蝴蝶兰的组织培养兰科花卉组织培养蝴蝶兰茎尖培养 花梗侧芽的培养蝴蝶兰杂交授粉技术主要内容兰科花卉组织培养兰花系兰科植物，在自然条件下主要靠分株 繁殖，繁殖率一年只有几倍，所以无法大量繁殖 生产，只有用组织培养方法进行大量繁殖蕙兰春兰西神梅 小皇帝 林歌 蝴蝶兰产业发展的基本概况蝴蝶兰原产我国台湾,以及东南亚的菲律宾、泰国、 马来西亚、印度等地的南亚热带雨林区,我国的台湾、 云南和西藏的南部是其自然分布的北限蝴蝶兰全部为附生植物,原生种约70多个,但经近百 年来的杂交育种,品种已上万种,成为花卉世界的一个大 家族1、茎尖兰花组织培养大多用茎尖和花序上的芽，因为叶片培养 的植株变异较大，难以控制以茎尖培养，要选择生长旺盛的植株，切下茎顶端2～3 厘米长的一段，若茎长而巨大，亦可切下5～8厘米或更长先 用无菌水清洗干净，除去残留的鞘、叶基等，再在70% ～75% 酒精中浸泡10 ～30秒，取出后在5% ～10%漂白粉溶液中浸10 ～ 15分钟，再用无菌水冲洗干净然后在无菌解剖镜下剥掉 幼叶，用小刀切取小芽块蝴蝶兰.接种 茎尖接种以固体培养基为好，但因属而 异，如蕙兰属在液体培养基培养形成原球茎后则 用固体培养基进行继代培养，而卡德兰属和石斛 属这一类易变褐枯死的属，以在液体培养基为好 。
继代培养接种后1~2个月培养的茎尖即可形成原球茎球 状体，以后即发芽生根长叶应在其发芽前把它切 成小块进行转移，让它继续不断地形成原球茎球状 体这样连续的进行继代培养，短时间可以得到大 量的原球茎球状体兰花培养成功的关键，首先是形成无性繁殖系原球茎 国兰原球茎的增殖2、花梗侧芽的培养(1)采芽 将带腋芽的花梗进行冲洗，用10％的漂白粉 溶液表面灭菌20min，除去腋芽的苞叶，再在5％的漂白 粉溶液中表面灭菌3min，无菌水冲洗净 (2) 带腋芽花梗组织，接种到培养基上（133页）当兰花开花约一个月后，大 多选取已开有少数花的健壮 花序，切取带有花梗和芽的 节段(3)培养基和培养条件 诱芽培养基：MS+BA3 诱导原球茎：MS+BA5+NAA0、5 增殖：MS+BA3+NAA0、2+活性炭1.5克/L 生根：1/2MS+BA1+NAA0.5 PH：5.4 培养条件是光照强度2000Lx，光照时间每天13h，保持恒 温25℃ 生根之前可以进行过渡培养，不加激素试管苗的移栽用苔藓作基质3、蝴蝶兰杂交授粉技术------------钟士传研究成果培养意义兰花的种子极小，一个朔果中有1300~400000粒种子。
薄薄 的种皮包着分化不完全的胚，没有胚乳，所以与其他植物种子 不同，很不容易发芽 通过无菌播种，能在短期内获得大量无菌苗，并已成为工厂化 育苗的重要途径，同时也是杂交育种培育新品种的重要途径 在实践上有很大的价值因兰花有性杂交很容易，所以通过无菌发芽培养，简化了 发芽育种技术，也就促进了兰花的杂交育种工作原 生 种 蝴 蝶 兰親本 ♀： P.Princcess Kaiulani親本 ♂： P.Ambotrana1）蝴蝶兰授粉向上的一片为上萼片，左右倾斜的两片叫下萼片，至于 左右两肩的两大片叫做花瓣，最下的一片突变成唇瓣花瓣上萼片唇瓣合蕊柱下萼片唇瓣合蕊柱花药帽花粉块柱头1.花药 2.柱头 3.合蕊柱 4.子房 5.花药帽 6.花粉块 7.粘盘人工授粉时,首先要选好亲本 ,雌花最好的授 粉时间是开花后 3~4d 授粉时先将母本的花粉块除去,再将父本的 花粉块用小镊子镊起,轻轻地放在母本的柱头上 ,因柱头和花粉块上都有粘液,花粉在柱头上粘 得牢, 不必担心花粉块脱落一般授粉后不需要套袋，用铅笔写好标牌 ,挂在授粉母株上晴天气温较高时,授粉后结 实率可达 95% 以上蝴蝶兰授粉后果实生长过程授粉 （3~5d） 花凋萎（2月16日） （ 2月20日）（7~15d） 果实明显膨大（2月27日）（120~140d) 果实变为黄色 （7月6日） 当蝴蝶兰果实呈黄绿色时,要及时采收 ,否则 易裂果。
