实验一微量移液器的使用与校准一、 实验目的1. 了解吸液管的操作原理和熟练掌握吸液管的操作方法2. 了解吸液管的校准方法和保证实验的精确度二、 实验原理微量移液器（有的称“移液枪”、“取液器”）是一种取样量连续可调的精密取液仪器，其基本原 理是依靠活塞的上下移动其活塞移动的距离是由调节轮控制螺杆机构来实现的，推动按钮带动 推杆是活塞向下移动、排出了活塞腔内的气体松手后，活塞在复位弹簧的作用下恢复其原位， 从而完成一次吸液过程微量移液器移动液体的是以微升为基本单位，在操作过程中因空气的进出介入相关动作，都 会影响实验的精确度，必须考虑温度、密闭性、轴心移动速度、试剂的蒸汽三、实验材料仪器试剂吸液管(P1000/ P200 / P20 )蒸馏水尖端管（1000入/ 200入）电子天平防水膜(Parafilm)四、实验步骤（一）实验前的准备工作1、 选择1000P、200P、20P的吸液管2、 反复练习怎样使用吸液管3、将防水膜放到电子天平中，并将天枰调零二）实验步骤1、轻轻转动微量移液器的调节轮，使读数显示为所要取液体的体积2、把白套筒顶端插入吸头，在轻轻用力下压的同时，把手中的移液器按逆时针方向旋转一下。
切记力不能过猛，更不能采取剁吸头的方法来进行安装，因为那样做会对您手中的移液器 造成不必要的损伤°P1000使用蓝色微量移液器头，P200及P20使用黄色微量移液器头3、 轻轻按下推动按钮，推到第一档4、 手握移液器，将吸液尖垂直浸入蒸馏水中，浸入深度为2~4mm5、 经2~3s后缓慢松开推动按钮，即从第一挡还原① 第一次我们用量程为P1000的微量吸移器分别量取1000此，500此.,200此蒸馏水，每组 量取三次② 第二次我们用P20分别量取20此，10此，5此蒸馏水，每组量取三次③ 第三次我们用P200的微量吸移器分别量取200此，100此，50p蒸馏水，每组量取三次6、 将微量移液器垂直放在天枰上，按动推动按钮到第一挡，液体泄出，再继续按动推动按钮到 第二挡，使吸液尖末端残留液体完全泄出，放松按钮，使推动按钮复原7、 观察电子天枰，并记录数值分别为：① 量程为P1000的微量吸液器的1000此，500此.,200此.蒸馏水② 量程为P20的微量吸液器的20此，10此，5此蒸馏水③ 量程为P200的微量吸液器的200此，100此，50此蒸馏水8、 每次用天枰读取数值后要清零9、 每次完成测取数值后，要把防水膜中的取出，放到收容器中。
10，按下吸液管活塞下侧的按钮，将尖端管退到垃圾桶中五、实验结果*在25摄氏度下，一毫升液态水的重量为一克体积 =质量/密度由于在本次实验中，所 称量的液体（蒸馏水）的密度为1所以体积=质量我们就可以通过电子天枰，测出所求液 体的质量，求出液体的体积并通过测出的质量和微量移液器取出的体积，可以算出误差值横轴：微量移液器的种类以及实验的次数、所称取的数值纵轴：所称蒸馏水的量实验11000p123平均误差值1000pL.0.9900g1.0000g0.9900g0.9933g-0.667%500pL.0.4900g0.5000g0.5000g0.4967g-0.660%200pL.0.2100g0.2000g0.2100g0.2067g3.350%误差率：＜=0.8实验220p123平均误差值20此.0.0180g0.0200g0.0190g0.0190g-5.00%10此.0.0100g0.0090g0.0100g0.0097g-3.00%5pL.0.0050g0.0050g0.0050g0.0050g0%误差率：＜=1实验三200p123平均误差值200pL.0.2100g0.2000g0.2100g0.2067g3.350%100pL.0.1100g0.1100g0.0900g0.1033g3.300%50此.0.0500g0.0500g0.0500g0.0500g0%误差率：＜=0.8实验误差：误差值=【(平均体积-理想体积)/理想体积】X100P1000： (0.9933-1.000) /1.000*100%=-0.667%(0.4967-0.5) /0.5*100%=-0.660%(0.2067-0.2) /0.2*100%=3.350%P200： (0.2067-0.20) /0.2*100%=3.350%(0.1033-0.10) /0.1*100%=3.300%(0.0500-0.05) /0.05*100%=0%P20： (0.0190-0.02) /0.02*100%=-5.00%(0.0097-0.01) /0.01*100%=-3.00%(0.005-0.005)/0.005*100%=0%六、讨论及注意事项(一)实验误差分析1、 吸液过程中，使移液器倾斜，导致移液不准确(应该垂直吸液，慢吸慢放)。
