DNS法测定发酵液中葡萄糖浓度实验原理在碱性条件下，葡萄糖与DNS(3,5-二硝基水杨酸)试剂反应，葡萄糖被氧化成糖酸及其他产物，DNS被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸在一定范围内，葡萄糖的量与棕红色物质颜色的深浅相关，利用分光光度计，在550nm波长下测定吸光度值,查标准曲线并计算便可求出样品中葡萄糖的含量材料与试剂1. 仪器：50ml容量瓶，1000ml容量瓶，500ml烧杯，小烧杯，试管(带刻度25ml更好)10根，棕色瓶2. 试剂：1) 葡萄糖2) 2mol/LNaOH溶液3) 酒石酸钾钠(C4H4O6KNa•4H2O，Mr=282.22)4) 结晶酚(C6H5OH,Mr=94.11)5) 无水亚硫酸钠(Na2SO4,Mr=126.04)6) 蒸馏水7) DNS8) DNS试剂配制：准确称取DNS6.3g于500ml烧杯中，用少量蒸馏水溶解后，加入2mol/LNaOH溶液262ml，再加到500ml含有酒石酸钾钠185g的热水溶液中，再加结晶酚5g和无水亚硫酸钠5g，搅拌溶解，冷却后移入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至,充分混匀贮于棕色瓶中，室温放置一周后使用9) 葡萄糖标准溶液配制：取适量葡萄糖装入称量瓶，再85°C烘箱烘至恒重，放入干燥器冷却。
精确称取干燥后的葡萄糖0.5g加蒸馏水溶解，至50ml容量瓶定容，制成10g/L的葡萄糖溶液分别取蒸馏水稀释成葡萄糖标准液，浓度为0.2g/L,0.4g/L,0.6g/L,0.8g/L,1.0g/L,1.2g/L,1.4g/L,1.6g/L,1.8g/L,2.0g/L实验步骤1. 标准曲线制作分别取标准液1.0ml于25ml刻度试管中，按下表加入试剂，沸水中显色5min用冷水冷却到室温后，加水至25ml，摇匀，再550nm处用分光光度计测定上述各溶液的A550值以葡萄糖浓度为纵坐标，A550值为横坐标，作出标准曲线并回归出标准方程试管号葡萄糖标准液浓度/(g/L)0010.220.430.640.851.061.271.481.691.8102.0加量/mlDNS试剂/ml0.03.01.02. 发酵液中还原糖的测定1）发酵液过滤或离心得到上清液2）用蒸馏水将上清液稀释到0.22.0g/L3）取稀释后的发酵滤液1.0ml于25ml刻度试管中，加入DNS试剂3.0ml,沸水中显色5min4）冷却到室温后，加蒸馏水定容到25ml，摇匀，在分光光度计波长550nm处测定溶液的A550值四、数据记录1. 制作标准曲线，计算标准曲线方程，y=ax+b,y为葡萄糖浓度（g/L），x为该浓度下A550值。
2. 记录发酵稀释滤液的A550值3. 计算发酵液中还原糖浓度:将测得发酵稀释滤液的A550值代入标准曲线方程，算得浓度,再乘以稀释倍数，即为发酵液中还原糖浓度。