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人体组织的检验

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人体组织的检验_第1页
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单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,第十六章 人体组织的检验,一、毛发检验,毛发结构:,毛发是皮肤的一种特殊的附属器,是,皮肤毛囊细胞产生的一种富有弹性角质体毛尖-,-是毛干的游离末端,毛干向毛尖逐渐,变细而尖,毛干,-是裸露于皮肤外部的部分,由角化上,皮细胞组成,中心向外可以分为:,毛小皮:,人-毛小皮花纹通常为细小波浪状毛皮质:,人-皮质发达,,毛髓质:,人-髓质不发达、而且髓质不连续,毛根,-是埋在皮肤内的部分毛 球:,毛根起始端膨大和球状的部分,毛 囊:,包裹毛根的一管状结构,内层为上皮,根鞘、外层为纤维组织鞘,毛乳头:,毛球和毛囊末端膨大,底面内凹,含,毛细血管和神经的结缔组,法医意义:,1 毛发容易脱落,在凶杀、强奸、抢劫等,案件中均可遗留,2 毛发理化性质稳定,其主要成分为角蛋,白,不易腐蚀和毁坏,可长期保存,3 毛发可以进行个人识别,鉴定注意:,1 毛发容易丢失,检验时应该特别小心,最,好带口罩,2 选择合适的背景进行观察,毛发与其他纤维的鉴别,肉眼观:毛尖、毛干、毛根,显微镜:毛小皮、毛皮质、毛髓质,燃烧法:毛发由特殊的臭味-角蛋白中含有,3%5%的硫,人毛与其他动物毛的鉴别,毛小皮,毛皮质,毛髓质,形态,边缘,宽度,色素,宽度,连续性,末端,人,毛,细而不规则花形,细锯齿状,较宽,2/3,均匀,较窄,1/41/5,不连续,部分缺如,动物毛,形状多变,粗锯齿状,较窄,1/21/3,不均匀,较宽,1/3,连续,直至毛尖,毛发部位的确定,毛发其他特征鉴别,5%10%亚硝基铁氰化钠溶液,脱落,-毛根完全角化,干燥萎缩,无根鞘附着,,根部色素少。

染色不颜色反应,拔出,-毛囊组织附着、毛球湿润,毛球下端开放,呈钩状,染色呈红色钝器损伤,-钝器作用部位变宽扁平,皮质纤维分,离,部分或完全断裂,锐器损伤,-断端平滑整齐、毛干不碎裂、皮质纤,维不分裂,长,度,直径,横断面,头发,2,m,0.1,圆形或椭圆形,胡须,30,cm,0.15,钝的三角形,阴毛,36,cm,0.10.2,长椭圆形,毛发的个人识别,形态学检查:,长度-,色泽-黑色、浅褐色、灰色、白色-色素:白色、黑色、红色,形态-直发、波状发、卷发,断端-剪切或切割、部分撕裂或完全撕裂,免疫学检查:,ABO,血型-解离试验,特征:1 血型物质含量少;2 毛小皮没有血型物质,只有皮质和髓质才有,方法:毛发洗净-乙醇脱色-充分压扁-加抗体吸收-涤、解离、,RBC,注意:1 毛发压扁,原宽度地4倍;2 抗血清效价128;,3吸收时间充分,过夜 4 毛发对照,生化学检查:,有毛根和毛囊的毛发可以检测,ESD、GLOI、PGM1、ORM,等,分子生物学:,带毛囊-,DNA,提取用,chelex-100,STR,基因座分析,性别基因鉴定,毛 干-线粒体,DNA,多态性分析,化学 分 析:,微量元素的检测,应用:可以推测可能的生活环境、从事的职业、判断是否中毒,方法:原子发射光谱析、原子吸收分光光度、中子活性、气相色谱、质谱,二、软组织检验,1 种类鉴别,肉眼观察,适合于组织块比较大的检材的识别,组织切片,HE,染色后,在显微镜下观察,鉴别,*如果干燥组织可以用5%醋酸浸软组织以,恢复正常形态,皮肤-复层鳞状上皮细胞的表层结构+真皮层的,毛囊和皮脂腺,及皮下脂肪,脑组织-神经细胞和神经胶质细胞,肝 脏-肝细胞及胆管构成发肝小叶结构,肾 脏-肾小球、肾小管、,消化道-粘膜层、粘膜下层、肌层、外膜,2 种属鉴定,免疫学方法:,抗人血清-沉淀反应、凝集反应、酶免疫分析,*法医检验中的组织经常受各种因素的影响,变性或分解,,易产生误判。