2、 在实验过程中没有换吸头，使用了带有残余液体吸头的移液器，导致出现误差3、 在实验过程中一直在使用同一个微量移液器头，使吸头中有溶液的残留，在进行下一次量取的时候，导致释放液体的时候量取的液体过多，出现误差4、 在吸取液体时由于过快的放开按钮，使溶液吸入过快、过多，导致误差的出现5、 在实验称量的过程中，由于没有及时将防水膜中的液体吸出，而进行下一次实验，导致 了误差的出现6、 实验时，在量取溶液后，在微量移液器头外壁上会有残留液，在释放液体是外壁溶液也 会被吸附下来，释放到天平上的容器中，产生误差7、 在试验过程中可能因为温度的关系，导致出现了误差在室温较低的情况下，移液器手 握的部分温度较高，外界空气进入后会引起体积膨胀，温度较低的液体吸进后，与液体接 触的空气又会发生密度改变，这些细微变化有时会影响计量的精确度大注意事项1、 设定移液体积：从大量程调节至小量程为正常调节方法，逆时针旋转刻度即可从小量程 调节至大量程时，应先调至超过设定体积刻度，再回调至设定体积，这样可以保证移液器 的精确度2、 装配移液枪头：将移液枪垂直插入吸头，左右旋转半圈，上紧即可用移液器撞击吸头 的方法是非常不可取的，长期这样操作回导致移液器的零件因撞击而松散，严重会导致调 节刻度的旋钮卡住。
3、 吸液及放液：垂直吸液，吸头尖端浸入液面3mm以下，吸液前枪头先在液体中预润洗， 慢吸慢放，放液时如果量很小则应吸头尖端可靠容器内壁4、吸有液体的移液枪不应平放，枪头内的液体很容易污染枪内部而可能导致枪的弹簧生锈5、 移液枪在每次实验后应将刻度调至最大，让弹簧回复原型以延长移液枪的使用寿命6、 吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指，绝不允许突然松开，以防将溶液吸入过快而冲 入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气7、 为获得较高的精度，吸头需预先吸取一次样品溶液，然后再正式移液，因为吸取血清蛋 白质溶液或有机溶剂时，吸头内壁会残留一层“液膜”，造成排液量偏小而产生误差8、 浓度和粘度大的液体，会产生误差，为消除其误差的补偿量，可由试验确定，补偿量可 用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定9、 可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法，来校正取液器，1ml蒸馏水20C 时重 0.9982g10、 在设置量程时，请注意旋转到所需量程数字清清楚楚在显示窗中，所设量程在移液器量程 范围内不要将按钮旋出量程，否则会卡住机械装置，损坏了移液器11、 移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体（如浓酸、浓碱、有机物等）。
12、 严禁使用移液器吹打混匀液体13、 不要用大量程的移液器移取小体积的液体，以免影响准确度同时，如果需要移取量程范围以外较大量的液体，请使用移液管进行操作七、参考文献1、 张维铭主编、2003，《现代分子生物学实验手册》，（第一章基础篇，第二节通用实验 设备及其使用方法，）北京：科学出版社P12~P152、 王琰、钱士匀主编，2005.9，《生物化学和临床生物化学检验Experiment Course In Biochemistry And Clinical Biochemistry Test）》（第一章实验室基本知识，第一节常用 玻璃器皿），北京：清华大学出版社 P8~P103、 陈钧辉、陶力等编、2003.4，《生物化学实验》，（附录，移液器的使用）北京：科学出版社，（21世纪高等院校教材）P231~P232。