Waters e2695型高效液相色谱仪操作规程仪器组成及开机1.1仪器组成 本仪器由waters2695分离单无、2489紫外可见光检测器、2424 蒸发光散射检测器、Empower色谱工作站和打印机组成2695分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道真空脱气机，可 容纳120个样品瓶的自动进样系统，柱温箱，内置的柱塞密封垫清洗系统，溶剂 托盘，液晶显示器，键盘用户界面及软盘驱动器1. 2开机 先打开电脑，再依次接通2695分离单元、检测器和打印机的电 源（注：在打开2424蒸发光散射检测器电源之前，先开启气体供应）接通2695 分离单元后，约20秒仪器自检，约1分钟后，显示主屏幕，此时继续各部件的 初始化，待主屏幕上主标题区出现“ Idle ”仪器自检通过，进入待命状态溶剂管理系统的准备2. 1流动相的脱气 确认所有溶剂管路都充满溶剂，按［Menu/Status］，进入 “Status （1）"屏幕，光标选“Degasser"按［Enter］显示选项屏幕，Mode为“on"2.2 启动溶剂管理系统2. 2. 1干启动 当溶剂的管路是干的或是需要更换溶剂时，在“ Status （1）" 屏幕下，按［Direct Function］，光标选中“Dry Prime"，按［Enter］，显示“Dry Prime" 屏幕，按欲启动的溶剂管路的屏幕键，如［Open A］，光标选“Duration”，按数字 键输入时间（一般为5分钟），按［Continue］，待限定时间结束后，重复操作，使 实验所需的各溶剂管路均启动、排气并充满流动相。
2. 2. 2湿启动 在“Status （1）”屏幕下，光标选“Composition”中欲使用 的流动相，输入 100%，按［Direct Function］，光标选“Wet prime"，按“Enter"， 显示Wet prime"屏幕，输入流速和时间（5ml/min和5min）按［OK］待限定时 间结束后，对每种流动相重复操作3样品管理系统的准备3. 1 A管带黄色标记、B管带蓝色标记号、C管带红色标记、D管带绿色标记， 绿色管为冲洗泵头用，白色管为问冲洗进样器用，所用溶剂均为甲醇：水（1： 1） 将样品瓶插到样品盘合适的位置，打开样品仓门，显示“ Door is Open ”屏幕， 装入样品盘，按［Next］，直至所有样品盘装毕，关仓门编辑分析方法及执行样品分析表4.1创建项目 双击电脑桌面图标“Empower”，用户名输入“system”密码输 入“manager”选中操作项目和色谱系统f确定在菜单栏“管理"f创建新项 目…选择父项目…下一步…输入表空间值f按“下一步”逐步设置f完成f管理 f改变/项目，在该窗口切换项4.2编辑方法组 调用方法组编辑向导f新建f设置检测器参数｛2489检测器 设置波长模式、波长、灯开启、采样速率；2424检测器［通用］里设置：检测器 设置增益（0〜1000）、数据率、灯开启，喷雾器设置模式（加热、关、冷却）， 漂移管设置温度（5〜100°C之间，常用50或60°C）,气体压力设置好（通常设 置为25psi〜60psi）。
［数据通道］依据需要可勾选信号、信号-MBF、气体压力、 喷雾器温度、漂移管温度）｝-2695主机参数（通用、流量、柱温、通道）f保 存仪器方法f选择同使用该方法组的数据有关的仪器方法f选择处理方法、报告 方法f下一步f完成4.3监视基线和单次进样点击平衡系统/监视基线图标…输入仪器方法…平衡监视器，开始按设置方法 平衡基线待基线平衡、压力平稳后f单次进样，当要对分析方法做修改时，通 过中断运行样f方法组仪器随时改变方法f另存覆盖…平衡监视f执行新方法， 可重复至最佳分析方法确定4.4运行样品组 使用样品组向导逐步建立样品组表，可在编辑好的样品组表 最后一行添加关机方法（功能为：平衡色谱柱）设置自动关机f保存样品组方法 f运行当前样品组方法5处理数据并打印报告浏览项目…通道…双击打开图谱f文件f新建处理方法f逐步点击“下一步”选 中所需参数…输入方法名f完成f处理参数f适应性f选中计算适应性结果、空 体积时间（分）处输入1.0、所需药典选择“全部”f保存处理方法f浏览项目 f选中需处理的图谱f右击鼠标f选中使用指定的处理方法f确定f浏览项目 f结果f更新选中图谱f预览f采用所需报告模板打印。
6关机 使用完毕，按规定用适当的溶剂冲洗色谱柱、系统管路，填写使用记录一、 清洗流路系统：1、 如果流动相有无机盐或缓冲液，在开机后，排空前预先设置好低流速的纯水 为流动相的分析方法，待排空气完成后，即可执行冲柱20分钟后，再换上并更改 为应用的流动相平衡柱2、 如果使用缓冲液，先用水更换缓冲液，清洗1小时，然后更换甲醇清洗40 分钟3、 如果使用有机溶剂，直接更换甲醇清洗50分钟即可二、 2424检测器注意事项：1、 关闭2424检测器：（1） 从色谱柱和检测器中排除所有缓冲剂2） 让未经缓冲剂处理的流动相通过系统3） 关闭泵4） 让雾化气体通过检测器10分钟，以排干蒸发管和检测室5） 停止气体流动6） 关闭检测器的电源2、 要执行定期维护：提示：为防止损坏色谱柱，在从液体通路中排除流动相之前，应移开色谱柱1） 将漂移管温度设置为适当的退溶温度提示：对于大多数溶剂来说，50 ° C （122 ° F）就是适当的退溶温度2） 用100% HPLC级水替换缓冲流动相，然后以3 mL/min的流量将系统冲 洗10分钟3、 清洗漂移管开启气体供应，设置漂移管温度100° C，用100% HPLC级水整夜冲洗。
三、 根据我们工作的情况，可固定泵如下：A为甲醇、B为分析用流动相，C为 乙腊、D为水、R为50%甲醇当分析样品时可把B瓶换上流动相，D换上新过滤 并脱过气的水，适当的流动相比例可随时调整，当分析结束后，B瓶和D换上甲 醇并排气四、 二个洗柱LC时间程序供参考(1)甲醇洗机方法LC时间程序时间流速ABCD1.0100%00050分钟0.0100%000⑵水-甲醇洗机LC时间程序(管为纯水)时间流速ABCD1.0000100%60分钟1.0000100%65分钟1.0100%000105分钟0.0100%000起草人：审核人：2011年 月 日。