实验二实验二 显微测微尺使用与细胞大小的测量显微测微尺使用与细胞大小的测量2011.03.16班级：班级： 姓名：姓名： 一、实验目的一、实验目的 学习使用目镜测微尺和镜台测微尺在显微镜下测定细胞大小的方法 二、实验原理二、实验原理通常的目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把 5mm 长度刻成 50 等分、把 10 mm 长度刻成 100 等分或将 1mm 长度刻成 100 等分测量时，将其放在接目镜中的隔板上(此 处正好与物镜放大的中间像重叠)来测量经显微镜放大后的细胞物象由于不同目镜、物镜 组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量 微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微 尺每小格所代表的相对长度 通常的镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将 lmm 等分为 100 格， 每格长 l0μm（即 0.0lmm） ，是专门用来校正目镜测微尺的校正时，将镜台测微尺放在载 物台上，由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成 象进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得 到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜 测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片， 用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。
三、实验用品三、实验用品 显微镜、目镜测微尺、镜台测微尺、固定装片等 四、实验步骤四、实验步骤 l、目镜测微尺的校正 将目镜测微尺装入目镜的隔板上，使刻度朝下（已安装到位） 把镜台测微尺置于载物 台上，使刻度朝上，并对准光源先用低倍镜找到镜台测微尺的刻度，改用高倍镜观察， 当看清镜台测微尺的刻度后，转动目镜，使目镜测微尺与镜台测微尺的刻度平行，移动推 动器，使目镜测微尺的“0”点与镜台测微尺的某一刻度重合，然后，仔细寻找两尺第 2 个 完全重合的刻度计数两重合刻度之间目镜测微尺的格数和镜台测微尺的格数因为镜台 测微尺的刻度每格长 10μm，所以由下列公式就可以算出所校正的目镜测微尺每格所代表 的长度例如目镜测微尺 20 小格等于镜台测微尺 3 小格，已知镜台测微尺每格 10μm ，则 3 小格的宽度为 3×10 ＝ 30μm，那么相应地在目镜测微尺上每小格大小为：由于不同显微镜及附件的放大倍数不同，因此校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜 和附件（特定的物镜、目镜、镜筒长度）进行，而且只能在特定的情况下重复使用，当更 换不同放大倍数的目镜或物镜时，必须重新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。
2、细胞大小的测定 取下镜台测微尺，将细胞标本片置于载物台上，先在低倍镜和高倍镜下找到目的物 然后在高倍镜下用目镜测微尺测量细胞的长和宽 例如目镜测微尺在显微镜下经过校正，当使用高倍镜时，每格相当于 1.5 μm如果测 量细胞的长度相当于目镜测微尺的两格，则细胞长度应为 1.5 μm×2 = 3.0 μm一般测定细 胞大小时，通常测量 10 个细胞左右，用最大和最小的数值来表示细胞大小的范围例如长 为 3~5μm，宽为 1~2μm，则其大小为 l~2×3~5μm 五、实验结果五、实验结果 1、分别求出使用低倍镜(10X)，高倍镜(40X)时目镜测微尺每格代表的长度： 低倍镜：目镜测微尺每格代表的长度= ×lO(μm)= μm 高倍镜：目镜测微尺每格代表的长度= ×lO(μm)= μm 2、测量 10 个细胞及细胞核的大小并记录：编号12345678910细胞大小核大小3、计算细胞的核质比例： 计算细胞、细胞核体积的公式： 圆 形 V=4/3πr 3(r 为半径) 椭圆形 V=4/3πab2(a、b 分别为长、短半径) 核质比 N／D=Vn／(Vc—Vn)(Vn 为核的体积，Vc 是细胞的体积)。