实验八甘蔗汁中总糖及蔗糖含量的测定（费林法）一、原理蔗糖的测定常以还原糖的测定为基础，样品经前处理后，加入稀盐酸，在加热条件下 使蔗糖水解转化为还原糖，再以斐林试剂法测定试样水解后的总还原糖量（即食品中的总 糖）及水解前的还原糖量（食品原有的还原糖），两者之差再乘以校正系数0.95即为蔗糖 量二、操作步骤：1、 样品处理准确吸取lO.OOmL甘蔗汁移入100mL容量瓶中缓慢加入5mL乙酸锌溶液及5mL10.6%亚铁 氰化钾溶液，加水至刻度，混匀，静置后过滤，弃去初滤液，收集滤液，即样品处理液2、 标定碱性酒石酸铜溶液（费林试剂）：（1） 准确吸取5.00mL碱性酒石酸铜甲液及5.00mL乙液，置于150mL锥形瓶中2） 加水10mL，加入玻璃珠数粒3） 从滴定管滴加约9mL葡萄糖（转化糖）标准溶液，2min内加热至沸，趁沸以每 两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去，记录消耗葡萄糖标准 溶的总体积4） 同时平行操作三份，取其平均值3、 水解前样品中还原糖含量的测定：取样品处理液，按还原糖法测定水解前的还原糖含量同实验七）4、 样品总糖量的测定：（1） 吸取10.00mL样品处理液置于100mL容量瓶中。
2） 加入6mol/L盐酸5mL，在68〜70°C水浴加热15min3）迅速冷却后加2滴指示剂，用20% NaOH中和（甲基红指示剂：溶液颜色由红 变黄；酚酞指示剂：由无色变浅粉红色），加水至刻度，混匀，按还原糖法测定水解后的 总还原糖含量同实验七）三、实验记录及处理:碱性酒石酸铜溶液的标10ml碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖（彳淀转化糖）的质量mg葡萄糖标准溶液蔗糖标准溶液（转化糖）标准溶液浓度p ,mg / ml标定所耗标液的 体积V, ml123平均123平均10mL碱性酒石酸 铜相当于葡萄糖（转化糖）的质 量 F, mg公式可P 1 X V]公式:F2 = P 2 X V2/0.95食品中还原糖含量测定水解前（试样原有还原糖）水解后（总糖）试样量，ml稀释过程试样定容总体 积 V, ml样液预测总消 耗量Vo, ml样液正式滴定 总消耗量V] ,ml123平均值123平均值测得还原糖含 量，%公式： ^ .、 F还原糖（以匍萄糖或转化糖计）% = V X100m x—xlOOOV样品中还原糖含量R1, %总糖含量r2,% （以转化糖计）蔗糖的含量，%公式：蔗糖％ = （R2-R1）X 0.95四、 说明及注意事项1. 严格控水解条件以确保结果的准确性及重现性。
2. 其余注意事项同还原糖的测定五、 实验准备1、 仪器： 2、 试剂： 3、 试剂配制附录：(1) 碱性酒石酸铜甲液：称取15g硫酸铜(CuS04 ・5H20)及0.05g次甲基蓝，溶于 水中并稀释至1000mL2) 碱性酒石酸铜乙液：称取50g酒石酸钾钠及75g氢氧化钠，溶于水中，再加入4g 亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000mL，贮存于橡胶塞玻璃瓶内3) 转化糖标准溶液：准确称取经105°C烘干至恒重的纯蔗糖l.OOOOg，用100ml水溶 解，置于三角瓶中，加6mol/L盐酸5mL，摇匀于68~70C水浴中加热15min,取出，冷却 至室温，加水定容至1000ml，摇匀此溶液每1ml相当于1mg蔗糖，相当于1/0.95 mg转 化糖4) 5mol/L NaOH:称取 20g NaOH，溶于水中，稀释至 100 ml5) 6mol/L HCl (1+1):量取110ml浓HCl加入到100ml蒸馏水中，混匀。