分子生物学:,Alu,序列,含有,AluI,酶切位点 散在重复序列,由300,bp,重复单位,该序列为人类和灵长类特有-种属特异性,PCR-AFLP:,人类130,bp,的扩增产物,28,srRNA,rRNA=60s(28s+5.8s+5s+50,多种多肽)+40,保守区中的可变区进化较快,种属之间差异很大,人类108、104、101、99,bp,,不同动物的扩增产物长度不同,细胞色素,b,基因,位于线粒体上的具有种属差异的遗传标记,人和哺乳类动物区别,AluI,酶切位点-酶切片断的长度不同,人和鸟类的动物区别,NcoI,酶切位点-人类不含有该酶切位点,SON,基因,3 个人识别,检验基础:,正常情况下,同一个体不同组织的血型、酶型、,DNA,分型结果相同,例外:癌变的组织;腐败组织-获得性,B,物质,影响因素:,环境因素,干燥能保存,潮湿易破坏,温度、酸碱 烧熟(但未焦)的组织可以检出,,自溶和腐败 使组织的血型物质及其他的遗传标记更容易被破坏,送检注意:,1 尽快送检-,2 妥善保存-所有检材不宜用甲醛固定,3 合理选材-肝脏和脾脏中核酸分解酶丰富,蛋白质和,DNA,降解快,不宜首选,肌肉和脑是提取,DNA,较理想的检材,血型:,ABO,血型,ABH,抗原不仅分布于人类红细胞 上,也存在于人体各种上皮细胞、血管与淋巴管的内皮细胞、心内膜及神经组织的神经细胞及突触。

有些组织的,ABH,抗原发育较红细胞早,方法:,吸收试验-凝集抑制试验,解离试验-热解离试验,混合凝集-红细胞粘连试验,免疫组化-酶标抗体的应用,基因分型-,PASA、PCR-RFLP、ASO-PCR,酶 型测定,检材处理:组织制成匀浆,,DNA,分析,DNA,提取:,冷冻组织-常规有机溶剂,量少用,Chelex-100,DNA,分析,STR,或,HLA,基因分型,三、其他组织检验,1 指甲检验,由表皮细胞角化而成,由多层连接牢固的角化细胞构成,细胞内充满角质蛋白ABO,血型,特点:,ABH,为水溶性血型物质,但不受分泌型的影响,存在于所有的个体成人和新生儿指甲中的,ABH,含量无明显的差异方法:洗净-用肥皂水充分的洗涤,再用蒸馏水冲洗数次,软化-生理盐水中2小时,晾干,脱脂-丙酮或乙醇脱脂,压碎-加大抗血清接触的面积,mtDNA,检测,测定,mtDNA,多态性的灵敏度比检测核,DNA,的多态性高,2 骨及牙检验,-人体最坚硬的组织,抵抗腐败,长期保存,检材处理:用手术刀刮净骨表面和牙齿表面的污垢物,用蒸馏水冲洗2次,紫外线照射1小时后,用锤子将牙齿砸碎成粉末,或用电钻取出骨粉,ABO,血型:,骨粉经乙醇脱脂后,分别粘在透明胶布上-解离试验,DNA,分析:,常规提取以后,可以再用,DNAclean-up,纯化备用。

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