实验室常用培养基的配制方法Ampicillin（氨卡青霉素）（100 mg/ml）组份浓度 100 mg/ml Ampicillin配制量 50 ml配制方法 1.称量 5 g Ampicillin 置于 50 ml 离心管中2.加入 40 ml 灭菌水，充分混合溶解后，定容至 50 ml3.用0.22 pm过滤膜过滤除菌4•小份分装（1 ml/份）后，-20°C保存IPTG（异丙基-B -D-硫代半乳糖苷）（24 mg/ml）组份浓度 24 mg/mL IPTG 配制量 50 mL配制方法1.称1.2 g IPTG置于50 ml离心管中2. 加入 40 ml 灭菌水，充分混合溶解后，定容至 50 ml3. 用0 22 pm过滤膜过滤除菌4小份分装（1 ml,份）后，-20C保存X-Gal （20 mg/ml）组份浓度 20 mg/ml X-Gal配制量 50 ml配制方法1.称量l g X-Gal置于50 ml离心管中2.加入40 ml DMF（二甲基甲酰胺），充分混合溶解后，定容至50 ml3•小份分装（1 ml/份）后，-20C避光保存LB 培养基组份浓度 1%（W/V）Tryptone（胰蛋白胨），0.5%（W/V）Yeast Extract（酵母提取物）, 1%（W/V）NaCl配制量 1 L 配制方法1.称取下列试剂，置于l L烧杯中。
Tryptone10 gYeast Extract5 gNaCl10 g2. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解3. 滴加 5 N NaOH（约 0.2 m1），调节 pH 值至 7.04. 加去离子水将培养基定容至 1 L5高温高压灭菌后，4C保存TB 培养基1.2%(W/V)Tryptone2.4%(W/V)Yeast Extract0.4%(V/V)Glycerol17mMKH2PO472mMK2HPOa配制量 1L配制方法 1.配制磷酸盐缓；中液(0.17 M KH2PO4，0.72 M K2HPO4)100 ml溶解2.31 g KH2PO4和12.54 g K2HPO4于90 ml的去离子水中，搅拌溶解后, 加去离子水定容至100 ml,高温高压灭菌2.称取下列试剂，置于1 L烧杯中Tryptone12 gYeast Extract24 gGlycerol4 m3. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解4. 加去离子水将培养基定容至1 L后，高温高压灭菌5•待溶液冷却至60°C以下时，,加入100 ml的上述灭菌磷酸盐缓冲 液6.4 C保存SOB 培养基 组份浓度2%(W/V)Tryptone0.5%(W/V)Yeast Extract0.05%(W/V)NaCl2.5mMKCl10 mMMgCl2配制量 1 L配制方法1.配制250 mMKCl溶液。
在90 ml的去离子水中溶解l.86 gKCl后，定容至100 ml2. 配制2 M MgCl2溶液在90 ml去离子水中溶解19 g MgCl2后，定容至100 ml,高温高压灭菌3. 称取下列试剂，置于l L烧杯中Tryptone20 gYeast Extract5 gNaCl0.5 g4. 加入约800 ml的去离子水，充分搅拌溶解5. 量取10 m1 250 mMKCl溶液，加入到烧杯中6. 滴加5 N NaOH溶液(约0.2 m1)，调节pH值至7.07. 加入去离子水将培养基定容至 l L8. 高温高压灭菌后，4C保存9. 使用前加入5 ml灭菌的2 M MgCl2溶液SOC 培养基 组份浓度2%(W/V)Tryptone0.5%(W/V)Yeast Extract0.05%(W/V)NaCl2.5 mMKCl10 mMMgCl220 mMGlucose配制量 100 mL配制方法1•配制1 M Glucose溶液将18 g Glucose溶于90 ml去离子水中，充分溶解后定容至100 ml用0.22 pm滤膜过滤除菌2.向l 00 ml SOB培养基中加入除菌的1 M Glucose溶液2 ml,均匀 混合。
