目录 一.实验目的 二.实验原理及相关知识 三.实验材料 四.实验步骤 五.注意事项 六.实验结果 七.实验小结一.实验目的(1)学习辨别ABO血型的方法(2) 掌握ABO血型鉴定的原理(3) 认识血型鉴定在输血中的重要性 在ABO血型系统中,红细胞膜有A和(或)B两种凝集原,而血清中有抗A和抗B两种抗体A凝集原加抗A抗体或B凝集原加抗B抗体会出现红细胞凝集现象,从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B凝集原以判断血型二.实验原理含某种凝集原的红细胞+含相应凝集素的血清红细胞凝集反应(agglutination)1.实验原理血型不相容的两人血液混合,则红细胞可凝集成簇抗A抗B三.实验材料 一次性采血针 玻片 消毒牙签 试管及吸管 标准抗A和抗B血清 毛细吸管及胶头 75%乙醇 消毒棉签 记号笔 材料筐2、5%的受检者红细胞悬液配制:于小试管中加入NS 5滴,用75酒精消毒指尖或耳垂,用一次性采血针迅速刺破消毒部位的皮肤,毛细吸管取血加入小试管中,混匀,即得约5红细胞悬液四.实验步骤1、生理盐水配制:称取0.9gNaCl加入少量ddH2O使之完全溶解,再用ddH2O定容至100ml即可 3.取清洁玻片一块,两端分别标明“抗A” 和“抗B” 。
4.在相应玻片上的中央处分别滴加标准抗A 和抗B血清各一滴 5.用滴管吸取红细胞悬液,分别各滴一滴 于玻片两端的血清上,注意勿使滴管与血 清相接触 6.竹签两头分别混合,搅匀 7.观察结果如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块为阳性先用肉眼看有无凝集现象,肉眼不易分辨时,则在低倍显微镜下观察,如有凝集反应,可见红细胞聚集成团 8. 判断血型 根据被试者红细胞是否被A,B型标准血清所凝集,判断血型五.实验结果判断抗A型标准血清抗B型标准血清B型抗A型标准血清抗B型标准血清A型抗A型标准血清抗B型标准血清抗A型标准血清抗B型标准血清O型AB型示示 意意 图图六、实验结果 记录本实验的结果七、临床应用 1、玻片、试管都要标记! 2、A及B标准血清绝对不能相混,不要依靠用染料颜色标记血清 3、所用玻片、试管实验前必须清洗干净,以免出现假凝集现象 4、红细胞悬液滴管头不能接触标准血清液面,牙签一端混匀一侧就不能去接触另一侧 5、一般先加血清,然后再加红细胞悬液,便于核实是否漏加血清试验用血清和试剂红细胞都应标准化 6、要在光亮的背景下观察凝集,可使用光镜检查小的凝集,同时应注意观察凝集强度,有助于A、B亚型的发现,观察后立即记录观察结果。