本文格式为Word版，下载可任意编辑异常红细胞显微镜检查标准操作规程 奇怪红细胞显微镜检查标准操作规程 1. 测验原理 用瑞氏染色法，对制备好的血涂片举行染色，然后在显微镜下举行形态检查 2. 标本采集： 2.1 标本种类：新抽取的抗凝血或手指末梢血 2.2 标本要求： 2.2.1 抗凝剂采用EDTA K2抗凝 2.2.2 用手指末梢血作检验时，如手指有冻疮，那么看法采用耳垂血 3. 标本储存：取材后应立刻推制成血涂片，并尽快送检 4. 标本运输：保持枯燥，室温运输 5. 标本拒收标准：污染，凝固标本不能作测定 6. 测验材料：瑞氏血细胞染色液，生产厂家：（台资）珠海贝索生物技术有限公司 7. 测验仪器： 7.1 仪器名称： OLYMPUS 显微镜 7.2 仪器厂家：OLYMPUS 7.3 仪器型号：OLYMPUS CH30 8. 操作步骤 8.1 采血后推制厚薄适合的的血膜片，血膜应呈舌状，头、体、尾明显可分 8.2 瑞氏染色：将制好的枯燥血涂片平置于染色架上，滴加瑞氏染色液A液3-5滴使其急速盖满血膜，然后加瑞氏染色B液3-5滴，轻轻摇动玻片或用洗耳球吹气使A、B染液充分混匀，染色1-2分钟（气温低或涂片较厚时可适当延长染色时间），用自来水冲去染液，待干。
8.3 高倍镜（必要时油镜）查看红细胞形态9. 结果判断与分析：在良好的染色血涂片上，正常红细胞的大小形态较为一致，直径为6.7～7.7μm，染色淡红色，中央着色较边缘淡各种病因作用于红细胞生理进程的不同阶段引起相应的病理变化，导致某些类型贫血的红细胞产生特殊的形态变化，可从染色血涂片上红细胞的大小、形态、染色等方面反映出来此种形态学变更与血红蛋白测定、红细胞计数结果相结合可粗略地推断贫血理由，对贫血的诊断和鉴别诊断有很重要的临床意义红细胞的形态变化主要表现在以下四个方面： 一）红细胞大小变更 1. 小红细胞（microcyte）直径小于6μm者称为小红细胞，正常人遇见假设血涂片中展现较多染色过浅的小红细胞，提示血红蛋白合成障碍，可能由于缺铁引起；或者是珠蛋白代谢奇怪引起的血红蛋白病而遗传性球形细胞增多症的小红细胞，其血红蛋白充盈良好，生理性中心浅染区消散 2. 大红细胞（macrocyte）直径大于10μm见于溶血性贫血及巨幼细胞贫血 3. 巨红细胞（megalocyte）直径大于15μm最常见于缺乏叶酸及维生素B12所致的巨幼细胞性贫血。
其胞体所以增大是由于缺乏上述因子时，童稚红细胞内DNA合成缺乏，不能按时分裂所致假设血涂片中同时存在分叶过多的中性粒细胞那么巨幼细胞性贫血可能性更大 4. 红细胞大小不均（anisocytosis）是指红细胞之间直径相差一倍以上而言常见于严重的增生性贫血血涂片中而巨幼细胞性贫血时尤为明显，可能与骨髓粗制滥造红细胞有关 （二）红细胞形态变更 1. 球形红细胞（spherocyte）细胞直径小于正常厚度增加常大于2μm无中心浅染色区，似球形常见于遗传性球形细胞增多症和伴有球形细胞增多的其它溶血性贫血如自身免疫性溶血性贫血、新生儿溶血病以及红细胞酶缺陷所致溶血性贫血等 2. 椭圆形红细胞（elliptocyte）细胞呈卵圆形、杆形、长度可大于宽度3-4倍，最大直径可达12.5μm，横径可为2.5μm此种红细胞置于高渗、等渗、低渗溶液或正常人血清内，其椭圆形保持不变，但幼红细胞及网织红细胞均不呈椭圆形在遗传性椭圆形细胞增多症病有血涂片中此种红细胞可达25%，甚至高达75%（正常人约占1%） 3. 靶形红细胞（target cell）红细胞中心部位染色较深，其外围为苍白区域，而细胞边缘又深染，形如射击之靶。
有的中心深染区不像孤岛而像从红细胞边缘延迟的半岛状态或柄状，而成不典型的靶形红细胞靶形红细胞直径可比正常红细胞大，但厚度变薄，因此体积可正常常见于各种低色素性贫血在珠蛋白生成障碍性贫血时尤易见到可能因HbA含量贫乏而又分布不匀所致应留神与在血涂片制作中未实时固定而引起的变更相识别 4. 镰形红细胞（sickle cell）形如镰刀状这是由于红细胞内存在着奇怪血红蛋白S所致，在缺氧处境下尤易形成此尖红细胞因此检查镰形红细胞需将血液制成湿片，然后参与恢复剂如偏亚硫酸病 5. 口形红细胞（stomatocyte）红细胞中央有裂缝，中心苍白区呈扁平状，颇似张开的口形或鱼口在正常人偶见如积压涂片中展现较多口形红细胞，见于口形红细胞增多症少量展现可见于迷漫性血管内凝血（DIC）、酒清中毒 6. 棘细胞（acanthocyte）该红细胞外观有针尖状突起，其间距不规矩突起的长度和宽度右不一在β-脂蛋白缺乏症病人的血涂片中展现较多也可见于脾切除后、酒精中毒性肝脏 疾病、尿毒症须留神与皱缩红细胞识别皱缩红细胞周边呈锯齿形排列精细、大小相等，外端较尖 7. 裂片细胞（schistocyte）为红细胞碎片或不完整的红细胞。
