微生物检验标本的正确采集及注意事项临床微生物标本的采集应在抗生素应用前或停药一周后进行，如不能停用抗生素，应于下次抗生素应用前采集各种标本采集后应立即送检；无菌部位的标本采集应严格无菌操作一、 血液及骨髓标本的采集【标本送检指征】病人出现以下临床表现，或同时具备以下几种临床表现时应采集血培养1 发热（≥38℃）或低温（≤36℃）2 寒战3 白细胞增多（＞10×109/L，特别有“核左移”时）4 粒细胞减少（成熟的多形核白细胞＜1×109/L）5 血小板减少6 皮肤、粘膜出血7 昏迷、休克8 多器官衰竭9 血压降低10 呼吸加快几种特殊情况：1 可疑新生儿败血症时，除发热或低温外，很少培养出细菌，应增加尿液和脑脊液培养2 老年菌血症病人可能不发热或不低温，如伴有身体不适、肌痛或中风，可能是感染性心内膜炎，也应采取血培养骨髓培养与血液培养的送检指征是基本一致的，临床常规血液感染有指征时以抽取血培养为主但当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者，抽取骨髓培养阳性率会远高于血培养标本采集的容器】各种血培养仪配套血培养瓶(分为中和抗生素成人需氧瓶、中和抗生素成人厌氧瓶、儿童瓶)【标本的采集方法】防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题，采血前严格执行消毒程序是十分重要的。
1 皮肤消毒程序：严格按以下三步法进行：(1) 75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s 以上2) 用一根碘酊或聚维酮碘（碘伏）棉签消毒皮肤，1～2％碘酊作用30s 或聚维酮碘作用60s，从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达3cm以上3) 75％酒精脱碘对碘过敏的病人只能用70%酒精消毒，消毒60s待穿刺部位酒精挥发干燥后穿刺采血2 培养瓶消毒程序(1) 用75％酒精消毒血培养瓶橡皮塞子2) 酒精作用60s3) 在血液注入血培养瓶之前，用无菌纱布或棉签清除橡皮塞子表面剩余的酒精，然后注入血液3 培养瓶接种程序抽取血液后，不要换针头，直接注入血培养瓶中，轻轻颠倒混匀，以防血液凝固如果同时作需氧和厌氧培养，应先将标本接种到厌氧瓶中，然后再注入需氧瓶，严格防止将空气注入厌氧瓶中标本采集注意事项】1 血培养采集的时间和频率(1) 采血培养应尽量在抗菌药物使用之前，在24h 内采集2～3 份血培养（一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养），每次2 瓶因为研究已证实，2～3 份血培养足以检测所有的菌血症和真菌血症2) 入院前2周内接受抗菌药物治疗的患者，连续3 天，每天采集2 份，可选用能中和或吸附抗菌药物的培养基。
3) 对间歇性寒战或发热的患者，应在寒战或体温高峰到来之前0.5～1h采集血液，因为发热时血液中可能没有细菌2 采血量成人：推荐每个血培养瓶应加的血量为5～10ml，血液和肉汤比为1：5～10（体积：体积）儿童：因很难获得大量的血液，一般静脉采血2～4ml 用于血培养骨髓采量一般为1～2ml标本的保存】接种标本后立即送检，如不能立即送检，室温保存，且勿冷藏因为某些苛氧菌可在冰箱温度中死亡，而使培养阳性率下降在运往实验室的途中如果天气寒冷，应采取一定的保温措施二、 下呼吸道（痰）标本的采集【标本送检指征】1 咳嗽、咳痰：痰液可为脓性、血性、铁锈色或红棕色胶胨样痰2 咯血：肺结核病人常痰中带血3 呼吸困难4 发热5 胸痛：当炎症病变累及壁层胸膜时，会发生胸痛肺部感染的患者有25～50％可能发生菌血症，应同时作血培养标本采集方法】1 自然咳痰法：晨痰为佳，用温开水漱口数次（为减少口腔正常菌群污染标本），深咳呼吸道深部痰（非后鼻部分泌物、非唾液）留于无菌容器内对于痰量少或无痰的患者可采用雾化吸入45℃10％NaCL水溶液，使痰液易于排出对咳痰少的幼儿，可轻轻压迫胸骨上部的气管，使其咳嗽2、对咳嗽乏力或昏迷病人，可用吸痰管经鼻腔或口抵达气管腔内吸引痰液。