3.4°C保存RM 培养基组份浓度1%(W/V)Yeast Extract0.2%(W/V)KH PO2%(W/V)Glucose配制量 100 mL配制方法1.配制50% Glucose溶液将200gGlucose溶于300 ml去离子水中，充分溶解后定容至400 ml用0.22pm 滤膜过滤除菌2.向96 ml RM培养基中加入除菌的50% Glucose溶液4ml,均匀混 合3.4C保存 抗生素的贮存溶液及其工作浓度抗生素贮存液*1工作浓度浓度保存条件严紧型质粒松弛型质粒氨苄青霉素50 mg/m 1（溶于水）-20 °C20 pg/ml60 pg/ml羧苄青霉素50 mg/mL（溶于水）-20 °C20 pg/ml60 pg/ml氯霉素34 mg/mL（溶于乙醇）-20C25 pg/mll70 pg/mL卡那霉素10 mg/mL（溶于水）-20C10 pg/ml50 pg/ml链霉素10 mg/mL（溶于水）-20C10 pg/ml50 pg/ml四环素*25 mg/mL（溶于乙醇）-20C10 pg/ml50 pg/mL*1以水为溶剂的抗生素贮存液应通过0.22 pm滤器过滤除菌。
以乙醇为溶剂的抗 生素溶液无须除菌处理所有抗生素溶液均应保存于不透光的容器中2 镁离子是四环素的拮抗剂，四环素抗性菌的筛选应使用不含镁盐的培养基（如 LB 培养基）各种组份名称各种凝胶体积所对应的各种组份的取样量1 m1 2 m13 m1 4 ml5 ml6 m18 m110 mLH刃0.681.42.12.73.44.15.56.830%Acrylamide0.170.330.50.670.831.01.3171.0MTris-HCl(pH6.8)0.130.250.380.50.630 751.0l.2510%SDS0.010.020.030.040.050 060.080.110%过硫酸鞍0.010.020.030.040.050.060.080.1TEMED.0.0010.002 0.0030.0040.0050.0060.0080.01SDS-PAGE分离胶配方表各种组份名称 各种凝胶体积所对应的各种组份的取样量5m110m115m120 ml25m130m140m150 ml6%GelH2O2.65.37.010.613.215.921.226.530%Acrylamide1.02.03 04.05.06.08.010.01.5 MTris-HCl(pH8.8)1.32.53.85.06.37.510.012.510%SDS0.050.10.150.20.250.30.40.510%过硫酸铵 00.050.10.150.20.250.30.40.5TEMED .010.0040.0080.0120.0150.020.0240.0320.048%GelH2O2.34.66.99.311.513.918.523.230%Acrylamide1.32.74.05.36.78.010.713.31.5MTris-HCl(pH8 8)1.32.53.85.06.37.510.012.510%SDS0.050.10.150.20.250.30.40.510%过硫酸铵0.0.050.10.150 20.250.30 40.5TEMED0.0030.0060.0090.0120.0150.0180.0240.0310%GeLH2O1.94.05.97.99.914.915.919.830%Acrylamide1.73.35.06.78.310.013.316.71.5 MTris+HCl(pH8.8)1.32.53.85.06.37.510.012.510%SDS0.050.10.150.20.250 30.40.510%过硫酸铵0.050.10.150.20.250.30.40.5TEMED0.0020.0040.0060 0080.01 0.01 20.01 60.0212%GeLH2O1.63.34.96.68.29.913.216 530%Acrylamide2.04.06.08.010.012.016.020.01.5 MTris-HCl(pH8.8)1.32.53.85.06.37.510.012.510%SDS0.050.10.150.20.250.30.40.510%过硫酸铵0.050.10 150.20.250.30.40.5TEMED0.0020.0040.0060.0080.010.0120.0160.0215%GelH2O1.12.33.44.65.76.99.211.530%Acrylamide2.55.07.510.012.515.020.025.01.5MTris-HCl(pH8.8)1.32.53.85.06.37.510.012.510%SDS0.050.10.150.20.250.30.40.510%过硫酸铵0.050.10.150.20.250.30.40.5TEMED0.0020.0040.0060.0080.010.0120.0160.02。