浙江大学硕士学位论文不同病理类型肺癌细胞中PLK1基因表达水平的研究姓名：胡蕙蕙申请学位级别：硕士专业：内科学（呼吸系病）指导教师：应可净20060401浙江大学硕士学位论文不同病理类型肺癌细胞中P L K l 基因表达水平的研究浙江大学医学院2 0 0 3 级硕士研究生导师中文摘要内科学( 呼吸病学)胡蕙蕙应可净研究背景和目的肺癌是目前世界上最常见的男性恶性肿瘤，占全部恶性肿瘤的1 6 ％，恶性肿瘤死亡的2 8 ％，严重威胁人们健康和生命目前肺癌最有效的治疗方法仍然是手术，但有研究表明近7 0 ％的肺癌患者就诊时就失去了手术机会因此进一步寻找早期诊断及有效的治疗方法，改善肺癌的预后仍是目前急待解决的一大难题，是目前医学研究的重要课题之一分子生物学及免疫学的进展使得人们认识了很多与肿瘤的发生发展密切相关的功能基因，而其中影响肿瘤增殖功能的基因逐渐引人瞩目近年来，研究发现p o l o 家族在细胞的有丝分裂中起着广泛的调节作用存在于真核生物中的p o l o 家族成员包括P I K l 在内，均不同程度地与细胞有丝分裂相关，显示出以结构保守为基础的功能保守p L K l 与细胞周期密切相关，P u ( 1 在表达量、活性及驻细胞定位方面呈周期性的特点。
多项研究表明，在大多数人类肿瘤中P Ⅸl 均表现为高表达，且P L K l 的过高表达在一些肿瘤患者中均提示预后不良与其他增殖性标志或癌标志相比，P L K l 对于预测肿瘤患者的预后和早期癌症诊断均有显著意义；而通过不同方法抑制P L K l 基因表达后，肿瘤细胞增殖功能产生变化，预示P L K l 可能是一个新的肿瘤标记物，成为肿瘤基因治疗的～个新的靶点浙江大学硕士学位论文图表明小细胞肺癌高于非小细胞肺癌该实验结果提供建议性但不确定的结果另外，用细胞计数法计算对数生长期两种肺癌细胞株的细胞倍增时间，结果显示小细胞肺癌细胞株N c I —H 4 4 6 的细胞倍增时间短于腺癌细胞株A 5 4 9 再对两种细胞株的P L K l 删A 表达进行比较分析，N c I —H 4 4 6 的P L K l m R N A 表达的平均值为0 ．2 3 8 ±O ．0 5 3 ，非小细胞肺癌细胞株A 5 4 9 的P L K l m R N A 表达的平均值为O ．1 2 9 ±0 ．0 4 6 经独立样本t 检验，小细胞肺癌细胞株组与非小细胞肺癌细胞株组的P L K l m R N A 表达有统计学上的差异( t 一3 ．8 3 0 ，P = O ．0 3 ) ，P L K l 的表达与肺癌细胞株的细胞倍增时间呈反相关性。
结论1 ．肺癌活检组织中p L J 【1 m R N A 表达明显高于肺部良性疾病组，提示P Ⅸ1 可能是一个潜在的肺癌肿瘤标记物2 ．肺癌活检组织中小细胞肺癌与非小细胞肺癌的P L K l m 甜q A 表达水平不存在显著差异，但荧光强度b o xp l o t 分布图表明小细胞肺癌高于非小细胞肺癌，实验结果提供建议性但不确定的结果，需更多的标本量来进一步证实3 ．不同肺癌细胞株之间P 【蒇1 m R N A 的表达水平在细胞倍增时间短的N C l ．H 4 4 6细胞株中高于细胞倍增时间长的A 5 4 9 细胞株，提示P u 【1 的表达可能与细胞的增殖活性有关4 ．P L K l 在肺癌组织中高表达，使其可能在肺癌的基因治疗中可特异靶向肿瘤细胞，并推测其治疗疗效可能与肺癌的病理类型相关需要进一步的研究来证实x浙江大学硕士学位论文E x p r e s s i o no fP o l o - H k el 【i n a s e1 ( P L K l )I nD i f f e r e n tP a t h o l o g i c a lC a s i 矗c a t e dL u n gC a n c e rR e s p i r a t o r yA p a r t 鹏n l ，t h eM c d i c a lC 0 l l c g eo fz h e j i a n gU n i v c r s i t yP o s t g r a d u a t e ，G r a d e2 0 0 3 ：H uH u i h u iB a C k g r O u n dS u p c r v i s o r ：Y i n gK c j i n gA B S T f 蛳TP f i m a r yb r o n c h i a lc 蛐c e r ( 1 u n gc a n c e r ) i so n eo ft h em o s tf r e q u e n tm a l em a l i g n 锄td i s e a s e ，as e f ! i o u st h r e a tt oh u m a nh e a d t ha n dl i f e ，w h i c ha c c o u n t sf o r1 6 ％o ft o t a lm a l i g n 粕tn e o p l a s ma n d2 8 ％0 fm o r t a l i t y 丘o mm a l i g n a I l tn e 叩l a s m ．灿t h o u g hs u 穆e r y 扭t l l em ∞tr e l i a b l et r e a t m e n ls o 蛾a ni n V e s t i g a t i o nh a si I l d i c a t e dt h a t7 0 ％o fp a l i e n t sw i t hl u n gc a n c e rh a v ea l r e a d y1 0 s tI h es u 毽e r y0 p p o m m i t yw h e nt l l e yr c c e i v e dm e d i c a le x a m i n a t i o n s ．