实验九分光光度法测定水样中铁的含量一、 实验目的1、 了解利用可见分光光度法进行定量分析的原理和方法；2、 初步掌握分光光度计的使用方法，学习测绘溶液的吸光度；3、 掌握利用标准曲线法进行定量分析的操作与数据处理方法二、 实验原理邻二氮菲（邻菲罗琳，phen）和Fe2+在pH为3-9的溶液中，生成一种稳定的 橙红色络合物 Fe（phen） 32+，其 lgK=21.3, %08=1.1 x 104L・mol-i・cm-i邻菲罗琳+ Fe2+ 一 ［邻菲罗琳-Fe2+］络合物（无色） （橙红色）铁含量在0.1〜6四g,mL-1范围内遵守Lambert-Beer定律：A= sbc=K-c其吸收曲线如下图所示邻菲罗琳---铁（ID的吸收曲线显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+全部还原为Fe2+，然后再加入邻二氮 菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围有关反应如下：2Fe3++2NH2OH・HC1 = 2Fe2++N2f+2H2O+4H++2Cl-用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的 标准溶液，在实验条件下依次用分光光度计测量各标准溶液的吸光度（A），以溶 液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
在同样实验条件下， 测定待测溶液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值，即 可计算试样中被测物质的质量浓度三、 实验仪器与试剂电子天平，容量瓶（25mlx7，或用比色管代替），刻度移液管（1ml，2ml， 5ml，10mlx2），752型分光光度计，1 cm玻璃比色皿，滴管；2mmol/L铁标准 溶液，待测含铁水样，1.5mol/L盐酸羟胺溶液，8mmol/L邻二氮菲溶液，1.0 mol/L 醋酸钠溶液，蒸馏水四、 实验内容与步骤1、标准Fe2+溶液系列及待测溶液的配制按表1所示，在编号为1-7的50 mL容量瓶（或比色管）中分别按照表1的 数据加入铁标准溶液或待测水样，然后分别加入1.00 mL 1.5mol/L盐酸羟胺溶液， 摇匀后放置2 min，再各加入2.00 mL 8mmol/L邻菲罗啉溶液、5.00 mL 1.0 mol/L 乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀表1标准系列溶液和样品液的配制实验序号1234567标准Fe2+溶液/ml00.400.801.201.602.000待测水样/ml00000010.00盐酸羟胺/ml1.001.001.001.001.001.001.00邻菲罗啉/ml2.002.002.002.002.002.002.00醋酸钠/ml2.002.002.002.002.002.002.00V总（稀释）25.0025.0025.0025.0025.0025.0025.00c (Fe2+)/mmol・L-1稀释2、吸光度A的测定（分光光度计的使用参照后附说明）选择最大吸收光波长*ax=510nm为入射光波长，以试剂空白溶液（1号）为参 比溶液，用1cm比色皿作吸收池，在分光光度计上测出所配一系列标准溶液的 吸光度。
3、标准曲线的测绘在坐标纸上，以铁标准溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线4、待测含铁水样中铁含量的测定按照同标准曲线系列溶液相同的条件，测量待测水样的吸光度，由标准曲线 计算试样中铁的含量五、 实验注意事项1、 分光光度计测量前应预热30min；2、 仪器操作应在教师指导下进行；3、 手拿比色杯的粗糙面；4、 本实验的试剂加入顺序不能随意改变；5、 反应时间应严格控制足够长，保证反应完全；6、 测定顺序是从稀到浓六、 实验思考讨论1、 根据有关实验数据，计算邻二氮菲-Fe(II )络合物在选定波长下的摩尔吸 收系数2、 在有关条件实验中，均以水为参比，为什么在测绘标准曲线和测定试液 时，要以试剂空白溶液为参比？附：722S型可见分光光度计的使用说明一、仪器的基本操作1、 测定溶液的透射比① 预热-②设定波长-③置参比样品和待测样品一④置0% (T)-⑤置100% (T) 一⑥选择透射比操作模式一⑦拉动拉杆，使待测样品进入光路一⑧记录测试数据2、 测定溶液的吸光度① 预热—30min② 设定波长—最大吸收波长入max (吸光度值一般选在0.2〜0.7之间)③ 置参比样品和待测样品—拿粗糙面、润2-3次、装2/3-3/4、吸水纸擦干④ 置。
％ (T) — T模式、开盖或用黑体厄置100% (T) —T模式、参比⑥ 选择吸光度操作模式—mode (模式)⑦ 拉动拉杆，使待测样品进入光路—©记录测试数据二、吸收池的使用① 吸收池要配对使用，因为相同规格的吸收池仍有或多或少的差异，致使光通过比色溶 液时，吸收情况将有所不同② 注意保护吸收池的透光面，拿取时，手指应捏住其毛玻璃的两面，以免沾污或磨损透 光面③ 在已配对的吸收池上，于毛玻璃面上做好记号，使其中一只专置参比溶液，另一只专 置试液同时还应注意吸收池放入吸收池槽架时应有固定朝向④ 如果试液是易挥发的有机溶剂，则应加盖后，放入比色皿槽架上⑤ 凡含有腐蚀玻璃的物质的溶液，不得长时间盛放在吸收池中⑥ 倒入溶液前，应先用该溶液淋洗内壁三次，倒入量不可过多，以吸收池高度的2/3-3/4 为宜⑦ 每次使用完毕后，应用蒸馏水仔细淋洗，并以吸水性好的软纸吸干外壁水珠，放回吸 收池盒内⑧ 不能用强碱或强氧化剂浸洗比色皿，而应用稀盐酸或有机溶剂，再用水洗涤，最后用 蒸馏水淋洗三次⑨ 不得在火焰或电炉上进行加热或烘烤吸收池⑩ 若发现吸收池被沾污时，可以用洗液清洗，也可用20W的玻璃仪器清洗超声波清洗 半小时，一般都能解决问题。