0845051089药学一班陈秋娟紫 外 分 光 光 度 法 测 定 维 生 素 B1 片 含 量 以 及 方 法 证 验紫外分光光度法测定维生素B片含量以及方法验证1班级：08 级药学一班 姓名：陈秋娟 学号：0845051089［摘要］目的：采用紫外分光光度法对维生素B片含量进行测定及此方法的验证1方法：运用紫外分光光度法在入=246nm处测定吸光度，并运用百分吸收系数（e 1% ）法（标示量（％） =AXDX W 平均 X e 1% _1XX W _1X标示量100%1 cm 1 cm和对照品比较法进行计算结果：该维生素B片维生素B含量：用百分吸收系数（e 1%）法计算标示量1 1 1 cm（%）为 93.05%；对照品比较法计算标示量（%）为 94.33%；用标准曲线法计算 标示量为102.87%实验方法验证：维生素B片含量为7.5》g/ml ~ 17.5卩g/ml 时,维生素B浓度与吸光度成良好的线性关系;平均回收率（%）为103.53%； RSD（%）1为 1.17%结论：紫外分光光度法对本实验测定专属性好，并且方法简单易操作该维 生素B片维生素B含量为93.05%,符合本品含维生素B （C H ClN OS.HCl）应1 1 1 12 17 4为标示量的90.0%~ 110.0%的规定为合格。
维生素 B 紫外分光光度法 含量测定1［实验内容］（一）1、仪器与试药电子天平（XX公司，编号：XX）, XX紫外分光光度计（编号：XX，厂家：XX） 维生素B1 （批号：XX，生产厂家：XX公司），维生素B1对照品（精制原料，由中 国药品生物制品检定所提供，批号：xx）, 辅料空白（根据维生素B1片处方工艺配制），盐酸溶液（9-1000）,纯化水 2、处方分析：组成处方量（g）比例（%）维生素B11016.39淀粉2032.78糊精3049.18硬脂酸镁1.01.639生产1000 片根据处方量分析，维生素B含16.39%，辅料含83.61%平均片重约61mg， 1取相当于25mg维生素B的片粉约0.15g13、收波长的选择 维生素B1在PH=7时的吸收光谱上有两个吸收峰：232 — 233 nm、266 nm；在PH = 2时为吸收峰为246nm维生素Bl在246 nm的吸收峰干 扰因素少，吸收又最强，《中国药典》（2010年版）规定以246 nm处吸收峰的 百分吸收系数（421）为计算含量依据维生素 B1 片辅料紫外扫描图 维生素 B1 片紫外扫描图维生素 B1 对照品紫外扫描图二）、测定方法：分阻HI'I-肠 EtRTO-Hhal蛰应.-V沁维生素B1对照品、片剂和辅料紫外扫描图取供试品20片，精密称定，研细，称取片粉适量（约相当于维生素B 25mg）,1置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9-1000）约70ml，振摇15min使维生素B溶解, 1再加盐酸溶液（9-1000）稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤 液5ml，置另一 100ml量瓶中，加盐酸溶液（9-1000）稀释至刻度，摇匀，照 分光光度法，在246nm的波长处测定吸收度，按C H ClN OS.HCl的吸收系数（e 1%）12 17 4 1cm为 421 计算，即得。
三）、方法验证1.线性和范围精密称取维生素B对照品约25mg,置100 ml量瓶中，加盐酸溶液（9-1000）1溶解并稀释至刻度，制备成含维生素B 250p g/ml的对照溶液分别精密量取 该溶液3、4、5、6、7ml置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9-1000）稀释至刻度, 摇匀，即得系列浓度的对照品溶液，照分光光度法，在246nm的波长处测定吸收 度，以吸收度（A）对浓度（C）回归处理，得标准曲线和回归方程标准曲线*系列1—线性（系列1）标准曲线测定数据12345浓度7.51012.51517.5吸收度0.2720.3710.4840.5740.6772 10°ay = 0.0405x - 0.0309 , , , ,R2 = 0.99915 10 15 20对照品溶液浓度（p g/ml）2. 