Click to edit Master title style,Click to edit Master text styles,Second level,Third level,Fourth level,Fifth level,11/7/2009,#,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,传染性胃肠炎,TGEV,第一页，共十九页猪传染性胃肠炎研究,(ynji),概况,猪传染性胃肠炎（TGE）是猪的一种急性传染病，由猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）引起在 1933 年，美国依利诺斯州记载了 TGE1945 年，Doyle 和,Hutchings,在美国首次报道了该病，直到1946 年才确定该病的病原为冠状病毒随后欧州国家、中南美洲、加拿大、韩国、朝鲜、菲律宾和中国,(zhn u),大陆都报道了本病猪呼吸道冠状病毒（PRCV）是一种猪传染性胃肠炎病毒的致病性突变体随着PRCV的出现，由 PRCV 诱导交叉保护性免疫，使 TGE 在欧洲变得不那么普遍1956年，我国广东省有关于本病的报道,近年来，TGEV 在国内的流行形势严峻，并且经常伴随着与猪轮状病毒病和猪流行性腹泻病的混合感染，无有效的治疗药物，因此已经成为严重危害养猪业的重要疫病之一，给我国猪养殖业带来了严重的经济损失。
第二页，共十九页一、病原学,1,、形态学特征,TGEV 属于冠状病毒科冠状病毒属,电镜负染观察，TGE病毒粒子呈圆形、椭圆形或多边形病毒直径为90-200nm，有双层膜，病毒表面有囊膜和明显的花瓣状纤突，纤突的长度约在 1225 nm 之间因 TGEV 是 RNA 病毒，所以 TGEV 的纤突容易脱落，导致在电镜下观察病毒粒子的结构时不易看到纤突3 种膜相关蛋白（S、M、sM）镶嵌在囊膜脂质双层中，其中，M 为膜糖蛋白且多次横穿,(hn chun),脂质双层；S 为重要的纤突糖蛋白sM为镶嵌于囊膜中的小包膜蛋白TGEV,模型,(mxng),图,第三页，共十九页一、病原学,2,、培养特性,TGEV 可在本属动物或其细胞,(xbo),系上繁殖,在不同细胞,(xbo),系上的生物学特性表现的也不一致，比较敏感的细胞,(xbo),系有猪唾液腺细胞,(xbo),、猪甲状腺细胞,(xbo),、猪睾丸(Swin Testicle，ST)细胞,(xbo),、仔猪的肾细胞,(xbo),（pk-15）经研究表明最为敏感的传代细胞系为猪睾丸细胞（Swine testicle，ST），适应 ST 细胞后的病毒效价提高的较快，其次是PK15细胞系，两者是实验室常用的繁殖 TGEV 的细胞系。
第四页，共十九页一、病原学,3,、理化特性,TGEV 并不耐热，加热5645min或6510min可被完全灭活，随着温度的升高，病毒滴度也会随着下降,(xijing),TGEV 在冷冻环境下贮存非常稳定，在室温下或更高的温度下相对不稳定用甲醛溶液处理病毒，37 20 min亦能使病发生灭活TGEV,对光和紫外线敏感，二者在一定条件下均能很容易的将 TGEV 灭活TGEV 在胆汁中存在相当稳定而对乙醚、氯仿和去氧胆酸钠这三种试剂敏感此毒对胰酶有抵抗力，能耐受 0.5%胰蛋白酶时间长达1 hTGEV 在 pH 为 4-8 的区间时表现稳定第五页，共十九页一、病原学,4,、抗原性,病毒存在于猪的各器官、体液和排泄物中,但病猪的空肠、十二指肠组织,肠系膜淋巴结含毒量最高在病的早期,呼吸道和肾的含毒量也相当高对来自美国、英国和日本的用猪传代及用细胞培养传代的10个毒株进行交叉中和实验和蚀斑减数实验,证明TGEV只有一个血清型,各毒株之间抗原性密切相关近年来,在欧洲及北美发现一种被认为是TGEV基因缺失变异株的冠状病毒猪呼吸道冠状病毒（PRCV）TGEV和PRCV能诱导机体产生交叉反应的中和抗体，但PRCV只能引起,(ynq),轻微临床症状。
第六页，共十九页二、流行病学,(li xn bn xu),1,、传染源、传播途径和易感动物,猪传染性胃肠炎病的传染源主要为发病猪、带毒猪，其它带毒动物也可作为传染源TGEV 的传播可以通过消化道和呼吸道与受感染的个体或携带疾病的猪的粪便、乳汁、呕吐物、呼吸及鼻腔分泌物的直接接触而发生,病毒也可能存在于被污染的饲料、饮水、空气和饲喂,(s wi),用具中感染动物为猪，各种年龄的猪都易感，但以10日龄以内的仔猪发病率和病死率高狗、猫、狐狸等可带毒排毒，但不发病第七页，共十九页二、流行病学,(li xn bn xu),2,、流行特点,TGE的发生和流行有明显的季节性，多见于初春和冬季，发病高峰期为每年的 1-2 月这种流行特点可能与病毒的理化特性有关，TGEV 不耐热，但在冰冻的条件下比较稳定猪场一旦感染,(gnrn),TGEV，便大量暴发感染,(gnrn),哺乳母猪常发病，表现为厌食和无乳，从而进一步导致仔猪死亡率的上升本病还呈周期性地方流行性，其流行的间歇期，病毒隐藏在猪体而成为仔猪的传染源，每年的冬季猪群可重新感染曾感染过 TGE 的母猪具有免疫力，能够抵抗病毒侵害，一般不重复感染第八页，共十九页。
