml,检测波长为254nm，理论 塔板数按阿莫西林峰算不得少于2000测定法取本品25mg精密称定，至50mL量瓶中加流动相溶解并定量稀释至刻度。