用纤维支气管镜可直接在病灶部位采集高浓度的感染病原菌，但不能完全避免咽喉部正常菌群感染 3、双侧肺部感染伴人工气道如气管切开或气管插管患者，可用吸痰管经人工气道估插至叶支气管水平吸引痰液 【注意事项】1 晨痰为好多数病人清晨痰较多，易于采集且清晨痰含有的病理成分较多，会增加培养的阳性率2 有1/4-1/2肺部感染患者可能发生菌血症，应同时作血培养3 能在抗菌药物应用之前采集标本，标本采集后应立即送检，否则可暂存于4℃冰箱三、 上呼吸道（咽拭子）标本的采集【标本送检指征】1 病毒性普通感冒伴有明显咽痛时，怀疑为咽部链球菌感染，应做细菌培养2 细菌性咽－扁桃体炎：明显咽痛、畏寒、发热，体温可达39℃以上3 上呼吸道感染易并发鼻窦炎、中耳炎、气管－支气管炎，需送相应部位分泌物或痰液进行细菌培养标本的采集方法】嘱患者先用清水漱口，由检查者将其舌外拉使悬雍垂尽可能向外牵引, 用压舌板将舌向下向外压，用无菌棉拭子越过舌根到咽后壁或悬雍垂的后侧,反复擦拭数次然后送检，拭子应避免触及舌、口腔粘膜和唾液标本采集注意事项】1 采集时间：应于抗生素应用之前时间上可无严格限制，但咽部是呼吸和食物的通路，也应晨起后采集为佳。
2 送检：应立即送检四、 尿液标本的采集【标本送检指征】1 有典型的尿路感染症状；2 肉眼脓尿或血尿；3 尿常规检查表现为白细胞和/或亚硝酸盐阳性；4 不明原因的发热，无其他局部症状；5 留置导尿管的病人出现发热；6 膀胱排空功能受损；7 泌尿系统疾病手术前标本的采集方法】1 清洁中段尿标本，晨尿为佳，嘱咐患者睡前少饮水，保证与上次排尿时间间隔4小时以上女性采样前用清水冲洗外阴部及尿道口，男性须翻转包皮冲洗，用清水冲洗尿道口，然后收集标本，方法是排尿弃去前段尿，取中段尿于无菌容器内送检于一小时内接种2、导尿管导尿采样可减少污染对留置导尿者，可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁，用联空针筒的细针斜穿管壁抽吸尿液；或拔去闭式引流的集尿袋，弃取导尿管前段尿液，留无污染的膀胱内尿液数毫升送检不可从集尿袋的下端管口留取标本标本采集注意事项】1通常取清晨第一次尿液送检2多数药物均通过尿液排泄，因此，无论用何种方法采集尿液均宜在用药之前进行细菌培养3尿培养不得加防腐剂或消毒剂4标本采集后应立即送检，否则可暂存于4℃冰箱五、 大便标本的采集【标本送检指征】1 急性腹泻：大便次数明显增多，腹痛，里急后重，往往伴有发热，大便性状为粘液便或脓血便。
2 慢性腹泻：大便次数多，多为稀便，伴有全身乏力等症状3 无痛性大量水样便或米泔样稀便4 先吐后泻：恶心、呕吐、腹痛、腹泻有集体发病史，多为细菌性食物中毒所致5 抗生素治疗后腹泻：常发生于长期抗生素治疗后，糊状便，排便次数增加6 高热惊厥：通常为中毒性痢疾，多见于婴幼儿和小儿标本的采集方法】1 自然排便采集法：自然排便后，挑取有脓血、粘液部位的粪便2-3g，液状粪便取絮状物1～3ml盛于无菌的容器中送检2 直肠拭子法：适于排便困难者或婴幼儿可用肥皂水将肛门周围洗净，用无菌盐水、保存液或增菌液湿润的无菌棉拭子插入肛门,成人约4～5cm，儿童约2～3cm，与直肠粘膜表面接触，轻轻转动,放灭菌试管内送检标本采集注意事项】1 采集时间：应在急性期采样，以提高检出率，最好在用药前2 送检：要采集新鲜标本立即送检六、脓液及创伤感染分泌物标本的采集1. 对开放性病灶的采集：如眼结膜脓性分泌物、扁桃体、外耳道、手术后切口、导管治疗感染、瘘管内脓液、生殖道分泌物等均属于开放性病灶应先用灭菌生理盐水冲洗表面污染菌，去除旧的分泌物，用灭菌拭子采集病灶深部的分泌物，也可取感染部位下的组织送检2. 闭锁性脓肿：如淋巴脓肿、肺脓肿、肝脓肿、腹腔脓肿、盆腔脓肿等，对封闭的脓肿常采用穿刺或引流的的方法采样，应在用药前采集。
检验科细菌室 2012年8月26日。