大小不一形状不规矩，有各种形态如刺形、盔形、三角形、扭转形等正常人血涂片中裂片细胞小于2%，迷漫性血管内凝血、微血管病性溶血性贫血、重型珠蛋白生成障碍性贫血时展现较多 8. 红细胞形态不整（poikilocytosis）指红细胞形态发生各种明显变更的处境而言，可呈泪滴状、梨形、棍棒形、新月形等，最常见于巨幼细胞性贫血可能因贫血严重但又缺乏原料，在骨髓内粗制滥造；也可能因红细胞脆性增大，在推片时碎裂所致 （三）红细胞内血红蛋白含量变更 1. 正常色素性（normochromic）正常红细胞在瑞特染色的血片中为淡红色圆盘状，中央有生理性空白区，通常称正常色素性除见于正常人外，还见于急性失血、再生障碍性贫血和白血病 2. 低色素性（hypochromic）红细胞的生理性中心浅染色区扩大，甚至成为环圈形红细胞，提示其血红蛋白含量明显裁减，常见于缺铁性贫血、珠蛋白生杨障碍性贫血、铁幼粒细胞性贫血，某些血红蛋白病时也常见到 3. 高色素性（hyperchromic）指红细胞内生下性中心浅染区消散，整个红细胞均染成红色，而且胞体也大其平均红细胞血红蛋白的含量是增高的，但平均血红蛋白浓度多属于正常。
最常见于巨幼细胞性贫血 4. 嗜多色性（polychromatic）属于尚未完全成熟的红细胞，故细胞较大，由于胞质中含多少不等的嗜碱性物质RNA而被染成灰色蓝色嗜多色性红细胞增多提示骨髓造红细胞功能活跃在增生性贫血时增多，溶血性贫血时最为多见 四）红细胞中展现奇怪布局 1. 碱性点彩红细胞（basophilic stippling cell）简称点彩红细胞，指在瑞特氏染色条件下，胞质内存在嗜碱性深蓝色颗粒的红细胞，属于未完全成熟红细胞，其颗粒大小不一、多少不等、正常人血涂片中很少见到，仅为万分之一有铅、铋、汞中毒时增多，常作为名铅中毒的诊断的筛选指标有人认为是由于红细胞的膜受重金属损伤后，其胞质中的核糖体发生聚集性引起，也可能是由于血红蛋白合成过程中原卟啉与铁结合受损所致，伴有再生紊乱现象2. 染色质小体（howell jollys body）位于成熟或幼红细胞的胞质内，呈圆形，有1-2μm大小，染紫红色，可1至数个，已表明为核剩余物，常见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血及脾切除术后 3. 卡波环（cabot ring）在嗜多色性或碱性点彩红细胞的胞质中展现的紫红色细线圈状布局，有时绕成8字形。
现认为可能是胞质中脂蛋白变性所致常与染色质小体同时存在见于巨细胞性贫血和铅中毒患者 4. 有核红细胞（nucleated eryhrocyte）即童稚红细胞，存在于骨髓中正常成人外周血液中不能见到1周之内婴儿的血涂片可见到少量在成人外周血涂片中展现有核红细胞属病理现象，最常见于各种溶血性贫血由于大量红细胞破坏后，骨髓增生，除网织红细胞大量入血外，还有一些有核红细胞提前释放入血，这说明骨髓的调理功能良好另一种可能是造血系统恶性疾患或其它部位的癌肿转达移到骨髓，最常见于急、慢性白血病及红白血病后者可见更早阶段的幼红细胞，并伴有形态上巨幼样变及其它畸变 综合以上红细胞形态变化，结合红细胞及血红蛋白减低程度，可以初步作出贫血的形态学诊断（见下表） 常见各类贫血的形态学诊断简表 血涂片中红细胞形态学所见 病因推断 参考化验工程 红细胞 血红蛋白 网织红细胞 其它 红细胞大小不均，以小型为主，有明显中心染区扩大 缺铁性贫血 ↓ ↓↓ ↑ 红细胞大小，形态大致正常 再生障碍性贫血 ↓ ↓ ↓ 血小板↓ 同上，多色性红细胞较易见到 急性失血 ↓ ↓ ↑ 中性分叶↑ 同上，易见嗜多色性红细胞，亦可见到有核红细胞 急性溶血 ↓ ↓ ↑↑ 尿中有游离Hb，血小板正常或↑ 红细胞大小不均，大红细胞及巨红细胞易见到，血红蛋白量丰富，生理性中心浅染区常见多色及有核红细胞 缺乏维生素B12及叶酸引起的巨幼细胞性贫血 ↓↓ ↓ ↑ 血小板正常或↓ 10. 质量操纵：每30份样本，抽两份样本举行室内工作人员比对分析，要求差异在10％以内。
11. 变异的潜在来源 11.1 取材不当 11.2 涂片过厚或过薄，影响形态查看 12. 操作留神事项： 12.1 取材后，务必立刻涂片12.1 推好的血膜片应在空气中摇动，使其尽快枯燥，以免细胞变形天气寒冷或潮湿时，应于37℃温箱中保温促干，以免细胞变形缩小 12.3 根据血膜厚薄，细胞量多少及室内温度等把握好染色时间，使染色效果合意 12.4 镜检时循序检查，必要时用油镜确认；并留神整体处境 13. — 8 —。