1 1 l e r e 】的r e ，i ti so n co ft h em o s t 耐t i c a lp r o b l e m sa n dp r o j c c ￡st oi d e n t i 母e a n yd i a 罢皿o s e s ，c l e a t ee 任色c ￡沁et r e a t m e n t s ，a n di m p r o v ep r o g n o s e Sf o rl u n gc a n c e f iA m o n gt h e m ，t h cg e n e st h a ta 朊c tt u m o rp r o l i f e r a d o na r em o r en o t i o e a b l e ．I nr e c e n ty e a r s ，s o m er e s e a r c 量ls h o w e dt h a ¨h ep o l of a m i l ye x h i b i t sac o m p r e h e n s i v er e g u l a t i o ni I lc e l l u l 盯m i t o S e s ．M a n ys t u d i e sd e m o n s t r a t e da5浙江人学硕士学位论文s t a t i s ￡i c a ld i f f e f e n c eb e t w | e e nt h eP U 【1m R N Ae x p r e s s i o no f 柳oc c l ll i n e s( t = - 3 ．8 3 0 ，p = O ．0 3 ) ．C o 撕臼u s i 硼sn ep L K lI n | 蕞N Ae 坤r c s s i o no fl u n gc a n I c c fs p e c i m e n si ss i g n i f i c a n t l yh i g h e fm a nt h a to fl u n gb e n i g nd i ∞勰es p e c i m e n s ，w h i c l li n d i c a t e st h a tP ：L K lm i g h tb eap o t e n t i a lt I I m o rm a r k e ro fh m gc a n c er ．髓c r ci sn os 珈诚c a l l td i 峨r c n c eo fp L K lm R N A 唧赡豁i o nb e t w e e nS C I C 柚dM §C L C ，b u tt h ef l u O ∞s c c n tq u a l l t ix浙江人学硕士学位论文不同病理类型肺癌细胞中P L K l 基因表达水平的研究浙江大学医学院2 0 0 3 级硕士研究生导师前言内科学( 呼吸病学)胡蕙蕙应可净肺癌是目前世界上最常见的男性恶性肿瘤，占全部恶性肿瘤的1 6 ％，恶性肿瘤死亡的2 8 ％，严重威胁人们健康和生命。
目前肺癌最有效的治疗方法仍然是手术，但有研究表明近7 0 ％的肺癌患者就诊时就失去了手术机会目前，多学科综合治疗的概念的提出和实施，外科手术及、放疗、化疗等治疗方法的改进使得肺癌的预后有了一定的改善但总体来讲，大多的肺癌患者的生存率仍很低，预后不理想因此进一步寻找早期诊断及有效的治疗方法，改善肺癌的预后仍是目前急待解决的一大难题，是目前医学研究的重要课题之一分予生物学及免疫学的进展使得人们认识了很多与肿瘤的发生发展密切相关的功能基因，而其中影响肿瘤增殖功能的基因逐渐引人瞩目为探索特异的有效的肿瘤标记物，国内外已展开了大量的实验研究研究肺癌细胞生长的关键调节基因，并采用有效豹方法“封闭”这些基因，无疑将是肺癌基因诊断治疗的关键途径，也是目前医学研究的热点近年来，研究发现p o l o 家族在细胞的有丝分裂中起着广泛的调节作用存在于真核生物中的p o l 0 家族成员包括P L K l 在内，均不同程度地与细胞有丝分裂相q浙江人学硕士学位论文关，显示出以结构保守为基础的功能保守P L K l 与细胞周期密切相关，P L K l 在表达量、活性及亚细胞定位方面呈周期性的特点1 1 】f 2 】。
其表达量在增殖细胞G l 期几乎不能探及，在S 期开始积蓄，于G 2 末期达到峰值，M 期维持高水平，分裂完成后急剧下降；与此对应，P L K l 活性在G 2 ，M 转换期及M 期达到峰值，在分裂间期则明显降低多项研究表明，在大多数人类肿瘤中P L K l 均表现为高表达，且P L K l 的过高表达在一些肿瘤患者中均提示预后不良与其他增殖性标志或癌标志相比，P L K l 对于预测肿瘤患者的预后和早期癌症诊断均有显著意义；而通过不同方法抑制P L l 【1 基因表达后，肿瘤细胞增殖功能产生变化，预示P L K l 可能是一个新的肿瘤标记物，成为肿瘤基因治疗的一个新的靶点w b l fG 1 3 垮采用卜缸h 嘲b 1 0 t 方法检测姐荩1 在肺癌中表达发现：在大多数非小细胞肺癌( N s C 【C ) 的组织标本中P U 【l 表达增高，而正常肺组织则表达水平很低，而且高表达的肺癌患者5 年生存期明显低于P I K l 低表达者( 2 4 ．2 ％：5 1 ．8 ％，P = 0 ．0 0 1 ) ，认为P L 版1 可以作为N S C L C 的一个独立的预后标志物而S p a n k u c h ．s c h m i t IB 1 4 1 等检测P L K l 基因在转染S i R N A 后的肺癌细胞株A 5 4 9 ，发现只需要极低剂量的S i 】卧姨将明显的降低P t K l 基因m m 旺A 和蛋白表达水平。
在Y u 锄J 的研究认为p L K l 的表达水平升高通常在快速增殖的细胞中更为常见不同病理类型的。