蝴蝶兰果实为萌果,果实大小长约 6.5~12.5 cm,直径 0.7~1.6cm,每个果实中含种 胚上万至几十万粒,兰花种子具有未分化的特点, 只是一团未分化的胚细胞,胚小,种皮宽大,呈纺 锤型，没有贮藏营养物质的组织,所以 在自然条件下很难萌发,需要在无菌条件 下播种育苗2）蝴蝶兰果实无菌处理果实采收后灭菌将果实取出放在无菌纸上, 用手术刀剖开果实取出粉状种胚,将种胚均匀的 接种到灭过菌的培养基上左图为及时采收果实，右图为采收不及时的裂果）蝴蝶兰无菌播种配方（简称A培养基 PH:5.5）药品用量（g/L）花宝一号（Hyponex7-6-19)3.0蛋白胨2.0肌醇0.1磷酸三钙0.2香蕉100.0蔗糖20.0琼脂7.0表2 萌芽培养基配方（g/L）药品用量药品用量花宝一号1.5香蕉100.0花宝二号1.5糖20.0蛋白胨2.0琼脂8.0肌醇0.1PH值5.2磷酸三钙0.2KC 培养基（mg/L）药药品用量药药品用量KH 2PO4250MnSO4.4H2O100.0Ca(NO3)2.4H2O1000蛋白胨胨2000(NH4)2SO4500糖20000FeSO4.7H2O25琼琼脂7000~800 0MgSO4.7H2O250PH值值5.23）蝴蝶兰种胚培养培养室中间转接蝴蝶兰由播种到移栽过程无菌播种 10d± 变成黄绿色 20d± 变为 绿色 10d± 米粒大小 50d± 萌芽90d± 长出2片叶30d± 苗高2cm 50d± 苗高 3~7cm、3~5条根，可移栽。
生根苗移栽前,连同培养瓶一起从培养室转移 到炼苗棚 ,放置1周4、蝴蝶兰生根苗的移栽打开瓶口,炼苗2~3d 后移栽移栽时小心取出生根苗,洗去根部培养基,移栽到 基质是水苔的苗盘中空气温度保持在80%~90%，遮光率50%,光照强 度 10000Lx左右,环境温度控制在22 ~26℃经 1~2 个月的管理,待小苗长出1~2对新叶时移 栽到营养钵中随着苗子的成长,逐渐更换大的营 养钵在小苗管理期间要经常喷水,但水苔不能积水 或过湿 ,防止烂根每隔 2~3 周追1次稀薄液体肥 料 ,定期喷洒杀菌剂 ,预防病害发生当开花时根 据育种目标选择优良植株，然后进行无性繁殖蝴蝶兰生长情况在组培方面还存在许多问题，主要表现在：一是缺少统一规划与相应的引导协调；二是投入不足，缺少持续研究与开展所必须的资金和 条件；三是有的企业脱离市场需求和行情，盲目生产出大量 种苗而销售困难，从而造成损失和浪四是有的企业科研技术薄弱，形不成批量生产，此， 由于种种原因，许多组织培养不赢利，有的造成停产、设 备、仪器浪费现象对预备组建植物组织培养室的几点建议建一个植物组织培养室需设备投资较多，要相应面积的房 舍，操作、灭菌等过程需经常大量电，开支较大，如果达不 到预计的产苗量或造成销售困难，商业组培室就会陷于被动 。
从投资正式建到产品销售，这段时间一般需要1～2年1、鉴于 前国内生活水平对花卉的消费习惯，花卉的价格 成本尚有许多需要协调适应之处在大多数中小城市，观赏 植物的市场容量还是有限的，常规生产力尚未充分发挥，所 以大型靠组培繁殖企业的建立更应慎重2、作为一个商业性种苗经营者，在决心采用组培养培 育种苗之前，必须对其优点和存在的问题做好认真细致 的调查研究工作，对市场分析，是有乐观的前景，亲自 实地考察一些组培企业，最好能亲自实践一段时间或聘 请有实践经验的专家担技术顾问，然后再决定是否投资 ，如果市场有限，那么耗资巨大地建立组培室，恐怕会 成为不合算事情，这在创业时将承担过大的风险3、根据生产规模制定生产计划，首先要根据市场需求和移栽时间，制定全年植物组织 培养的全过程 在制定生产计划时要注意以下几点： （1）对所生产的植物的增殖率、生根率和移栽成活 率应做出切合实际的估算； （2）要掌握植物组织培养全过程的技术储备； （3）要掌握各种组培苗的适宜生根、移栽时间和生 产技术环节4、已成立组培室，除科研需要外，在生产上，应考虑如何用 最小的投资，取得最大的经济效益一定要结合市场的需求情况，形成一定生产规模，降低成 本，提高利润，才能提高经济效益。
首先应具有熟练掌握组培技能的专业人员操作工转接苗 操作熟练，污染率小，提高成品率；其次应减少设备投资，延长使用寿命，降低器皿消耗， 使用廉价的代用品，如：组培中的蔗糖可用食用糖代用，只 要所用水中含盐量不高，配制培养基时可用自来水、雨水代 替无离子水或蒸馏水培养室尽量利用自然光和自然温度，从而节约电力开支 另外，在保证原有良种特性的基础上，尽量提高繁殖倍数 ，提高生根率和移栽成活率。