单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,实训十,结核分支杆菌检验,一、实验目的,通过学习结核分支杆菌检验方法，为综合实训奠定基础二、能力要求,学会结核分支杆菌检验方法，熟练其操作技能三、实训内容,（一）实训准备,1,、菌种,BCG,模拟患者痰标本,2,、试剂,40g/L NaOH,萋,-,尼染色液,3,、其他 显微镜等,（二）步骤和方法,1,、直接厚膜涂片法：挑取经加入,40g/L NaOH,消化的模拟结核患者痰液，直接涂于玻片上，均匀抹,2.0cm2.5cm,大小的卵圆形痰膜，等痰膜干燥后，再涂一层，制成厚膜涂片自然干燥，酒精灯外焰固定，经抗酸染色，显微镜观察结果,步骤简化：,用滴管取,12,滴模拟标本，直接涂于玻片上涂成,2.0cm2.5cm,大小的卵圆形痰膜,干燥固定,抗酸染色,镜检,先用低倍镜或高倍镜找到视野,加油观察,蓝色背景中找红色,备注：,TB,耐酸耐碱，所以标本可用酸或碱处理去除杂菌再涂片镜检；一般取晨痰、即时痰、夜间痰三份痰液标本实际工作中不能用油镜直接接触涂片，以免,TB,污染镜头，医院检验用玻片为一次性，学校玻片可反复使用，因为实验标本为模拟标本,3,、染色,初染：,将已经固定的涂片置于染色架上,滴加,石炭酸复红,在玻片下方以微火加热至出现蒸汽（切勿煮沸烧干，染液将要干时要随时添加如此维持,5min,）冷却后,水洗。
脱色：,用,3%,盐酸乙醇,脱色至玻片上,无红色,为止，但,不可超过,10min,，水洗复染：,用,吕氏美篮,复染,1min,，水洗待干，镜检结果观察与报告方式,在淡蓝色背景下可见染成红色的细长微弯的杆菌，为抗酸性细菌，其他细菌和细胞被染成蓝色。