CCK-8法测细胞存活率1、在96孔板中配置100》L的5000CelL/mL细胞悬液将培养板在培养箱预培养24h（37°C,5%CO2）22、向培养板加入10》L不同浓度的多肽1uM、2uM、5uM、10uM每种多肽浓度设3个复孔，并设不加细胞液的调零孔和只加细胞液、不加肽液的空白对照孔3、将培养板在培养箱孵育一段适当的时间24h4、向每孔加入10》LCCK溶液（注意不要再孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数）5、将培养板在培养箱内孵育1-4ho6、一般用酶标仪测定在450nm处的吸光度7、若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10》L0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下24h内测定，吸光度不会发生变化注意:如果待测物质有氧化性或还原性的话,可在加CCK之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响当然药物影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可活力计算：细胞活力*（%）=[A（加药）-A（空白）]/[A（0加药）-A（空白）]X100A（加药）：具有细胞、CCK溶液和药物溶液的孔的吸光度A（空白）：具有培养基和CCK溶液而没有细胞的孔的吸光度A（0加药）：具有细胞、CCK溶液而没有药物溶液的孔的吸光度*细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力多肽稀释：母液40uM100ul1000uM4ul+96ulPBS10uM60ul40uM15ul+45ulPBS5uM40ul40uM5ul+35ulPBS2uM40ul10uM8ul+32ulPBS1uM40ul10uM4ul+36ulPBSA=pisL9K20A1-A4(10uM、5uM、2uM、1uM)=A5-A8=A8-A12B=pisL9K22TGC=pisL9K22WKD=GV21-2E=空白E1-E3=1OOul培养基+10ulCCK0加药E5-E7=100ul细胞+lOulCCK。