爆发,(bof),图 分布图,第九页，共十九页三、临床,(ln chun),症状,本病潜伏期短,18 h 72 h大部分猪感染发病,根据此特点可作为临床诊断的依据仔猪潜伏期很短,一般为12 h 24 h,突然发生呕吐,接着频繁剧烈水样腹泻,粪便黄色、绿色或灰色,腥臭,常夹有未消化的凝乳块病猪极度口渴,迅速脱水,消瘦,日龄越小、病程越短、病死率越高10日龄以内的仔猪多在2 d 5 d内死亡,随着日龄的增长病死率逐渐降低病愈仔猪生长发育不良后备猪、架子猪和成年猪症状轻重不一,表现为停食,个别病猪出现,(chxin),呕吐,急性腹泻,排出灰色或灰褐色水样便,伴有未消化的饲料,5 d 7 d自愈,很少死亡第十页，共十九页四、病理变化,主要病变在胃和小肠,胃内充满未消化的凝乳块,胃底黏膜充血,小肠内充满黄绿色或灰白色液状物,含有泡沫和未消化的凝乳块,小肠壁变薄,弹性降低,以致肠管扩张,呈半透明状,肠系膜血管充血扩张,淋巴结肿胀将空肠纵向剪开,用生理盐水将肠内容物冲掉,置于玻璃平皿内铺平,加入少量生理盐水,在低倍显微镜下观察,可见到空肠绒毛显著缩短,是本病重要,(zhngyo),病理变化特征第十一页，共十九页。
五、发病,(f bng),机理,小肠是本病毒的靶器官无论是口腔还是鼻腔途径感染,病毒都被吞咽进入消化道,它能抵抗胃酸和蛋白水解酶而保持活性进入小肠大量小肠上皮细胞受感染后,肠粘膜的功能性上皮细胞迅速遭到破坏,导致小肠内的酶活性明显降低,不能分解乳糖和其他营养物质乳糖在肠腔中的存在,使渗透压升高,致使体液滞留甚至,(shnzh),从身体组织内吸收体液而引起腹泻和脱水TGEV的感染还可引起空肠钠运输的改变和血管外蛋白质丢失而引起肠道内电解质和水积聚死亡的原因可能是脱水和代谢性酸中毒以及由于高血钾而引起的心功能异常和肾功能减退新生仔猪小肠内正常绒毛细胞的更换速度较慢,免疫系统发育不完善及TGEV易于在新生猪绒毛吸收细胞的尖端小血管系统积聚,而使病毒数量大增,可能是仔猪易感和高死亡率的主要原因第十二页，共十九页六、诊断,(zhndun),1病毒抗原检测,常用,免疫荧光法(IF),2病毒的电镜检测,免疫电镜(IEM)比常规EM技术更好,3血清学诊断,病毒中和试验(VN)，ELISA法较之以往的血清学方法具有敏感性高、特异性强的特点4,病毒核酸检测,RT-PCR法是目前鉴别诊断TGEV和PEDV最敏感,(mngn),、特异的方法。
第十三页，共十九页七、防治,(fngzh),抗生素等常规药物无治疗作用,因此该病以预防为主目前兽用疫苗的研究主要,(zhyo),经历了灭活疫苗,减毒弱毒疫苗以及基因工程疫苗等三个阶段随着分子生物学实验技术的推广和成熟,基因工程苗已经成为疫苗研究中的热点其中核酸疫苗与传统疫苗相比有许多潜在的优势,被誉为第三次疫苗革命联合疫苗：二联、三联第十四页，共十九页八、,TGEV,的分子生物学,1,、,TGEV,基因组结构,TGEV基因组为单股正链不分节段的,RNA,大小约为2.86x10,4,bp分为7个区,每个区有一个,(y),或多个开放阅读框架(Open,Reading,F,r,ames,ORFs)2,、,S,基因,S基因长约4.3kb,翻译并指导S蛋白(E2)的合成,形成病毒的囊膜突起核苷酸数目因不同毒株而有差别,Purdue一115株为4341个碱基,而Miller和FS772/70株为4347个碱基第十五页，共十九页八、,TGEV,的分子生物学,3,、,TGEV,结构蛋白与功能,TGE,V,由四种主要的结构蛋白构成,(guchng),S,蛋白又称E,2,为大的糖蛋白,它形成病毒粒子的冠状突起。
M蛋白又称E,1,包埋在脂质囊膜中N蛋白包裹整个基因组,RNA,sM蛋白位于病毒粒子囊膜上第十六页，共十九页八、,TGEV,的分子生物学,S糖蛋白的生物学功能:,携带主要的B淋巴细胞抗原决定簇,是唯一能够诱导产生中和抗体和提供免疫保护的结构蛋白含有宿主细胞,(xbo),氨肽酶受体(PAPN)的识别位点,决定宿主细胞,(xbo),的亲嗜性决定TG,EV,的致病性具有细胞融合作用,使病毒蛋白进入细胞浆决定,TG,EV的血凝作用第十七页，共十九页谢谢,(xi xie),观看！,第十八页，共十九页内容,(nirng),总结,传染性胃肠炎在病的早期,呼吸道和肾的含毒量也相当高近年来,在欧洲及北美发现一种被认为是TGEV基因缺失变异株的冠状病毒猪呼吸道冠状病毒（PRCV）病毒中和试验(VN)，ELISA法较之以往,(ywng),的血清学方法具有敏感性高、特异性强的特点目前兽用疫苗的研究主要经历了灭活疫苗,减毒弱毒疫苗以及基因工程疫苗等三个阶段随着分子生物学实验技术的推广和成熟,基因工程苗已经成为疫苗研究中的热点谢谢观看,第十九页，共十九页。