回收试验（准确度试验）对照品溶液的制备：对照品溶液的制备，同2.1项下供试品溶液的制备：精密称取维生素B精制原料约0.25g，置50ml量瓶中,1加入盐酸溶液（9—1000）稀释至刻度，摇匀，制成5.0mg/m维生素B溶液储备1液；分别精密量取该溶液4、5、6ml置已加入比例量辅料（0.15g, 1/100天平）的100ml量瓶中（一式三份），加盐酸溶液（9—1000）约70ml，振摇使之溶解,再加盐酸溶液（9—1000）稀释至刻度，滤过，精密量取续滤液5ml，置另一 100ml量瓶中，摇匀，得高、中、低三种浓度的试验溶液，照分光光度法，在246nm的波长处测定吸收度，用对照品比较法计算含量。
吸收 加入浓度 测定浓 回收率 均值 RSD（%）度(M g/ml)度(Ug/ml)(%)(%)RSD(%)(A)0.3941010.49104.9%低0.3941010.49104.9%104.9%0%0.3941010.49104.9%0.48812.512.81102.48%中0.49012.512.86102.88%102.61%0.278%1.17%0.49012.512.48102.88%0.5961515.48103.2%高0.5951515.45103%103.07%0.112%0.5951515.45103%3、精密度试验取供试品 20 片，精密称定，研细，称取片粉适量（约相当于维生素 B 25mg）， 1一式5份，置100ml量瓶中，加盐酸溶液（9-1000）适量，振摇15min,再加 盐酸溶液（9-1000）稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，置另一 100ml 量瓶中，加盐酸溶液（ 9-1000）稀释至刻度，摇匀，即得约含维生素B 12.5mg/ml 的供试品溶液1另取维生素B对照品适量，用盐酸溶液（9-1000）稀释制成12.5p g/ml1的对照品溶液。
照分光光度法（ChP2005二部附录IVA）在246nm处分别测定供 试品溶液和对照品溶液的吸光度，用百分吸光度和对照品比较法分别进行计算， 即得编号12345对照品质量（g）0.17160.17140.17150.17170.171712.5》g/ml吸光度（A）0.4900.4870.4870.4900.4900.519⑴百分吸收系数编号12345测定含量（%）93.25%92.78%92.73%93.34%93.34%平均含量（%）93.05%RSD(%)0.274%⑵对照品比较法编号12345测定含量(%)94.55%94.08%94.03%94.49%94.49%平均含量(%)94.33%RSD(%)0.266%⑶标准曲线法编号12345测定含量(%)103.04%102.57%102.51%102.97%102.97%平均含量(%)102.81%RSD(%)0.244%(四)实验讨论1、精密度系指在规定的测试条件下，同一个均匀供试品，经过多次取样测定所 得结果之间的接近程度，一般用偏差d、标准偏差SD、相对标准偏差RSD来表示 2、精密度验证内容包括重复性、中间精密度和重现性。
重现性：在较短时间间 隔内1、 内外标法的异同：⑴相同点：内、外标法皆采用峰面积法来测定供试品中主 成分的含量；⑵内标法在配制对照品溶液和供试品溶液时加入了内标物，其可以 避免样品进样前处理或进样体积误差对测定结果的影响；外标法没有加入内标 物，则应要求进样量的准确控制，当用外标法定量测定时，以定量环会自动进样 器进样为好2、参考文献：刘文英•药物分析[M].人民卫生出版社.第六版吴勇，成丽•现代药学实验[M].四川大学出版社.2008.5李发美•分析化学[M].人民卫生出版社.2005高洁，朱永琴.紫外分光光度法测定维生素B1含量[J].中国科技博 览2009（30高雅杰•维生素B1片含量测定方法的验证[J].按摩与康复医学（下 旬刊）2010（8）。