单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第十章 常见植物脱毒与快繁技术,宜职院08.9,目的与要求,了解农作物、果树、花卉、药用植物的脱毒和快繁的生产意义与基本技术，根据地方特点和组培技术现状，例举部分植物进行讲授，并结合学生查阅资料共同探讨具有农作物、果树、花卉、药用植物快繁基本技术，具备马铃薯、草莓等植脱毒技术，进行微型薯生产基本知能，有利用图书及网络资源收集相关资料，了解相关行业信息的能力，并具备一定交流探讨能力第一节 农作物的脱毒与快繁,植物组织培养技术已广泛运用于农作物育种和良种繁育，尤其是许多无性繁殖类农作物脱毒及良种快繁，对提高农作物生产的产量和品质发挥了极其重要的作用一、马铃薯的脱毒和快繁（一）茎尖培养脱毒1、取材 生产大田顶芽，或块茎，预培养抽生的枝条污染较少供试材料存在病毒可结合热处理脱毒2、消毒 自来水冲洗1h，70%酒精30s，10%漂白粉溶液510min，无菌水冲洗23次3、接种 解剖镜下，解剖刀切取0.10.3mm带有12个叶原基的茎尖，接种到培养基上4、培养条件 MS、Miller，252，1000lx，4周后增至20003000 lx，光照16h。
5、病毒鉴定 目测法和指示植物鉴定法二）微型薯生产技术 由试管苗生产的重130g的微小马铃薯被称为微型薯不带病毒，增产效果一般在40%以上1、试管生产 微型薯一般只有15g用组织培养方法生产微型薯分以下两个步骤：（1）单茎段扩大繁殖（2）微型薯的诱导2、温室多层架盘工厂化生产 3、低网畦生产,二、甘薯的脱毒与快繁,（一）茎尖培养,1、茎尖培养脱毒,取高产、优质母株枝条，切成带1芽小段自来水流水冲洗，70%酒精10s，0.1%的升汞10min，无菌水45次，或2%次氯酸钠5min，无菌水34次2、茎尖剥离和培养,解剖镜下剥去芽上较大幼叶，切取0.30.5mm含12个叶原基的茎尖分生组织，迅速接种到制备好的培养基上3、病毒检测 目测法和指示植物鉴定法二）脱毒苗扩繁和种薯的生产 通过病毒检测的脱毒苗先在试管内进行切段快繁30d左右长成有68片展开叶的试管苗待试管苗繁殖到一定数量后，即可在防虫条件下于无菌基质中进行栽培繁殖所结小薯即为原原种薯以原原种（苗）为种植材料，在防虫条件下的无病毒土壤上培育出的薯块即为原种以原种苗在大田条件下生产所结薯块即为生产用种薯（良种）红薯原原,种,种炼苗,第二节,果,果树脱,毒,毒快繁,利用组织,培,培养方法,繁,繁殖果树,植,植株具有,占,占地面积,小,小，繁殖,周,周期短，,全,全年都能,进,进行繁殖,，,，繁殖系,数,数高等特,点,点。
还可,以,以消除果,树,树的某些,病,病毒病，,适,适应果树,向,向品种更,新,新快、矮,化,化密植以,及,及无病毒,栽,栽培方向,发,发展的需,要,要一、草莓,（一）草,莓,莓离体快,繁,繁技术,1、外植,体,体,67月,份,份匍匐茎1520cm长,时,时取材2、培养,基,基,初代MS+6-BA0.5mg/L+GA30.1mg/L+IBA,0.2mg/L,增殖MS+6-BA0.5,1.0mg/L,3、生根,和,和驯化,1/2MS+IBA0.2,1.0mg/L,根23cm时炼,苗,苗，一周,后,后发新根,，,，四周后,可,可移栽二）花,药,药培养脱,毒,毒,1、花药,培,培养脱毒,技,技术,春季取单,核,核期花蕾,（,（直径约4mm）,，,，45,低温处,理,理24h,浸入70%酒精30s，,漂,漂白粉或0.1%,氯,氯化汞1015min剥,剥取花药,放,放在培养,基,基上诱导培养,基,基为MS+6-BA1.0mg/L,+NAA0.2mg/L+IBA0.2mg/L，,继代培养,基,基为MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.05mg/L,2、脱毒,苗,苗的检测,指示植物,小,小叶嫁接,鉴,鉴定法和,电,电子显微,镜,镜鉴定法,。
