一、实验目的人工使病原物与寄主植物感病部位接触,创造条件使病原物侵入 并诱致寄主发病叫接种,接种是证病过程的重要步骤,在研究寄生现 象发病规律,测定品种抗病性,药剂防病效果时都需要接种因此, 接种是植病工作者必须掌握的基本技术环节植物病害人工接种方法,是根据病害的传染方式和侵染途径设计 的,植物病害的种类很多、其传染方式和侵染途径各异因此接种方 法也不相同本次实验以玉米大斑病,小麦根腐病,小麦秆锈病,梨 褐腐病等为内容学习常用的接种方法二、内容、材料和方法(一)拌土法(小麦根腐病)拌土法适于土壤传染的病害,方法是将消毒的土壤分别装入两个 小花盆中,其中一盆表层覆以一厘米厚的菌土,菌土是用玉米砂培养 菌 1 份加消毒土 5 份混合而成,另一盆不接种(不覆菌土)作为对照 将经%升汞表面消毒3 分钟并用无菌水洗3次的小麦种子,分别播种 在两个花盆内,插上标牌,注明接种日期,方法病害名称及接种人姓 名,花盆放在室温下,浇水保湿,遮阴管理,待幼苗出土展开叶子后 (大约一周),观察并记载根腐病发生情况二)喷雾法(玉米大斑病) 气流及雨水传播的病害常用此法接种,将培养好的玉米大斑病的斜面 菌种一支,用移植钩刮于装有100 毫升无菌水的三角瓶中,用力振荡, 待孢子洗下后,以纱布过滤,并于滤液中加入0.1 克中性肥皂,即成 孢子菌丝悬液,用卫生喷雾器均匀喷布在麦苗上。
同时设一不喷菌液 而喷无菌水的作对照,用塑料罩保湿48小时,揭布后正常管理,7 天后作发病调查三)涂抹法(小麦秆锈病)这也是气流传播的病害常用的接种方法,用于禾本科锈病接种 方法是用姆指沾锈菌夏孢子悬液自下向上轻轻涂欲接种的小麦叶片, 也可先用手指沾水摩擦叶片,使叶表有一层水膜,然后将夏孢子粉抹 在上面,以不涂抹孢子悬液或孢子粉的作为对照塑料罩保湿48小 时后揭布,正常管理,7天后作发病调查四)创伤接种法(白菜软腐病及梨褐腐病) 创伤接种法是伤口侵入的弱寄生菌常用的接种方法1.白菜软腐病:取切成适当大小的白菜帮两块、经水洗,待水稍 干后,以10%漂白粉溶液作表面消毒,分放在两个灭过菌的上下铺有 吸水纸的培养皿中,用酒精擦过的玻璃棒顺着白菜帮打三排不穿透的 孔穴将培养好的白菜软腐病菌斜面菌种的菌苔以无菌水洗下作成菌 悬液然后,先以灭过菌的兽用注射器吸取无菌水滴于菜帮的第一排 内孔作为对照,再用该注射器吸菌液滴于第二、三排孔内注意无论 无菌水、还是菌液都不要滴的过多以免流出孔穴,另一培养皿的菜 帮以同法处理作为重复盖好皿盖,置于26—28°C的温箱中,24小 时后检查发病情况2.梨褐腐病:取白梨以酒精火焰表面消毒后,用炽热的解剖刀, 在其上切成小手指粗的孔穴3—5个。
取经分离纯化的梨褐腐病菌菌 落填抹在已切好的孔穴中,再复以饱含无菌水的脱脂棉或纱布,放在 密封的干燥器或标本瓶中,干燥器或标本瓶底部装些水,再将干燥器 或标本瓶放于25°C的温箱中,以未接菌的作为对照,3天后作发病调 查三、 接种试验的观察和记载认真观察和记录是做好接种试验的重要环节,为了及时正确地分 析总结试验结果,必须认真观察并做详尽的记录,如记录接种时间, 接种植物、品种、接种方法、部位、接种用的病菌名称(包括菌系和 生理小种)、来源、繁殖和培养方法(培养基、培养温度、培养时间)、 接种体浓度、接种的方法和步骤及接种后的管理等四、 作业提交接种试验报告一份(以一种病害接种结果为题材,试按试验 的目的意义,试验材料和方法、试验结果及结果分析和讨论等格式来 写)五、 思考题植物接种常用的方法有哪些? 举例说明如何根据病害特点选择 接种方法?附:玉米粉砂培养基玉米粉砂培养基,常用于繁殖真菌接种土壤玉米粉 1000克 洗净的砂1000克水 1500毫升玉米粉和砂加水混合后,在不加压的蒸馏锅中蒸1 小时,取出分成小块装在三角瓶中,121°C灭菌2小时。