1. 配鱼:头一天晚上将鱼配上,每个配种盒里放1条雄鱼,1〜2条雌鱼同品系的鱼自交至 少需要配 10 对,这样保证至少有 5 对产卵,以保证后代的基因库不同品系的鱼(比如 与野生型交配)配 5 对以上,保证至少有 3 对产卵2. 收集胚胎:当天早上收集胚胎,挑去其中异物,再用embryomedia清洗2-3次,放入培养 箱3. 挑选胚胎:胚胎发育4-5 小时,移去未受精的卵及死胚第二天早上观察,若胚胎发育异 常(不是突变体)比率较高(>10%),则丢弃整盘胚胎正常的胚胎中每盘取10〜20 枚左 右,混成一盘,再分装成若干盘,每盘 20〜25 枚(这样以后每缸鱼里面都有不同亲本的 后代,以保证基因库的大小)以后的四天内每日检查胚胎一次,去掉死胚4. 培养鱼苗:第5天的小鱼放入鱼房烧杯中,加入约200ml鱼缸水(system water),放在 标记为(5〜12 天)架子上鱼苗进食有 3 个阶段:第一阶段草履虫,第二阶段丰年虫+ 草履虫,第三阶段丰年虫,每一阶段都放在不同的架层上放进去后头两天观察一下鱼是 否正常进食(可从鱼的肚子来观察),并且注意食物是否过多过少在完全换成丰年虫之 前要确认小鱼是否已经能吞食丰年虫(肚子是否变红),确认大部分都能吞食丰年虫之后 再放到相应的架层上,否则应相应地增加或缩减第二阶段。
经常检查(尤其是刚开始喂食 阶段和不同阶段转换的时候一定要检查),用吸管吸除垃圾及死鱼5. 转入系统:满20天并且绝大多数小鱼能够吃丰年虫3〜5天之后,将小鱼转到鱼缸中鱼 缸上贴上标签,并贴红标签(红标签是提醒阿姨少喂食)用深蓝色细网孔后背板,确认 后背板与鱼缸之间紧密接触,小鱼不会轻易跑到后背板后面转入系统头两天关闭水流, 2〜3 天之后水流成连续滴状为宜,以防小鱼被冲走一周之后(此时鱼一个月大),水流 进一步增加,但仍要比较小,水流基本垂直落下为宜去红标签6. 分缸:当鱼满1.5个月,视其生长情况可以分缸,分成每缸10条鱼为宜更换后背板和鱼 缸,使用浅蓝色大网孔后背板水流调整到与成鱼一样7. 鉴定:当鱼2.5〜3个月时,视其生长情况,鉴定突变体更换鱼缸及后背板,使用成鱼鱼 缸后背板8. 交配:当鱼长到4个月大时,基本可以用于交配,但如果鱼比较小(正常成鱼应该3〜4cm 左右,请参照 1 年左右的成鱼),说明鱼可能因为营养不良等原因成长较慢,宜再养大一 些交配一代鱼长成至少需要 4个月的时间,所以大家涉及到用鱼的实验,应尽早安排9. 传代:当鱼满8〜10个月时,需要进行传代传代之前,请咨询一下鱼房管理员蒋逊,大 家应尽量把传代时间错开,以免草履虫不够用。
注:养小鱼之前要确定总共要养的小鱼数目,总的原则是要保证有足够的后代(保种的话20 条鱼左右就够了),但又不能浪费资源(比如需要20条鱼,结果养了 80条)正常情况下突 变体需要养60条左右,这样最后得到48 (按80%成活率)条成鱼,其中24〜32条是突变体其他不需要鉴定的鱼(转基因鱼)养30条左右这样就能保证传代但如果需要大量用某个 品系的鱼,则要计算好需要的起始数量。