草莓小叶,嫁,嫁接法,二、柑橘,1、茎尖,微,微芽嫁接,砧木种子45温,水,水浸泡5min5556热水,处,处理50min,取,取出吸干,消毒,剥,剥去种皮,种子接,种,种于MS,培,培养基271,暗培养,2周后,萌,萌发芽苗,可,可作砧木,接,穗,穗,材,材,料,料,强,强,健,健,新,新,梢,梢,热,热,空,空,气,气,处,处,理,理45min(50,),取,取lcm,长,长,芽,芽,条,条,消,消,毒,毒,处,处,理,理,切,切,取,取0.14,0.18mm,微,微,茎,茎,尖,尖,砧,木,木,苗,苗,切,切,去,去,长,长,根,根,和,和,子,子,叶,叶,，,，,上,上,胚,胚,轴,轴,留,留1,1.5cm,切,切,除,除,顶,顶,部,部,，,，,垂,垂,直,直,于,于,茎,茎,，,，,切,切,开,开,一,一,个,个,倒,倒T,字,字,形,形,切,切,口,口,，,，,将,将,微,微,茎,茎,尖,尖,放,放,置,置,于,于,砧,砧,木,木,切,切,口,口,内,内,，,，,茎,茎,尖,尖,底,底,部,部,和,和,砧,砧,木,木,切,切,口,口,形,形,成,成,层,层,紧,紧,密,密,贴,贴,合,合,。
嫁,接,接,苗,苗,转,转,植,植,于,于,新,新,鲜,鲜,培,培,养,养,基,基,上,上,，,，27,1,、,、16h,光,光,照,照,，,，2,4,周,周,后,后,抽,抽,生,生,新,新,芽,芽,，,，,成,成,活,活,率,率,可,可,达,达20%,50%,5,8,周,周,可,可,移,移,植,植,柑,橘,橘,花,花,药,药,培,培,养,养,示,示,意,意,图,图,2,、,、,无,无,病,病,毒,毒,苗,苗,的,的,繁,繁,殖,殖,经,无,无,病,病,毒,毒,苗,苗,鉴,鉴,定,定,后,后,选,选,出,出,无,无,病,病,毒,毒,良,良,种,种,苗,苗,木,木,，,，,可,可,建,建,立,立,原,原,种,种,母,母,本,本,园,园,在,在,隔,隔,离,离,区,区,，,，,按,按,无,无,病,病,苗,苗,的,的,栽,栽,培,培,要,要,求,求,建,建,成,成,无,无,病,病,良,良,种,种,母,母,本,本,园,园,，,，,供,供,繁,繁,殖,殖,无,无,病,病,苗,苗,木,木,采,采,穗,穗,用,用,三,、,、,香,香,蕉,蕉,（,一,一,）,）,花,花,序,序,轴,轴,切,切,片,片,培,培,养,养,1,、,、,花,花,序,序,轴,轴,切,切,片,片,香,蕉,蕉,果,果,穗,穗,已,已,完,完,全,全,抽,抽,出,出,时,时,采,采,上,上,部,部,末,末,结,结,实,实,花,花,序,序,，,，,无,无,菌,菌,下,下,剥,剥,取,取,苞,苞,片,片,除,除,去,去,子,子,房,房,。
取,取,顶,顶,端,端10,15cm,长,长,的,的,花,花,序,序,轴,轴,段,段,，,，,灭,灭,菌,菌,后,后,横,横,切,切,成,成2,3cm,厚,厚,的,的,薄,薄,片,片,，,，,再,再,纵,纵,切,切,成,成,数,数,片,片,2,、,、,培,培,养,养,过,过,程,程,常,用,用MS,培,培,养,养,基,基,，,，,也,也,可,可,用,用SM,或,或,改,改,良,良MS,，,，,继,继,代,代,也,也,可,可,用,用Knudson,培,培,养,养,基,基,香蕉雄花序,外,外植体诱幼,苗,苗过程,（二）影响,试,试管育苗的,关,关键技术,芽,芽的,反,反复增殖是,香,香蕉试管育,苗,苗的技术关,键,键芽的,增,增殖效果如,何,何，较重要,的,的衡量指标,是,是增殖率和,代,代期（次,继,继代培养的,时,时间），均,与,与生长调节,剂,剂关系最为,密,密切细胞,分,分裂素以6-BA 3,4mgL为宜，增,殖,殖率可达到4以上，代,期,期为34,周,周，因而增,殖,殖效率高第三节,蔬,蔬菜组织培,养,养一、番茄1、花药培,养,养取花,药,药37mm长、单核,中,中期的花蕾,将花,蕾,蕾用0.1,吐温40溶,液,液浸泡5min70,酒精15s3的,漂,漂白粉10min,无,无菌水冲洗,接种,从,从花蕾中取,出,出花药，接,种,种在DBMII2.0mg/LNAA1.0mg/LKIN,的,的培养基上,，,，27、24h光照,后,后黑暗下培,养,养。
2、叶培养,取无菌,幼,幼嫩叶片，,切,切成55mm的小块,MS,0.2mg/LIAA2mg/L BA27、,光,光25天后，愈,伤,伤组织分化,芽,芽一个月,后,后每切块长,出,出25个,芽,芽芽,转,转到无激素,的,的MS培养,基,基上，510d后形,成,成根3、胚培养,外植体的,制,制备授粉,后,后3040d果实95%乙醇,消,消毒5%NaCl中5min,无,无菌蒸馏水,充,充分淋洗除,去,去种子上的,胶,胶状复被培养基MS附加硫,胺,胺素3.0umpH6.0附,加,加2.4D9.05um,IiP4.92um和椰乳100ml/L的MS,用,用做愈伤组,织,织启动和保,存,存培养基培养,条,条件,愈,愈伤组,织,织启动,和,和保存,暗,暗培，27,再生,生,生根2030、16h/d，,荧,荧光下,进,进行,二、甘,蓝,蓝,1、取,材,材和处,理,理,剥去叶,球,球的叶,片,片，留,下,下中心,柱,柱和腋,芽,芽，70%,酒,酒精1-2分,钟,钟0.2%,升,升汞10-15分钟,剥离,腋,腋芽,接,接种在,繁,繁芽培,养,养基上,（）,）,2、培,养,养,光照1000-3000lx,12-13h/d,20,2,，,，湿度50%-60%。
3、扩,大,大繁殖,重复进,行,行扩繁,，,，直到,达,达到要,求,求繁殖,数,数量为,止,止第四节,观,观,赏,赏植物,的,的组织,培,培养,兰花,兰花系,兰,兰科植,物,物，在,自,自然条,件,件下主,要,要靠分,株,株繁殖,，,，繁殖,率,率一年,只,只有几,倍,倍，所,以,以无法,大,大量繁,殖,殖生产,，,，而且,由,由于长,期,期进行,无,无性繁,殖,殖，带,病,病毒株,增,增多，,逐,逐渐使,种,种性降,低,低，影,响,响生长,1、取,材,材和处,理,理,切取lOcm,长,长生长,健,健壮的,茎,茎尖，,去,去苞叶,洗,洗净75,酒,酒精5的,漂,漂白粉10min,无,无菌水,冲,冲洗,接,接种在兰花,叶,叶片组,织,织培养,中,中，应,选,选择带,有,有嫩叶,的,的花梗,，,，以后,的,的处理,方,方法同,茎,茎尖2、原,球,球茎的,诱,诱导培,养,养,茎尖生,长,长点或,叶,叶片接,种,种在原,球,球茎诱,导,导培养,基,基上因,因兰花,种,种类而,异,异，可,以,以用固,体,体培养,基,基或液,体,体培养,基,基(液,体,体培养,基,基中应,加,加比较,多,多的蔗,糖,糖)。
凡,凡原球,茎,茎切口,处,处不变,褐,褐或变,褐,褐物质,排,排出量,较,较少的,种,种类，,可,可用固,体,体培养,基,基，而,易,易变褐,的,的种类,，,，最好,用,用液体,培,培养基,，,，诱导,温,温度应,于,于23,，光,照,照强度1 500-20001x,原球茎,的,的增殖,3、苗,的,的分化,培,培养,兰科植,物,物与其,他,他草本,花,花卉不,同,同，它,不,不易受,生,生长调,节,节物质,的,的影响,，,，一般,是,是将原,球,球茎转,入,入离子,浓,浓度较,低,低的培,养,养基中,，,，加入,一,一些如,椰,椰子汁,等,等天然,提,提取物,质,质，效,果,果会更,好,好，原,球,球茎很,快,快再生,成,成植株,lcm,高,高的幼,苗,苗转移,到,到壮苗,培,培养基,上,上培养36,个,个月，,使,使其长34,片,片叶、34,条,条根、310cm,高,高，可,移,移。